YY/T 0878.1-2013 医疗器械补体激活试验 第1部分：血清全补体激活

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中华人民共和国医药行业标准

YY/T0878.1-2013

医疗器械补体激活试验

第1部分：血清全补体激活

Testforcomplementactivationofmedicaldevices-

Part1:Serumwholecomplementactivation

2014-10-01实施

2013-10-21发布

国家食品药品监督管理总局发布

YY/T0878.1-2013

目U吕

YY/T0878的总标题是《医疗器械补体激活试验》，包括以下部分：

一一第1部分z血清全补体激活；

一一第2部分z替代途径补体激活z

一一第3部分z经典途径补体激活。

有关其他方面的补体激活试验将有其他部分的标准。

本部分为YY/T0878的第1部分。

本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

YY/T0878的本部分参考ASTMFl984-1999《固体材料血清内全补体激活试验的标准规范》

制定。

本部分与ASTMFl984-1999相比，存在以下差异：

一－对ASTMFl984-1999进行了编辑性修改，删除了部分不适用的资料性内容；

一一增加了前言部分；

一一增加了附录A试剂和缓冲液制备。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本部分由国家食品药品监督管理总局提出。

本部分由全国医疗器械生物学评价标准化技术委员会（SAC/TC248）归口。

本部分主要起草单位：国家食品药品监督管理局济南医疗器械质量监督检验中心。

本部分参加起草单位：上海生物材料研究测试中心；中国医学科学院输血研究所。

本部分主要起草人：乔春霞、王科铺、刘成虎、丁婷婷、孙晓、王红。

I

YY/T0878.1-2013

引

GB/T16886.4中给出了医疗器械／材料血液相容性的试验方法以及试验的选择策略，但只给出了

选择原则。YY/T0878的本部分是体外全补体激活作用的具体试验方法，可作为GB/T16886.4中医

疗器械／材料补体激活试验的补充。

作为血液的重要组分，补体系统激活后产生的效应分子将直接影响医疗器械／材料的血液相容性。

补体不适当的激活可能会导致机体的严重急／慢性反应。YY/T0878的本部分所描述的体外全补体激

活作用的评定方法，可用来筛选医疗器械／材料是否具有潜在补体激活作用。

II

YY/T0878.1-2013

医疗器械补体激活试验

第1部分：血清全补体激活

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范围

3术语

4缩畸语

BBS-GM：巴比妥缓冲液－钙

C’：已激活补体

EDTA：乙二胶四乙酸二铀盐二水合物

HS：人血清

PVDF：聚偏氟乙稀

RBC：红细胞

5绵羊RBC的制备

5.1将市售的绵羊红细胞（SRBC）保存在Alsever溶液中，4℃贮存。贮存超过8周或者目测检查第二

次清洗的上清液当中有血红蛋白时，将细胞废弃。

注：所有离心操作均在4℃条件下进行．除特别说明，所有的试剂、试管和细胞和j剂均在冰上保存，

5.2将5mLSRBC在1OOOg下离心10min。

1

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5.3将细胞沉淀悬浮于IOmL冷BBS-G-EDTA中，37℃孵育10min.离心并使细胞沉淀重新悬浮于

10mL玲BBS-G-EDTA中。

5.4细胞离心后，将上清液废弃（首次清洗〉，并使细胞沉淀重悬于10mL冷BBS-GM中。重复进行两

次（共计3次清洗〉。

5.5通过分光光度计或血液分析仪的测定，用冷的BBS-GM工作液调配得到IOmL浓度为

1.5×108个／mL的BBS-GMSRBC悬液〈如用分光光度计进行调配，约1体积上步制备的细胞悬液加人

24体积BBS-GM工作液，在412nm波长下，光径为1.0cm，吸光度为0.56相当于1.5×108个／mL的

细胞浓度）。

5.6经过清洗、稀释的RBC冰上放置，至少可使用12h。

6血清（补悻）的眼收

6.1宜使用人类补体，因为不同物种补体激活效能存在差异，而且试验材料将被应用于人体。人血清

作为补体源的一种，可从生物制品供应商处购买，并且一般标示为试剂级补体。

6.2为去除人血清中自然产生的抗SRBC溶血抗体，可采用SRBC吸附人血清异嗜抗体的方法，虽然

大多数情况下，如果细胞用溶血素进行最佳致敏，人血清中异嗜抗体的数量不足以影响两者之间的反

应。详细步骤见6.3～6.8.

6.3新鲜人血清或市售的人血清均在一70℃贮存。最好使用新鲜血清，因为冻干剂的补体活性一般

不如新鲜血清。

6.4血清在冰上解冻，或用冷（4℃〉的无内毒素的蒸馆水复溶（若为冻干剂〉。

6.5为避免本步骤中补体被激活，所有操作均在冰上进行，且试剂和细胞均冰冷处理，4℃条件下以

IOOOg进行离心。

6.6按0.1mLRBC/2.5mL血清的比例，将冷血清与冷的、已清洗的压积绵羊RBC混合，冰上孵育10

min后，4℃条件下IOOOg离心10min.小心地将上清液转移到一个新的、