NY 293-1995 苏云金芽孢杆菌制剂

y

中华人民共和国农业行业标准

NY293-95

苏云金芽抱杆菌制剂

1995-06-06发布

1995-10-01实施

中华人民共和国农业部发布

中

华

人

民

共

和

国

农

业

行

业

标

准

NY2

9

3-95

苏

云

金

芽

抱

杆

菌

制

剂

1

主

题

内

容

与

适

用

范

围

本

标

准

规

定

了

苏

云

金

芽

抱

杆

菌

制

剂

（

可

湿

性

粉

剂

和

悬

浮

剂

）

的

技

术

要

求

、

检

验

方

法

、

检

验

规

则

以

及

标

志

、

包

装

、

运

输

、

贮

存

。

本

标

准

适

用

于

微

生

物

发

酵

方

法

制

得

防

治

鳞

翅

目

害

虫

的

苏

云

金

芽

抱

杆

菌

制

剂

（

可

温

性

粉

剂

和

悬

浮

剂

）

。

本

标

准

不

适

用

于

加

有

化

学

农

药

的

苏

云

金

芽

抱

杆

菌

复

配

制

剂

。

2

引

用

标

准

GB/T1600农药水分测

定

方

法

GB/T1601农药pH

值

的

测

定

方

法

GB/T1604农药验收

规

则

GB/T1605商品农药采

样

方

法

GB3796农药包装通

则

GB/T5451农药可湿

性

粉

剂

湿

润

性

测

定

方

法

HG/T2-896农药粉剂细

度

测

定

方

法

3

技

术

要

求

3.1外观z可湿性粉

剂

为

灰

白

色

一

棕

褐

色

粉

，

悬

浮

剂

为

棕

黄

色

一

褐

色

悬

浮

液

体

。

3.2苏云金芽抱

杆

菌

制

剂

还

应

符

合

表

l

要

求

：

表

1

可

湿

性

粉

剂

悬

浮

剂

＼

工

兰

工

优

级

优

级

一

级

合

格

合

格

一

级

毒

力

效

价

［

P

xIU/mg(µL)]

二

主

3

2000二主主8000

主

8000

二

主

二＂160004000二主2000

[HaIU

/mg

(µL)

]1>

p

H

值6.5~7.54.5~6.5

100%

,

s;;;1soµm(80日筛）

细

度

，

µ

m98%<75µm(200目筛〉

98%<150µmClOO目筛〉

悬

浮

率

（

有

效

成

分

）

，

%

二

三

8

0

二

兰

8

0

湿

润

时

间

，

m

iz

nζ

3

含

水

量

，

%

（

m

/

m

)

<4.0

注

：1)Px和Ha分别为Plutellaxylostella（小菜峨〉和Heliothisarmigera（棉铃虫）的缩写。

中

华

人

民

共

和

国

农

业

部

1

9

9

5

-

0

6

-

0

6

批

准

1

9

9

5

-

1

0

-

0

1

实

施

NY293-95

4检验方法

4,1毒力测定方法－＝用小菜峨（Plutellaxylostella）作试虫的测定方法川、菜峨饲养方法见附录A（补

充件）］（仲裁法）。

4,,.1试剂或材料

4.1.1.1标准品：CS-95,H3.b，效价20000IU/mg;

4.,.,.2小菜峨幼虫：Plutellaxylostella;

4,,.1.3食用菜籽油；

4.1.1.4酵母粉t工业用；

4.,.,.5维生素C：医用，分析纯p

4.,.1.6琼脂粉1凝股强度大于300g/cm2;

4.,.1.7磷酸氢二挥CHG3-1228）：分析纯；

4.,.1.8磷酸二氢铮（GB1274）：分析纯F

4.1.1.9聚山梨醋－80：粘度3.5×10-4~5.5×10-4m2/s;

4.,.1.10菜叶粉：甘蓝型油菜叶，80℃烘干，磨碎，过80目筛z

4.1.1.11蕉糖（HGB3310）：分析纯；

4.1.1.12纤维素粉CF-11;

4.1.,.13氢氧化锦（GB/T2306）：分析纯；

4.1.1.14氯化铀（GB1266）：分析纯：

4.1.1.1515%尼油金：对起基苯甲酸甲醋（化学纯）j寄于95%洒精z

4.1.l1610%甲醒榕液z甲醒（GB685，分析纯）溶于蒸锚水z

4,1.,.17干璐素溶破：干酷素（BR生物试剂）2g加2mL1mol/m3氢氧化锦（4.1.1.13),8mL蒸馆

水，灭菌p

4.1.1.18磷酸缓冲液：氯化纳（4.1.1.14)8.5g；磷酸氢二掷（4.1.1.7)6.0g，磷酸二氢饵（4.1.1.8)

3.0g；聚山梨醋－80(4.1.1.9）潜液0.1mL；蒸锢水1000mL。

4.1.2仪器

4.l2.1磨口三角瓶：250mL;

4.,.2.2分析天平：精确度0.1mg;

4.l2.3电动搅拌器：无级调速，100～6000r/min;

4.1.2.4医用手术刀；

4.,.2.5振荡器；

4,,.2.6水恪锅F

4,,.2.7养虫管：9cm×2.5cm;

4.,.2.8烧杯：50mL;

4,,.2.9试管：18mm×180mm;

4,1.2.10玻璃珠：如mm;

4.,.2.11移液管：10mL。

4.,.3测定步骤

4.,.3.1感染攘的配制

a.标准品：用分析天平（4.1.2.2）准确称取标准品（4.1.1.1)100.0~150.0mg，精确到0.1mg,

装入250mL装有10粒玻璃珠（4.1.2.10）的磨口三角瓶（4.1.2.1)中；加入100mL磷酸缓冲被（4.1.

1.1肘，浸泡10min，在振荡器（4.1.2.5）上振荡30min；得到浓度约为lmg/mL的标准品母攘（该母液

在4'C冰箱中可存放10d）；然后将标准品母液稀释成浓度为（1.000,0.500,0.250,0.125,0.0625,

2

NY293-95

0.0313mg/mL)的六个稀释感染液。

b.可温性粉剂样品：称取相当于标准品毒力效价的样品适量，精确到0.2mg，加100mL磷酸缓

冲液，然后参照标准品的配制方法配制样品感染液。

c.悬浮剂样品z将样品用力振蔼20min，充分摇匀F用移液管（4.1.2.11）吸取样品10.00mL，精

确到0.01mL，加入装有90mL无菌蒸锢水的磨口三角瓶中，吸洗三次，充分摇匀得到含100µL/mL的

母液；将母液稀释成含量分别为5.000,2.500,1.250,0.625,0.313和0.156µL/mL的六个稀释掖。

对有些效价过高或过低的样品在测定前需先以3个距离相差较大的搜度做预备试验，估计LCso值

（半致死中被度）的范围，据此设汁稀释放度。

4,1.3.2感染饲料的配制

饲料配方z维生素C(4.1.1.5)0.5g、干酷素溶液（4.1.1.17)1.0mL、菜叶粉（4.1.1.10)3.0g、酵

母粉（4.1.1.4)1.5g、纤维素粉（4.1.1.12)1.0L琼脂粉（4.1.1.6)2.0g、萧糖（4.1.1.11)6.0g、菜籽

油（4.1.1.3)0.2mL、10%甲醒榕液（4.1.1.16)0.5mL、15%尼泊金（4.1.1.15)1.0mL、蒸馆水

100mL

将煎糖、酵母粉、干酷素溶液、琼脂粉加入90mL的蒸锢水中调匀；搅拌煮沸，使琼脂完全熔化，加

入尼泊金，搅匀；将其他成分用剩余的10mL蒸馆水调成糊状F当琼脂冷却至75℃左右时与之充分混

合，搅匀，置55℃水洛锅（4.1.2.6）中保温备用。取50mL的烧杯（4.1.2.8)7只，写好标签，置55℃水浴

中预热；分别向每个烧杯中加入lmL对应浓度的感染液，缓冲液作空白对照；向每个烧杯中加入9mL

熔化的感染饲料F用电动搅拌器（4.1.2.3）搅拌205，使每个烧杯中的感染液与饲料充分渥匀。

将烧杯静置，待冷却凝固后，用医用手术刀（4.1.2.4）将感染饲料切成1cm×lcm的饲料块，每个

被度取4个饲料块分别放入4支养虫管（4.1.2.7）中，每管放入一块，写好标签。

4.,.3.3接虫感染

随机取己放置饲料的养虫管，每管投入10头小菜峨三龄初幼虫（4.1.1.2），每放度4管，塞上棉塞，

写好标签，在相同饲养条件下饲养。

4.1.4结果检查及计算

感染48h后检查试虫的死亡情况。判断死虫的标准是以细签轻轻触动虫体，无任何反应者判为死

亡。

计算标准品和样品各浓度的供测昆虫死亡率，查Abbott表或用式(1）计算校正死亡率（X1）。对照

死亡率10%以下需要校正，大于10%则试验结果无效。

T-C

X1(%)＝一一一一×100…………..(1)

1-C

式中：T处理死亡率；

C→→对照死亡率。

将感染液各坡度换算成对数值，校正死亡率转换成死亡机率值，用最小二乘法或有统计功能的计算

器，分别求出标准品LCso值和待测样品LCso值，然后按式（2）计算待测样品的毒力效价［X2PxlU/mg

(µL)或HaIU/mg(µU]:

••(2)

式中：S一一标准晶LCso值z

P一一标准晶效价；

3

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Y

一

一

样

品

L

C

s

o

值

。

4.

,.5允许差

毒

力

测

定

法

允

许

相

对

偏

差

，

但

每

个

样

品

3

次

重

复

测

定

结

果

最

大

偏

差

不

得

超

过

2

0

%

。

毒

力

测

定

制

剂

各

旅

度

所

引

起

的

死

亡

率

应

在

1

0

%

～

9

0

%

之

间

，

在

5

0

%

死

亡

率

上

下

至

少

要

各

有

两