GB 5009.209-2016 食品安全国家标准 食品中玉米赤霉烯酮的测定

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中华人民共和国国家标准

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GB5009.2092016

食品安全国家标准

食品中玉米赤霉烯酮的测定

2016-12-23发布2017-06-23实施

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

发布

国家食品药品监督管理总局

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GB5009.2092016

前言

本标准代替/—《谷物中玉米赤霉烯酮的测定》、/—《食品中玉

GBT5009.2092008GBT235042009

米赤霉烯酮的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法》、/—《动物源食品中玉米赤霉

GBT219822008

、、、、

醇玉米赤霉醇玉米赤霉烯醇玉米赤霉烯醇玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮残留量检测方法液

-α--

ββ

/》、/—《、

相色谱质谱质谱法进出口大豆油菜籽和食用植物油中玉米赤霉烯酮的检验方

-SNT17452006

法》、/—《进出口粮谷中玉米赤霉烯酮的测定免疫亲和柱液相色谱法》。

SNT17722006-

/—,:

本标准与GBT5009.2092008相比主要变化如下

———“”;

标准名称修改为食品安全国家标准食品中玉米赤霉烯酮的测定

———增加了适用范围;

———增加了荧光光度法作为第二法;

———增加了固相萃取柱净化液相色谱质谱法作为第三法。

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Ⅰ

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GB5009.2092016

食品安全国家标准

食品中玉米赤霉烯酮的测定

1范围

本标准规定了食品中玉米赤霉烯酮的测定方法。

,,、、,、、

本标准第一法适用于粮食和粮食制品酒类酱油醋酱及酱制品大豆油菜籽食用植物油中玉

,、、,

米赤霉烯酮的测定第二法适用于大豆油菜籽食用植物油中玉米赤霉烯酮的测定第三法适用于牛

、、、、。

肉猪肉牛肝牛奶鸡蛋中玉米赤霉烯酮的测定

第一法液相色谱法

2原理

,,,

用乙腈溶液提取试样中的玉米赤霉烯酮经免疫亲和柱净化后用高效液相色谱荧光检测器测定

外标法定量。

3试剂和材料

,,/。

除非另有说明本方法所用试剂均为分析纯水为GBT6682规定的一级水

3.1试剂

():。

3.1.1甲醇CHOH色谱纯

3

():。

3.1.2乙腈CHCN色谱纯

3

3.1.3氯化钠()。

NaCl

氯化钾()。

3.1.4KCl

磷酸氢二钠()。

3.1.5NaHPO

24

磷酸二氢钾()。

3.1.6KHPO4

2

吐温()。

3.1.7-20CHO

5811426

盐酸()。

3.1.8HCl

3.2试剂配制

:()。

提取液乙腈水

3.2.1-9+1

:、、、,

3.2.2PBS清洗缓冲液称取8.0g氯化钠1.2g磷酸氢二钠0.2g磷酸二氢钾0.2g氯化钾用990mL

,,。

水将上述试剂溶解用盐酸调节至用水定容至

pH7.01L

/:、、、,

吐温缓冲液称取氯化钠磷酸氢二钠磷酸二氢钾氯化钾用

3.2.3PBS-208.0g1.2g0.2g0.2g

,,,。

水将上述试剂溶解用盐酸调节至加入吐温用水定容至

900mLpH7.01mL-201L

3.3标准品

(,:),。

玉米赤霉烯酮号纯度或经国家认证并授予标准物质证

CHOCAS17924-92-4≥98.0%

18225

1

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GB5009.2092016

书的标准物质。

3.4标准溶液配制

:(),,/

3.4.1标准储备液准确称取适量的标准品精确至0.0001g用乙腈溶解配制成浓度为100μgmL

的标准储备液,以下避光保存。

-18℃

:,,/、/

3.4.2系列标准工作液根据需要准确吸取适量标准储备液用流动相稀释配制成10nmL50n

gg

、/、/、/的系列标准工作液,避光保存。

mL100nmL200nmL500nmL4℃

ggg

3.5材料

:,,。

玉米赤霉烯酮免疫亲和柱柱规格或柱容量或等效柱

3.5.11mL3mL≥1500ng

:,,。

3.5.2玻璃纤维滤纸直径11cm孔径1.5m无荧光特性

μ

4仪器和设备

:。

4.1高效液相色谱仪配有荧光检测器

:/。

4.2高速粉碎机转速≥12000rmin

:/。

4.3均质器转速≥12000rmin

://。

4.4高速均质器转速18000rmin~22000rmin

4.5氮吹仪。

4.6空气压力泵。

4.7玻璃注射器:。

10mL

:。

4.8天平感量0.0001g和0.01g

5分析步骤

5.1提取

5.1.1粮食和粮食制品

(),,

称取40.0g粉碎试样精确到0.1g于均质杯中加入4g氯化钠和100mL提取液以均质器

(),。,

4.3高速搅拌提取2min定量滤纸过滤移取10.0mL滤液加入40mL水稀释混匀经玻璃纤维滤

,。

纸过滤至滤液澄清滤液备用

、、

5.1.2酱油醋酱及酱制品

(),,,。

称取25.0g精确到0.1g混匀的试样用乙腈定容至100.0mL超声提取2min定量滤纸过滤

,,。

移取10.0mL滤液并加入40mL水稀释混匀经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清滤液备用

、、

5.1.3大豆油菜籽食用植物油

()(),

准确称取试样40.0g准确到0.1g大豆需要磨细且粒度≤2mm于均质杯中加入4.0g氯化钠

,(),。

和100mL提取液以高速均质器4.4高速搅拌提取1min定量滤纸过滤移取10.0mL滤液并加入

,,。

40mL水稀释经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清滤液备用

5.1.4酒类

(,)

取脱气酒类试样含二氧化碳的酒类使用前先置于4℃冰箱冷藏30min过滤或超声脱气或其他

2

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GB5009.2092016

(),,。

不含二氧化碳的酒类试样20.0g精确到0.1g于50mL容量瓶中用乙腈定容至刻度摇匀移取

,,。

10.0mL滤液并加入40mL水稀释混匀经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清滤液备用

5.2净化

5.2.1粮食和粮食制品

,(),

将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下准确移取10.0mL相当于0.8g样品5.1.1中的滤液注入玻

。,//

璃注射器中将空气压力泵与玻璃注射器连接调节压力使溶液以滴滴的流速缓慢通过免

1s~2s

,。,//,

疫亲和柱直至有部分空气进入亲和柱中用水淋洗柱子次流速为滴滴直至有部

5mL11s~2s

,。,/。

分空气进入亲和柱中弃去全部流出液准确加入甲醇洗脱流速约为滴收集洗脱液于

1.5mL1s

,,,。

玻璃试管中于55℃以下氮气吹干后用1.0mL流动相溶解残渣供液相色谱测定

、、,

5.2.2酱油醋酱及酱制品酒类

,,

将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下准确移取1或中的滤液注入玻璃注射器

0.0mL5.1.25.1.4

。,//

中将空气压力泵与玻璃注射器相连接调节压力使溶液以滴滴的流速缓慢通过免疫亲和

1s~2s

,。,

柱直至有部分空气进入亲和柱中依次用10mLPBS清洗缓冲液和10mL水淋洗免疫亲和柱流速

为滴//,,。,

1s~2滴直至空气进入亲和柱中弃去全部流出液准确加入1.0mL甲醇洗脱流速约为

s

/。,,,

1滴s收集洗脱液于玻璃试管中于55℃以下氮气吹干后用1.0mL流动相溶解残渣供液相色谱

测定。

、、

5.2.3大豆油菜籽食用植物油