GB/T 18932.17-2003 蜂蜜中16种磺胺残留量的测定方法 液相色谱-串联质谱法

GB/T18932.17-2003

月四吕

GB/T18932的本部分修改采用加拿大标准ACC-056-V2.0((蜂蜜中磺胺残留量测定方法—高效

液相色谱一质谱测定法》，修改的主要内容是:

—测定品种有所调整;

—增加了苯磺酸型阳离子交换柱和OasisHLB柱净化步骤;

—使用的液相色谱柱和流动相不同;

—单四极杆质谱检测器换成串联四极杆质谱检测器。

本部分的附录A和附录B为资料性附录。

本部分由中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局提出。

本部分由中华全国供销合作总社归口。

本部分起草单位:中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局。

本部分主要起草人:庞国芳、曹彦忠、张进杰、贾光群、范春林、李学民、刘永明、石玉秋。

本部分系首次发布的国家标准。

GB/T18932.17-2003

蜂蜜中16种磺胺残留量的测定方法

液相色谱一串联质谱法

范围

GB/T18932的本部分规定了蜂蜜中16种磺胺残留量液相色谱一串联质谱测定方法。

本部分适用于蜂蜜中16种磺胺残留量的测定。

本部分的方法检出限:磺胺甲唾=哩为1.0拜9/kg;磺胺醋酞、磺胺喀pj}、磺胺毗pr+f.磺胺二甲异R,

哇、磺胺甲基啼吮、磺胺氯哒嚓、磺胺一6一甲氧啼吮、磺胺邻二甲氧啼吮、磺胺甲基异嗯哇为2.0pg/kg;磺

胺唾哇、磺胺甲氧哒嚼、磺胺间二甲氧哦陡为4.0pg/kg;磺胺甲氧嗜陡、磺胺二甲嗜吮为8.0pg/kg;磺

胺苯毗哇为12.0pg/kgo

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过GB/T18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文

件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成

协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本

部分。

GB/T6379测试方法的精密度通过实验室间实验确定标准测试方法的重复性和再现性

((;B/T6379-1986,neqISO5725:1981)

GB/T6682分析实验室用水规格和试骑方法(GB/T6682-1992,neaISO3696.1987)

3原理

蜂蜜中磺胺类药物残留用磷酸溶液(pH-2)提取，过滤后，经阳离子交换柱和()asisHLB或相当

的固相萃取柱净化，用甲醇洗脱并蒸干，残渣用乙睛+乙酸钱溶液((0.1mot/L)溶解。样品溶液供液相

色谱一串联质谱仪测定，外标法定量。

试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水

4.1甲醇:色谱纯。

4.2乙睛:色谱纯。

4.3磷酸:优级纯。

4.4庚烷磺酸钠(C7H,,SO,Na·HBO):色谱纯。

4.5乙酸钱

4.6磷酸二氢钾:优级纯。

4.7磷酸氢二钾:优级纯。

4.8磷酸溶液:pH-2.1000mL水中加人1mL磷酸(4.3)，在pH计上再滴加磷酸以调节溶

液pH=2,

4.9磷酸盐缓冲溶液:0.2mol/L,pH=8。分别称取1.05g磷酸二氢钾((4.6)和33.46g磷酸氢二钾

(4.7)，用水溶解，定容至1000mLe

4.10庚烷磺酸钠溶液:0.5mol/L。称取11R庚烷磺酸钠((4.4)，用水溶解，定容至100m1

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4.11阳离子交换柱:苯磺酸型,500mg,3mL。用前分别用5mL甲醇和10mL水处理。保持柱体

湿润。

4.12OasisHLB柱或相当者:60mg,3mL。用前分别用3mL甲醇和6mL水处理。保持柱体湿润。

4.13磺胺醋酞、磺胺甲噬二哇、磺胺二甲异嗯哇、磺胺氛哒嚓、磺胺啼陡、磺胺甲基异蟋哇、磺胺唾哇、

磺胺一6一甲氧R}咤.磺胺甲基啥吮、磺胺邻二甲氧晦吮、磺胺毗吮.磺胺对甲氧咯吮.磺胺甲氧哒嗓、磺胺

二甲嗜吮、磺胺苯毗哇、磺胺间二甲氧啥吮标准物质:纯度)9900,

4.1416种磺胺标准储备溶液:0.1mg/mL。准确称取适量的每种磺胺标准物质，用甲醇配成

。.1mg/mL的标准储备溶液，该溶液在4℃保存可使用两个月。

4.巧磺胺混合标准工作溶液:根据每种磺胺的灵敏度和仪器线性范围，用空白样品提取液配成不同浓

度((ng/mL)的混合标准工作溶液，混合标准工作溶液在4℃保存，可使用一周。

5仪器

5.1液相色谱一串联质谱仪:配有电喷雾离子源。

5.2固相萃取真空装置。

5，3旋转蒸发器

5.4液体混匀器。

5.5分析天平:感量0.1mg和0.01g各一台。

5.6真空泵

5.7移液器:1mL,2ml。

5.8鸡心瓶:150mL,

5.9样品瓶:2mL，带聚四氟乙烯旋盖。

5.10玻璃贮液器:50mL,

5.11pH计:测量精度士。.02,

6试样制备与保存

6.1试样的制备

对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60℃的水浴

中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，冷却至室温。分出。.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶

中，密封，并做上标记。

3.2试样的保存

将试样于常温下保存。

7测定步骤

7.1提取

称取5g试样，精确至。.01g。置于150mL三角瓶中，加人25mL磷酸溶液((4.8)，于液体混匀器

上快速混匀1min，使试样完全溶解。

7.2净化

将塞有玻璃棉塞的玻璃贮液器连到苯磺酸型阳离子交换柱((4.11)上，把样液(7.”倒人玻璃贮液器

中，在减压情况下使样液以小于等于3mL/min的流速通过苯磺酸型阳离子交换柱，待样液完全流出

后，分别用5ml.磷酸溶液和5mL水洗柱，弃去全部流出液。最后用40mL磷酸盐缓冲溶液(4.9)洗

脱，收集洗脱液于100m工_平底烧瓶中。在洗脱液中加人1.5ML庚烷磺酸钠溶液(4.10)，然后用磷酸

(4.3)调至pH=6e

按上述方法将调好pH的洗脱液过OasisHLB或相当的固相萃取柱((4.12),调节流速小于等于

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3mL/min，待洗脱液完全流出后，再用3mL水洗柱，弃去全部流出液。在65kPa负压下，减压抽干

5min,最后用10mL甲醇(4.1)洗脱，洗脱液收集于150mL鸡心瓶中用旋转蒸发器于45℃水浴中减

压蒸发至干。准确加人1.0mL流动相溶解残渣，供液相色谱一串联质谱仪测定。

7.3色漪测定

7.3.1液相色谱条件

a)色谱柱:Lichrospher.100RP-185pm250mmX4.6mm(i.d)或相当者;

b)流动相:乙睛+乙酸按溶液(0.01mol/L)(12+88);

c)流速:0.8mL/min;

d)柱温:350C;

e)进样量:40pL;

f)分流比:113,

7.3.2质谱条件

a)离子源:电喷雾离子源;

b)扫描方式:正离子扫描;

C检测方式:多反应检测;

d)电喷雾电压:5500V;

e)雾化气压力:0.076MPa;

f)气帘气压力:0.069MPa;

9)辅助气流速:6L/min;

h)离子源温度:350,c;

i)定性离子对、定量离子对、碰撞气能量和去簇电压，见表1.

表116种磺胺的定性离子对、定f离子对、碰撞气能f和去簇电压

名称定性离子对/(m/a)定量离子对/(m/z)碰撞气能量/V去簇电压/V

215/156

磺肢醋酸215/108215/156;:::

271/156

磺胺甲唾二哇271/107271/156::::

268/156

磺胺二甲异u,哇268/113268/156::::

285门56

磺胺抓哒嗓285/108285/156::::

251/156

磺胺呛吮251/185251/156:一::

254/156

磺胺甲基异U's哇254/147254/156::::

」

256/156

磺胺唆哇256/107256/156::::

281/15625

磺肢6一甲氧啥吮281/215281/15625::

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表1(续)

名称定性离子对/(m/z)定量离子对/(mlz)碰撞气能量/V去簇电压/V

265/156

磺胺甲基@1PIT265/172265/156::::

311/156

磺胺邻二甲氧峡吮311/108311!156::::

250/156

磺胺毗呢250/184250/156::::

281八56

磺胺对甲氧嗯吮281/215281/156::::

281/156

磺胺甲氧哒臻281/215281/156:::一

一

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