NY/T 546-2002 猪萎缩性鼻炎诊断技术

ICS11.220

B41

中华人民共和国农业行业标准

NY/T546-2002

猪萎缩性鼻炎诊断技术

Diagnostictechniquesforatrophicrhinitisofswine

2002一08一27发布2002一12一01实施

中华人民共和国农业部发布

371

NY/T546-2002

前言

猪萎缩性异炎是猪的重要疫病，无法治疗和终生危害，是集约养猪业的大敌，世界动物卫生组织

[WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OfficeIntentionaldesEpizootic(法),OIE〕和我国将之列

为B类或二类动物疫病。

OIE诊《断试验和疫苗标准手册》(2000)(ManualofStandardsforDiagnosticTestsandVaccines,

2000)第2.6.1章规定了诊断该病的技术框架(未规定技术细节)。本标准与该章异同在于:

—本标准采用了该章规定的主要技术，但未完全采用某些推荐技术(如酶联免疫吸附试验

(ELISA)和禽幼红细胞(EBL)细胞覆层琼脂法等)，并充分反映了本国的多年研究成果和

经验;

--一本标准依据诊《断试验和疫苗标准手册》的技术框架，规定了具体的操作程序。

本标准的附录B、附录C为规范性附录，附录A为资料性附录。

本标准由农业部畜牧兽医局提出。

本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。

本标准起草单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。

本标准主要起草人:彭发泉、杨旭夫、苑士祥。

NY/T546-2002

猪萎缩性真炎诊断技术

1范围

本标准规定了猪传染性萎缩性鼻炎的诊断技术。

本标准适用于猪传染性萎缩性鼻炎的诊断、检疫和对无特定病原((SPF)猪的监控。

2诊断方法

2.1临床检查

2.1.1对仔猪群应检查下列症状:有一定数目的仔猪流鼻汁、流泪，经常喷嚏、鼻塞或咳嗽，但无热，个

别鼻汁混有血液。一些仔猪发育迟滞，犬齿部位的上唇侧方肿胀。

2.1.2对育成猪群和成猪群应检查:

a)鼻塞，不能长时间将鼻端留在粉料中采食;妞血，饲槽沿染有血液;

b)两侧内眼角下方颊部形成“泪斑”;

c)鼻部和颜面有如下变形:

1)上额短缩，前齿咬合不齐(评定标准:下中切齿在上中切齿之后为阴性，反之为阳性);

2)鼻端向一侧弯曲或鼻部向一侧歪斜;

3)鼻背部横皱摺逐渐增加;

4)眼上缘水平上的鼻梁变平变宽。

d)伴有生长欠佳。

2.1.3检疫猪群发现有上列症候群，可以临床上初步诊断猪群有支气管败血波氏杆菌工相菌的传染或

与产毒素性多杀巴氏杆菌的混合感染，特别是2.1.20具有本病临床指征意义，需进行检菌、血清学试

验及病理解剖检查，予以确诊。

2.2病理检查

2.2.1尸体外观检查

主要检查有无鼻部和颜面变形及发育迟顿，记录其状态和程度。对上顺短缩可以作定性，下中切齿

在上中切齿之后判为“一”，反之判定为“+”;测量上与下中切齿的离开程度，如一3mm或+12mm分

别判定为正常或阳性。

2.2.2异部横断检查

2.2.21检查鼻腔是在鼻部作1-3个横断，检查横断面。鼻部的标准横断面在上顺第二前臼齿的前

缘.此处鼻甲骨卷曲发育最充分。先除去术部皮肉，然后用锐利的细齿手锯或钢锯以垂直方向横断鼻部。

可再向前(通过上额犬齿)或向后作第2和第3新的横断，其距离大猪为1.5cm-2cm,哺乳仔猪约

0.5cm,

2.2.2.2为便于检查断面，先用脱脂棉轻轻除去锯屑。如果拍照，应将鼻道内的凝血块等除去，使断面

构造清晰完整，必要时可用吸水纸吸除液体。

2.2-2.3首先检查鼻道内的分泌物的性状和数量及枯膜的变化(水肿、发炎、出血、腐烂等)。

22.2.4主要检查鼻甲骨、鼻中隔和鼻腔周围骨的对称性、完整性、形态和质地(变形、骨质软化或疏

松、萎缩以至消失)以及两侧鼻腔的容积。如果需要，可以测量鼻中隔的倾斜或弯曲程度，鼻腔纵径及两

侧鼻腔的最大横径。除肉眼检查外，应对鼻甲骨进行触诊，以确定卷曲及其基础部的骨板的质地(正常骨

NY/T546-2002

板坚硬，萎缩者软化以至消失)。鼻甲骨萎缩主要发生于下鼻甲骨，特别是腹卷曲。鼻腔标准横断面的萎

缩性鼻炎分级标准见附录A

2.2.3肺部检查

少数病仔猪伴有波氏杆菌性支气管肺炎。肺炎区主要散在于肺前叶及后叶的腹面部分，特别是肺门

部附近，也可能散在于肺的背面部分。病变呈斑块状或条状发生。急性死亡病例均为红色肺炎灶。

2.2A判定

具有鼻甲骨萎缩病变的病猪不论有或无临床鼻部弯曲等颜面变形症状，均判定为萎缩性鼻炎病猪。

2.3细菌检查

由猪鼻腔采取鼻粘液同时进行支气管败血波氏杆菌I相菌及产毒素性多杀巴氏杆菌的分离。猪群

检疫以4--16周龄特别是4-8周龄猪的检菌率最高。

2.3.1异粘液的采取

2.31.1由两侧鼻腔采取鼻粘液，可用一根棉头拭子同时采取两侧鼻粘液、或每侧鼻粘液分别用一根

棉头拭子采取

2.3.1.2拭子的长度和粗细视猪的大小而定，应光滑可弯曲，由竹皮等材料削成，前部钝圆，缠包脱脂

棉，装人容器，高压灭菌

2.3门.3小猪可仰卧保定，大猪用鼻拧子保定。用拧去多余酒精的酒精棉先将鼻孔内缘清拭，然后清拭

鼻孔周围

2.3.1.4拭子插人鼻孔后，先通过前庭弯曲部，然后直达鼻道中部，旋转拭子将鼻分泌物取出，将拭子

插人灭菌空试管中(不要贴壁推进)，用试管棉塞将拭子杆上端固定

2.3.1.5夏天不能立即涂抹培养基时，应将拭子试管立即放人冰箱或冰瓶内。鼻粘液应在当天(最好在

儿小时内)涂抹培养基，拭子仍保存于4'C冰箱以备复检。

2.3-1-6采取鼻汁时病猪往往喷嚏，术者应注意手的消毒，防止材料交叉污染。

2.31.7解剖猪时，应同时采取鼻腔后部(至筛板前壁)和气管的分泌物及肺组织进行培养。鼻锯开术

部及鼻锯应火焰消毒，由鼻断端插人拭子直达筛板，采取两侧鼻腔后部的分泌物。由声门插人拭子达气

管下部，在气管壁旋转拭子取出气管上下部的分泌物。在肺门部采取肺组织，如有肺炎并在病变部采取

组织块;也可以用拭子插人肺断面采取肺汁和破碎组织。

2.3.2分离培养

2-3.2门培养基制备

血红_素峡喃锉酮改良麦康凯琼脂(HFMA)，新霉素洁霉素血液马丁琼脂(NI.HMA),绵羊血改良鲍

姜氏琼脂，三糖铁脉半固体高层培养基，配制方法见附录Be

2.3.2.2操作

所有病料都直接涂抹在已干燥的分离平板上分离支气管败血波氏杆菌使用血红素峡喃哇酮改良

麦康凯琼脂(HFM八)平板(见第B.1章)，分离多杀巴氏杆菌使用新霉素洁霉素血液马丁琼脂CNI.H-

MA)平板(见第B.2章)。应尽量将棉拭子的全部分泌物浓厚涂抹于平板表面，将组织块的各断面同样

浓厚涂抹。重要的检疫，如种猪检疫，对每份鼻腔病料应涂抹每种分离平板2个。不同种分离平板不能

混涂同一拭子(因抑菌剂不同)。对伴有肠道感染(腹泻)的或环境严重污染的猪群，每份鼻腔病料可用一

个平板作浓厚涂抹，另一个平板作划线接种，即先将棉拭子病料在平板的一角作浓厚涂抹，然后以铂圈

作划线稀释接种。

2.3.2.2门猪支气管败血波氏杆菌的分离培养

将接种的HFMA平板于370C培养40h--72h,猪支气管败血波氏杆菌菌落不变红，直径约

1mm-2mm左右，圆整、光滑、隆起、透明，略呈茶色，较大的菌落中心较厚呈茶黄色，对光观察呈浅蓝

色。用支气管败血波氏杆菌O-K抗血清作活菌平板凝集反应呈迅速的典型凝集。有些样品菌落粘稠或

十韧，在玻片上不能做成均匀菌液，须移植一代才能正常进行活菌平板凝集试验。未发现典型菌落时，对

NY/'r546--2002

所有可疑菌落，均需作活菌平板凝集试验，以防遗漏。如菌落小，可移植增菌后进行检查。如平板上有大

肠杆菌类细菌(变红、粉红或不变红)或绿脓杆菌类细菌(产生或不