GB/T 9826-1988 小麦粉破损淀粉测定法 α-淀粉酶法

中华人民共和国国家标准

小麦粉破损淀粉测定法GB/T9826-88

α-淀粉酶法

Methodfordeterminationofstarchdamage

inflour-Alpha-amylasemethod

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1主题内容与适用范围

本标准规定了用α-淀粉酶测定小麦粉破损淀粉值的原理使用的试剂、仪器、分析的

步骤以及结果计算。

本标准适用于小麦粉破损淀粉值的测定。

2方法原理

小麦粉中破损淀粉对α-淀粉酶的敏感性大大高于未破损淀粉,在常温下能被α-淀粉

酶降解生成糊精和一定量的还原糖。利用此特性,在规定的条件下,用α－淀粉酶降解小

麦粉中破损淀粉,再用铁氰化钾法测定其还原糖量,并根据法兰德的经验公式计算小麦粉

中的破损淀粉值。

3试剂

以下试剂未经标明的均为分析纯试剂,水为蒸馏水。

3.1缓冲溶液

溶解4.1g无水乙酸钠于水中,加入3mL冰乙酸,再用水稀释至1000mL,pH值应为4.7±

0.1。

3.2提取溶液

将20g氯化钠及0.2g乙酸钙溶于水中,再稀释至1000mL。

3.3α-淀粉酶液

称取活性相当于15000±1500A的α-淀粉酶制剂溶于500mL提取液中,再加入500mL

缓冲液,α-淀粉酶活性测定见附录A(补充件)α-淀粉酶活性测定。此溶液用时现配。

3.410％(V/V)硫酸溶液。

3.512％钨酸钠溶液。

3.60.1M碱性铁氰化钾溶液

称取32.9g干燥纯净的铁氰化钾与44.0g无水碳酸钠溶于1000mL水中,贮于棕色瓶避

光

保存。

3.7乙酸盐溶液

70g氯化钾和40g硫酸锌溶于水中,加入200mL冰乙酸,再用水稀释至1000mL。

3.810％碘化钾溶液。

3.91％淀粉溶液。

3.100.1M硫代硫酸钠溶液

称取24.82g硫代硫酸钠(含5个结晶水)和3.8g四硼酸钠溶于1000mL水中,贮于棕色瓶

避

光保存,一星期后按GB5490《粮食、油料和植物油脂检验一般规则》附录B规定方法标

定其浓度。

3.11酸洗石英砂。

4仪器和用具

4.1玻璃试管:φ25×220mm。

4.2量筒:50mL;25mL。

4.3恒温水浴:可控温30±0.1℃。

4.4秒表。

4.5加液器或移液管:2mL;10mL。

4.6移液管:5mL。

4.7玻璃漏斗及中速滤纸。

4.8电炉。

4.9锥形瓶:100mL。

4.10滴定管:10mL。

4.11天平:感量0.01g;0.1mg。

4.12pH计或精密pH试纸:可测pH4.7±0.1。

5分析步骤

5.1称样量

一般小麦粉均假定其水分含量为14.0％,淀粉含量为68％～72％,称样量为1.00±

0.01g。如果淀粉含量过高或过低时,则称样量应按式(1)计算:

70

称样量(g)＝────………(1)

(95-P-M)

式中:P——100g试样中蛋白质的克数(含氮量×5.7);

M——100g试样中水分的克数。

5.2酶解

称取5.1规定量的试样于玻璃试管中,加入1小勺酸洗石英砂,混匀并将式样摇松倾斜于

试管底部,准确量取46mL已预热至30℃的α-淀粉酶液,先将少许α-淀粉酶液加入试样中并

尽量摇匀,立即计时,再加入其余α-淀粉酶液,加盖试管并上下颠倒摇动约30次使试样均匀

悬浮.迅速将试管浸入30℃水浴中,然后每隔10min取出试管,上下颠倒摇动10次使试样重新

均匀悬浮,恒温酶解刚好60min时,取出试管,立即加入2mL10％硫酸溶液,充分混匀后,再加入

2ml12％钨酸钠溶液,摇匀并放置约2min后,用中速滤纸过滤。充去最初几滴,收集滤液于

干净锥形瓶中,此滤液即为试样测定液。

另取一支试管不加小麦粉试样,同时同上操作,所得滤液即为空白对照液。

5.3测定还原糖

准确吸取5ml试样液于试管中,再准确加入10mL0.1M碱性铁氰化钾溶液,混合后将试

管

浸入剧烈沸腾的水中(可将试管置于铁丝笼架放入铝锅煮沸的水中,每次可同时作多个样

品的测定),继续加热待水再沸腾后开始计时,准确反应20min后,取出试管立即置流水冷却。

冷却后将试管中溶液倒入锥形瓶中,并用25mL乙酸盐溶液分三次洗涤试管一并倒入锥形

瓶内,再加入10mL10％碘化钾溶液。然后用0.1M硫代硫酸钠溶液滴定至淡黄色,再加入约

1mL1％淀粉液,继续滴定至溶液蓝色消失(半分钟内溶液不返蓝色),记录用去硫代硫酸钠

溶液的体积为V1(mL)。

吸取空白对照液5mL代替试样液,同上操作,记录用去硫代硫酸钠溶液的体积为

V2(mL)。

6结果计算

6.1氧化5mL样品液(相当于0.1g小麦粉样品)中还原糖所需0.1M铁氰化钾体积V按式

(2)计算:

C

V＝(V2－V1)×──-………………(2)

0.1

式中:V——氧化试样液中还原糖所需的0.1M铁氰化钾液的体积,mL;

V1——滴