GB/T 5009.111-2003 谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定

ICS67.040

C53霭黯

中华人民共和国国家标准

GB/T5009.111-2003

代替GB/T14929.5-1994

谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇

的测定

Determinationofdeoxynivalenolincereal

andcerealproducts

2003-08-11发布2004-01-01实施

中华人民共和国卫生部**

中国国家标准化管理委员会‘’“

GB/T5009.111-2003

前言

本标准代替GB/T14929.5-1994《谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定方法》。

本标准与GB/T14929.5-1994相比主要修改如下:

—修改了标准的中文名称，标准中文名称改为:谷《物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定》;

—按GB/T20001.4-2001标《准编写规则第4部分:化学分析方法》对原标准的结构进行

了修改。

本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。

本标准起草单位:卫生部食品卫生监督检验所。

本标准第一法主要起草人:魏润蕴。

本标准第二法主要起草人:阳传和、罗雪云、计融。

原标准于1994年首次发布，本次为第一次修订。

GB/T5009.111-2003

谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定

范围

本标准规定了谷物及其制品(蛋糕、饼干、面包等)中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON,呕吐毒素)的薄层

色谱测定方法及免疫测定方法(ELISA),

本标准适用于谷物(小米、玉米、大麦等)及其制品(蛋糕、饼干、面包等)中脱氧雪腐镰刀菌烯醇

(DONA吐毒素)的测定。

本标准第一法检出限。1m留kg,第二法检出限为。Ing/kg,

第一法薄层色谱测定法

2原理

谷物及其制品中的脱氧雪腐镰刀菌烯醉经提取、净化、浓缩和硅胶C>薄层展开后，加热薄层板。由

于在制备薄层板时加人了三氯化铝，使脱氧雪腐镰刀烯醇在365nm紫外光灯下显蓝色荧光，与标准

比较。

3试剂

3，1三氯甲烷。

32无水乙醇。

3.3甲醇。

3.4石油醚的℃一卯℃或30G-600C.

3.5乙酸乙酷。

3.6乙睛。

3.7丙酮。

3.8异丙醇。

3.9乙醚。

310无水乙醚。

3.11抓化铝(AICI,‘6H,O):化学纯。

3.12中性氧化铝:层析用，经3000C活化4h，置干燥器中备用。

3.13活性炭:20g活性炭，用3ocol/L盐酸溶液浸泡过夜、抽滤后，用热蒸馏水洗至无氯离子，在

1200C烘干备用。

3.14硅胶G;薄层层析用。

3.15脱氧雪腐镰刀菌烯醇(以下简称DON)标准溶液，精密称取，5.0mgDON，加乙酸乙酷一甲醇(”

十1)溶解。转人10mL容量瓶中，用乙酸乙醋一甲醇(19+1)稀释至刻度，此标准溶液含DON0.5mg/mL,

吸取此标准溶液。5mL，用乙酸乙醋一甲醉(19十1)稀释至10mL，此溶液每毫升含DON25Kg,

4仪器

4.1小型粉碎机。

4.2电动振荡器。

4375mL玻璃蒸发皿。

GB/T5009.111-2003

4.4层析柱:内径2cm，长10cm，不具活塞。

4.510mL具塞浓缩瓶:底部具0.2mL刻度尾管。

4.6玻璃板:5cmX20cm,

4.7薄层涂布器:0.3mm,

4.8展开槽:内长25cm，宽6cm,高4cm,

4.9紫外光灯:365nn,

4.10微量注射器:10WL,501-L,

4.1150mL平底管。

4.12双波长薄层扫描仪:带数据处理机。

5分析步骤

5.，提取

称取20g粉碎试样置于200mL具塞锥瓶中，加8mL水和100mL三抓甲烷一无水乙醇(8+2),密

塞。在瓶塞上涂层水，盖严防漏，振荡1h，通过折叠快速定性滤纸过滤，取25mL滤液于75mL玻璃蒸

发皿中，置90℃水浴上通风挥干。

5.2净化

5.2.1液一液分配

5.2.1.1谷物:用50mL石油醚分次溶解蒸发皿中的残渣，洗人100mL分液漏斗中，再用20mL(玉

米试样用30mL)甲醇一水((4+1)分次洗涤蒸发皿，转人同一分液漏斗中。

5.2.1.2谷物制品(蛋糕、饼干、面包等):用100mL石油醚分次溶解蒸发皿中的残渣，洗人250mL分

液漏斗中，再用30mL甲醇一水((4+1)分次洗涤蒸发皿，转人同一分液漏斗中。

振摇分液漏斗1.5min，静置约15min使分层后，将下层甲醇一水提取液过柱净化，不要将两相交界

处的白色絮状物放人柱内。

5.2.2柱净化

5.2.2.1小麦及其制品:在层析柱下端与小管连结处塞约。.1g脱脂棉，尽量塞紧，先装人。.5g中性

氧化铝，敲平表面，再加0.49活性炭，敲紧。将层析柱下端小管插人一橡