GB/T 22224-2008 食品中膳食纤维的测定 酶重量法和酶重量法-液相色谱法

犐犆犛６７．０５０

犡０４

中华人民共和国国家标准

／—

犌犅犜２２２２４２００８

食品中膳食纤维的测定

酶重量法和酶重量法液相色谱法

国家标准ㅤ可打印ㅤ可复制ㅤ无水印ㅤ高清原版ㅤ去除空白页

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犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犱犻犲狋犪狉犳犻犫犲狉犻狀犳狅狅犱狊

狔

犈狀狕犿犪狋犻犮狉犪狏犻犿犲狋狉犻犮犿犲狋犺狅犱犪狀犱犲狀狕犿犪狋犻犮狉犪狏犻犿犲狋狉犻犮犿犲狋犺狅犱犾犻狌犻犱

狔犵狔犵狇

犮犺狉狅犿犪狋狅狉犪犺

犵狆狔

２００８０５１６发布２００８１００１实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

发布

中国国家标准化管理委员会

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前言

本标准的第一法为“食品中总、可溶性和不溶性膳食纤维的测定酶重量法”，等同采用国际分析化

学家协会方法（年第版）《食品中总、可溶性和不溶性膳食纤维的酶重量法，

ＡＯＡＣ９９１．４３２０００１７

缓冲液》（，—

ＭＥＳＴＲＩＳＴｏｔａｌｓｏｌｕｂｌｅａｎｄｉｎｓｏｌｕｂｌｅｄｉｅｔａｒｆｉｂｅｒｉｎｆｏｏｄｓＥｎｚｍａｔｉｃｒａｖｉｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈ

ｙｙｇ

，），可测定食品中总、可溶性和不溶性膳食纤维，但不含低分子质量的抗性麦芽糊

ｏｄＭＥＳＴＲＩＳｂｕｆｆｅｒ

精、寡果糖、低聚半乳糖、多聚葡萄糖和抗性淀粉等。

本标准的第二法为“含抗性麦芽糊精食品中总膳食纤维的测定酶重量法液相色谱法”，修改采用

了国际分析化学家协会方法（年第版）《含有抗性麦芽糊精食物中的总膳食纤

ＡＯＡＣ２００１．０３２００４１８

维的酶重量法和液相色谱法测定》（

Ｔｏｔａｌｄｉｅｔａｒｆｉｂｅｒｉｎｆｏｏｄｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｔｍａｌｔｏｄｅｘｔｒｉｎｅｎｚ

ｙｇｙ

ｍａｔｉｃｒａｖｉｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈｏｄａｎｄｌｉｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｒａｈｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ），主要修改了酶解用缓冲液，降低

ｇｑｇｐｙ

了酶用量，并简化了用于液相色谱法测定的试样的处理步骤，可测定食品中含低分子质量抗性麦芽糊精

的总膳食纤维。

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Ⅰ

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食品中膳食纤维的测定

酶重量法和酶重量法液相色谱法

１第一法酶重量法

１．１范围

本标准的第一法规定了酶重量法测定食品中总、可溶性和不溶性膳食纤维的条件和详细分析步骤。

本标准的第一法适用于谷类、蔬菜和水果及其制品中总、可溶性和不溶性膳食纤维的测定，但不适

用于含低分子质量的抗性麦芽糊精、寡果糖、低聚半乳糖、多聚葡萄糖和抗性淀粉等食品的膳食纤维的

测定。

１．２规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

／—食品中水分的测定

ＧＢＴ５００９．３２００３

／—食品中灰分的测定

ＧＢＴ５００９．４２００３

／—食品中蛋白质的测定

ＧＢＴ５００９．５２００３

１．３术语和定义国家标准ㅤ可打印ㅤ可复制ㅤ无水印ㅤ高清原版ㅤ去除空白页

下列术语和定义适用于本标准的第一法。

１．３．１

膳食纤维犱犻犲狋犪狉犳犻犫犲狉

狔

具有抗消化特性，即不能被人体小肠消化吸收、而在结肠能部分或全部发酵的碳水化合物及其类似

物的总和。

１．３．２

总膳食纤维；

狋狅狋犪犾犱犻犲狋犪狉犳犻犫犲狉犜犇犉

狔

包括不溶性膳食纤维（，）和高分子质量在乙醇中沉淀的可溶性膳食纤维

ｉｎｓｏｌｕｂｌｅｄｉｅｔａｒｆｉｂｅｒＩＤＦ

ｙ

（，）。

ｓｏｌｕｂｌｅｄｉｅｔａｒｆｉｂｅｒＳＤＦ

ｙ

１．４方法提要

干燥后的试样经热稳定淀粉酶、蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶酶解消化，酶解液通过乙醇沉淀、过

α

滤、乙醇和丙酮洗涤残渣后干燥、称重，得到总膳食纤维（）残渣；酶解液通过直接过滤、热水洗涤残

ＴＤＦ

渣、干燥后称重，得到不溶性膳食纤维（）残渣，滤液用乙醇沉淀，过滤、干燥、称重，得到可溶性膳食

ＩＤＦ

纤维（）残渣。、和的残渣扣除蛋白质、灰分和空白即得、和含量。

ＳＤＦＴＤＦＩＤＦＳＤＦＴＤＦＩＤＦＳＤＦ

１．５试剂和溶液

除非另有说明，在分析中应使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。

１．５．１９５％乙醇。

１．５．１．１８５％乙醇溶液：取８９５ｍＬ９５％乙醇置１Ｌ容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。

１．５．１．２７８％乙醇溶液：取８２１ｍＬ９５％乙醇置１Ｌ容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。

热稳定淀粉酶溶液：，，不能含丙三醇做稳定剂，冰箱

１．５．２ＣＡＳ９０００８５５ＩＵＢ３．２．１．１０℃５℃

α～

储存。

１

／—

犌犅犜２２２２４２００８

酶活力表示：淀粉为底物，以／还原糖表示———单位／单位／

１．５．２．１１犖犲犾狊狅狀犛狅犿狅犻１００００ｍＬ＋１０００ｍＬ

犵狔

（酶活力单位定义为：，时，每分钟释放还原糖所需要的酶量）。

１４０℃Ｈ６．５１ｍｏｌ

ｐμ

酶活力表示：对硝基苯基麦芽糖为底物：单位／单位／

１．５．２．２２３０００ＣｅｒａｌｈａｍＬ＋３００ＣｅｒａｌｈａｍＬ

ｐｐ

（个酶活力单位定义为：，时，每分钟释放对硝基苯基所需要的酶量）。

１４０℃Ｈ６．５１ｍｏｌ

ｐμ

蛋白酶：，，不含丙三醇稳定剂，用缓冲液配成浓度为

１．５．３ＣＡＳ９０１４０１１ＩＵＢ３．４．２１．１４ＭＥＳＴＲＩＳ

／的蛋白酶溶液，现用现配，储存。

５０ｍｍＬ０℃５℃

ｇ～

酶活力表示：酪蛋白测试，单位／单位／，或单位／单位／。

１．５．３．１１３００ｍＬ４００ｍＬ７ｍ１５ｍ

～ｇ～ｇ

注：个酶活力单位定义为：，时，每分钟从可溶性酪蛋白中水解出（并溶于三氯乙酸）酪氨酸所

１４０℃Ｈ８．０１ｍｏｌ

ｐμ

需要的酶量；

或定义为：，时，每分钟从酪蛋白中水解得到一定量的酪氨酸（相当于酪氨酸在显色反应

３７℃Ｈ７．５１．０ｍｏｌ

ｐμ

中所引起的颜色变化，显色用ＦｏｌｉｎＣｉｏｃａｌｔｅａｕ试剂）时所需要的酶量。

酶活力表示方法：偶氮酪蛋白测试，单位／单位／。

１．５．３．２２３００ｍＬ４００ｍＬ

～

注：个内肽酶活力单位定义为：，时，每分钟从可溶性酪蛋白中水解出（并溶于三氯乙酸）酪氨

１４０℃Ｈ８．０１ｍｏｌ

ｐμ

酸所需要的酶量。

淀粉葡萄糖苷酶溶液：不能含丙三醇做稳定剂，，，储存。

１．５．４ＣＡＳ９０３２０８０ＩＵＢ３．２．１．３０℃５℃

～

酶活力表示方法：淀粉／葡萄糖氧化酶过氧化物酶法，单位／单位／。

１．５．４．１１２０００ｍＬ３３００ｍＬ

～

注：个酶活力单位定义为：，时，每分钟释放葡萄糖所需要的酶量。

１４０℃Ｈ４．５１ｍｏｌ

ｐμ

酶活力表示方法：对硝基苯基麦芽糖苷（）法，单位／单位／。

１．５．４．２２ＰＮＰＢＭ１３０ｍＬ２００ｍＬ

β～

注：酶活力单位定义（单位）为：时，有过量的葡萄糖苷酶存在下，每分钟从对硝基苯基麦芽糖苷

１１ＰＮＰ４０℃

ββ

释放对硝基苯基所需要的酶量。

１ｍｏｌ

μ

酸洗硅藻土：，取硅藻土于的盐酸中（，体积

１．５．５ＣＡＳ６８８５５５４９２００６００ｍＬＨＣｌ∶ＨＯ＝１∶４

ｇ２

比），浸泡过夜，过滤，用蒸馏水洗至滤液为中性，置于５２５℃±５℃马福炉中灼烧灰分后备用。

国家标准ㅤ可打印ㅤ可复制ㅤ无水印ㅤ高清原版ㅤ去除空白页

（吗啉代）磺酸基乙烷（）：，纯度。

１．５．６２犖ＭＥＳＣＡＳ４４３２３１９＞９９．５％

三羟甲基氨基甲烷（）：，纯度