GB 5009.169-2016 食品安全国家标准 食品中牛磺酸的测定

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中华人民共和国国家标准

—

GB5009.1692016

食品安全国家标准

食品中牛磺酸的测定

2016-08-31发布2016-09-20实施

中华人民共和国

发布

国家卫生和计划生育委员会

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GB5009.1692016

前言

/—《》—《

本标准代替GBT5009.1692003食品中牛磺酸的测定和GB5413.262010食品安全国家标

准婴幼儿食品和乳品中牛磺酸的测定》。

/—,:

本标准与GBT5009.1692003相比主要变化如下

———“”;

标准名称修改为食品安全国家标准食品中牛磺酸的测定

———;

增加了OPA柱后衍生高效液相色谱法为第一法增加了丹磺酰氯柱前衍生高效液相色谱法

为第二法;

———删除了薄层色谱法。

Ⅰ

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GB5009.1692016

食品安全国家标准

食品中牛磺酸的测定

1范围

本标准规定了食品中牛磺酸测定的方法。

、、、、、、、、

本标准适用于婴幼儿配方食品乳粉豆粉豆浆含乳饮料特殊用途饮料风味饮料固体饮料果

冻中牛磺酸的测定。

第一法邻苯二甲醛()柱后衍生高效液相色谱法

OPA

2原理

,,、、,

试样用水溶解用偏磷酸沉淀蛋白经超声波震荡提取离心微孔膜过滤后通过钠离子色谱柱分

,(),,。

离与邻苯二甲醛OPA衍生反应用荧光检测器进行检测外标法定量

3试剂和材料

,,/。

除非另有说明本方法所用试剂均为分析纯水为GBT6682规定的一级水

3.1试剂

3.1.1偏磷酸。

3.1.2柠檬酸三钠。

3.1.3苯酚。

3.1.4硝酸。

:。

3.1.5甲醇色谱纯

3.1.6硼酸。

3.1.7氢氧化钾。

邻苯二甲醛()。

3.1.8OPA

巯基乙醇。

3.1.92-

聚氧乙烯月桂酸醚()。

3.1.10Bri-35

j

3.1.11亚铁氰化钾。

3.1.12乙酸锌。

:/。

3.1.13淀粉酶活力≥1.5Umg

3.2试剂配制

偏磷酸溶液(/)

3.2.130L

g

(),。

称取30.0g偏磷酸3.1.1用水溶解并定容至1000mL

1

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GB5009.1692016

3.2.2柠檬酸三钠溶液

(),,(),()

称取柠檬酸三钠加水溶解加入苯酚用硝酸调

19.6g3.1.2950mL1mL3.1.33.1.4pH

,。

至经微孔滤膜过滤

3.10~3.250.45m

μ

()

3.2.3柱后荧光衍生溶液邻苯二甲醛溶液

(/):(),(),

3.2.3.1硼酸钾溶液0.5molL称取30.9g硼酸3.1.626.3g氢氧化钾3.1.7用水溶解并定容至

1000mL。

:(),(),

3.2.3.2邻苯二甲醛衍生溶液称取0.60g邻苯二甲醛3.1.8用10mL甲醇3.1.5溶解后加入

巯基乙醇()和(),用/硼酸钾溶液()定容至

0.5mL2-3.1.90.35Bri-353.1.100.5molL3.2.3.1

gj

,。。

经微孔滤膜过滤临用前现配

1000mL0.45m

μ

3.2.4沉淀剂

:(),。

沉淀剂称取亚铁氰化钾用水溶解并定容至该沉淀剂在室温下

3.2.4.1Ⅰ15.0g3.1.11100mL3

个月内稳定。

:(),。

沉淀剂称取乙酸锌用水溶解并定容至该沉淀剂在室温下个月

3.2.4.2Ⅱ30.0g3.1.12100mL3

内保持稳定。

3.3标准品

纯度,:。

≥99%CAS107-35-7

3.4标准溶液配制

牛磺酸标准储备溶液(/)

3.4.11mmL

g

(),。

准确称取0.1000g牛磺酸标准品3.3用水溶解并定容至100mL

3.4.2牛磺酸标准工作液

(),:/、

将牛磺酸标准储备溶液3.4.1用水稀释制备一系列标准溶液标准系列浓度为0mL

μg

/、/、/、/、/,。

5.0mL10.0mL15.0mL20.0mL25.0mL临用前现配

μgμgμgμgμg

4仪器和设备

:。

4.1高效液相色谱仪带有荧光检测器

4.2柱后反应器。

4.3荧光衍生溶剂输液泵。

4.4超声波震荡器。

:。

4.5H计精度0.01

p

:/。

4.6离心机不低于5000rmin

微孔滤膜:。

4.70.45m

μ

:。

4.8天平感量0.0001g

2

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GB5009.1692016

5分析步骤

5.1试样制备

(),,

准确称取固体试样1~5精确至0.01于锥形瓶中加入40℃左右温水20mL摇匀使试样

ggg

,。(),。

溶解放入超声波振荡器中超声提取10min再加50mL偏磷酸溶液3.2.1充分摇匀放入超声波

,,,

振荡器中超声提取10min~15min取出冷却至室温后移入100mL容量瓶中用水定容至刻度并摇

;/,(),

匀样液在5000rmin条件下离心10min取上清液经0.45m微孔膜4.7过滤接取中间滤液以备

μ

进样。

,(),,(

谷类制品称取试样5g精确至0.01g于锥形瓶中加入40℃左右温水40mL加入淀粉酶酶活

/),,,,

力≥1.5Um0.5混匀后向锥形瓶中充入氮气盖上瓶塞置50℃~60℃培养箱中30min取出冷

gg

,(),。,

却至室温再加50mL偏磷酸溶液3.2.1充分摇匀放入超声波振荡器中超声提取10min~15min

,,;/

取出冷却至室温后移入100mL容量瓶中用水定容至刻度并摇匀样液在5000rmin条件下离心

,(),。

10min取上清液经0.45m微孔膜4.7过滤接取中间滤液以备进样

μ

()