SB/T 10388-2004 畜禽肉中磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑的测定

ICS67.120

X04

备案号:14169-2004

中华人民共和国国内贸易行业标准

SB/T10388-2004

畜禽肉中磺胺二甲AMHit

磺胺甲A;,哇的测定

Determinationofsulfamethazineandsulfamethoxazole

inmeatoflivestockandpoultry

2004-08-04发布2004-09-01实施

中华人民共和国商务部发布

SB/T10388-2004

月U吕

本标准由中华人民共和国商务部提出。

本标准由商务部屠宰技术鉴定中心负责起草，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、河北省疾

病预防控制中心参加起草

本标准主要起草人:杨祖英、金社胜、刘震、宋书锋、韩会新、张新玲、刘文娟、王贵际。

本标准委托商务部屠宰技术鉴定中心负责解释。

SB/T10388-2004

畜禽肉中磺胺二甲啥咤、

磺胺甲PE4的测定

范围

本标准规定了用高效液相色谱法测定畜禽肉中磺胺二甲呛吮.磺胺甲w哇的残留量。

本标准适用于畜禽肉中磺胺二甲嗜陡.磺胺甲嗯哇的测定。

2原理

样品中磺胺二甲喃吮、磺胺甲唔噢经乙睛+三氯甲烷(lov-}1V)提取后，又经过液一液分配转人水

层进行净化后，用紫外检测器的高效液相色谱仪检测，外标法定量。

3试荆和材料

以下所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯试剂，水为重蒸水。

3.1乙睛(优级纯，作流动相用)。

3.2甲醇(优级纯)。

3.3正己烷。

3.4三氯甲烷。

3.5乙睛+三氯甲烷(lov十1V).

3.6乙睛+三氯甲烷(2V+1V)o

3.7硫酸钠。

3.8硫酸钠溶液:2%水溶液(质量浓度)。

3.90.01mol/L磷酸盐缓冲液:3.58g磷酸氢二钠+1.56g磷酸二氢钠，用水溶解并定容至1000mL

摇匀后，通过。.45lcm微孔滤膜过滤。

3.10冰乙酸。

3.11标准品:纯度)99%.

3.11.1磺胺二甲喃吮

3.11.2磺胺甲唔哇。

3.12标准溶液

3.12.1标准储备液:准确称取磺胺二甲唾陡、磺胺甲蟋哇各10.0mg，分别用乙睛溶解，各移人

100mL容量瓶中，并用乙睛稀释定容，摇匀。此溶液浓度各为100pg/mL,贮于冰箱中，有效期3

个月。

3.12.2混合标准中间液:分别吸取标准储备液各5.0mL于50mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，

摇匀。即得含磺胺二甲嗜陡、磺胺甲嗯哇分别为10.0kg/mI的标准中间液。贮于冰箱中，有效期1

个月。

3.12.3混合标准工作液:分别吸取混合标准中间液0,0.05,0.10,0.25,0.50和1.0m工，分别放人各

自的10mL容量瓶中，各用流动相稀释至刻度，摇匀，即得混合标准工作液，含磺胺二甲嗜咤、磺胺甲唔

哇分别为。，0.05,0.10,0.25,0.50,1.00leg/mL的标准系列溶液。

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4仪器和设备

4.1高效液相色谱仪:附紫外检测器。

4.2旋转蒸发仪。

4.3涡流混匀器

4.4超声波发生器。

4.5旋转蒸发仪。

4.6微孔滤膜过滤器

5测定步骤

5.1试样处理

取200g试样绞碎，称取5.0g精确至。.00g)绞碎后的试样，置于塑料试管中，加人约1g硫酸钠，

乙睛+三氯甲烷(10V+1V)20mL,超声提取15min,2500r/min离心3min，过滤取滤液于蒸发瓶

中，残渣再加乙睛+三氯甲烷(10V+1V)20ml，超声提取15min,2500r/min离心3min，过滤合并

滤液于蒸发瓶中，于<40℃水浴旋转蒸发仪上蒸发至干(如果量大，可分两次蒸)。残渣加人2.0mL

2%硫酸钠水溶液和3.0mL正己烷，在涡流混匀器上剧烈混合。转入离心管中，4000r/min离心

3min,用吸管吸去「层正己烷，并弃去。再用3.0mL正己烷洗水相一次，同法弃去正己烷。向水相

中加人30ml一乙睛+三氯甲烷混合溶剂((2V+1V)，于涡流混匀器上剧烈混匀，用吸管吸去上层液并弃

去。下层有机相转人蒸发瓶中，于40℃水浴中旋转蒸发至干。准确加人1.0mL流动相溶解残渣，于涡

流混匀器上混匀3min通过。.45porn的微孔滤膜过滤。滤液作HPLC分析

5.2测定

5.2.1液相色谱参考条件

a)色谱柱HypersilODS2250mmX4.6mm(内径)，粒径5pm;

b)流动相:甲醇+0.01ml/1磷酸盐缓冲液+冰乙酸=25+75+1.1;

c)检测波长:270nm;

d)流速:1.0ml./min.

5.2.2标准曲线

依照上述色谱条件，分别进标准工作液各个点。每个标准液进20t}L,测定其峰面积，然后以标准

液浓度对峰面积作校准曲线，求出回归方程及相关系数

5.2.3样品的测定

在上述色谱条件下，吸取已净化的样品溶液20以，进行HPLC分析。

6结果

5.1计算

将标准曲线各点的浓度与对应的峰面积进行回归分析，然后按式(n分别计算供试样品中磺胺二甲

啼l!t;.磺胺甲n噢的含量

c只V又1000

(1)

阴X1000

式中:

X-样品中磺胺二甲啼咙(或磺胺甲唔哇)的含量，单位为毫克每千克(mg/kg);

被测液中磺胺二甲嚓Rg-(或磺胺甲a?2k4)的含量，单位为微克每毫升(I}g/ml_);

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V—被测液体积，单位为毫升(MI,);

m一一样品质量，单位为克(g),

6.2检出限

本方法检出限为0.01pg/mL，当取样量为5g时，方法的最低检出量为2pg/kg

7允许差

同一分析者同时或相继两次测定结果之差不得超过均值的巧%。