GB/T 5750-1985 生活饮用水标准检验法

Daoister书库生活饮用水检验规范GB5750-85修订版卫生部2001.6

35.1

35.1.1范围

本规范规定了生活饮用水及其水源水中细菌总数的测定方法

本规范适用于测定生活饮用水及其水源水中的细菌总数

35.1.2原理

细菌总数是指水样在一定条件下培养后(培养基成分培养温度和时间pH需氧

性质等)所得lmL水样所含菌落的总数按本规范规定所得结果只包括一群能在营养

琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数

35.1.3培养基与试剂

35.1.3.1营养琼脂

35.1.3.1.1成分:

A蛋白胨10g

B牛肉膏3g

C氯化钠5g

D琼脂1020g

E蒸馏水1000mL

35.1.3.1.2制法将上述成分混合后加热溶解调整pH为7.47.6分装于玻璃容

器中(如用国产含杂质较多的琼脂时应先过滤)经121灭菌20min储存于冷暗处

备用

35.1.4仪器

35.1.4.1高压蒸汽灭菌器

35.1.4.2干热灭菌箱

35.1.4.3培养箱361

35.1.4.4电炉

35.1.4.5天平

35.1.4.6冰箱

35.1.4.7放大镜或菌落计数器

35.1.4.8pH计或精密pH试纸

35.1.4.9灭菌试管平皿(直径9cm)刻度吸管采样瓶等

35.1.5检验步骤

35.1.5.1生活饮用水

35.1.5.1.1以无菌操作方法用灭菌吸管吸取lmL充分混匀的水样注入灭菌平皿中倾

注约15mL已融化并冷却到45左右的营养琼脂培养基并立即旋摇平皿使水样与

培养基充分混匀每次检验时应做一平行接种同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培

养基作为空白对照

35.1.5.1.2待冷却凝固后翻转平皿使底面向上置于361培养箱内培养24h进

行菌落计数即为水样lmL中的细菌总数

35.1.5.2水源水

35.1.5.2.1以无菌操作方法吸取lmL充分混匀的水样注入盛有9mL灭菌生理盐水的

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试管中混匀成1:10稀释液

35.1.5.2.2吸取1:10的稀释液lmL注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管中混匀成1:100

稀释液按同法依次稀释成1:10001:10000稀释液等备用如此递增稀释一次必

须更换一支1mL灭菌吸管

35.1.5.2.3用灭菌吸管取23个适宜稀释度的水样lmL分别注人灭菌平皿内以下

操作同生活饮用水的检验步骤

35.1.6菌落计数及报告方法

作平皿菌落计数时可用眼睛直接观察必要时用放大镜检查以防遗漏在记下

各平皿的菌落数后应求出同稀释度的平均菌落数供下一步计算时应用在求同稀

释度的平均数时若其中一个平皿有较大片状菌落生长时则不宜采用而应以无片

状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数若片状菌落不到平皿的一半而其余

一半中菌落数分布又很均匀则可将此半皿计数后乘2以代表全皿菌落数然后再求

该稀释度的平均菌落数

35.1.7不同稀释度的选择及报告方法

35.1.7.1首先选择平均菌落数在30300之间者进行计算若只有一个稀释度的平均菌

落数符合此范围时则将该菌落数乘以稀释倍数报告之(见实例1)

35.1.7.2若有两个稀释度其生长的菌落数均在30300之间则视二者之比值来决定

若其比值小于2应报告两者的平均数(如实例2)若大于2则报告其中稀释度较小的

菌落总数(如实例3)若等于2亦报告其中稀释度较小的菌落数(见实例4)

35.1.7.3若所有稀释度的平均菌落数均大于300则应按稀释度最高的平均菌落数乘以

稀释倍数报告之(见实例5)

35.1.7.4若所有稀释度的平均菌落数均小于30则应以按稀释度最低的平均菌落数乘以

稀释倍数报告之(见实例6)

35.1.7.5若所有稀释度的平均茵落数均不在30300之间则应以最接近30或300的平

均菌落数乘以稀释倍数报告之(见实例7)

35.1.7.6若所有稀释度的均无菌落生长则以1乘以稀释倍数报告之

35.1.7.7菌落计数的报告:菌落数在100以内时按实有数报告大于100时采用二位有

效数字在二位有效数字后面的数值以四舍五入方法计算为了缩短数字后面的零

数也可用10的指数来表示(见表35-1报告方式栏)

表35-1稀释度选择及菌落总数报告方式

不同稀释度的平均菌落数两个稀释度菌落总数报告方式

实例123

101010菌落数之比(CFU/mL)(CFU/mL)

4

11365164201640016000或1.610

4

22760295461.63775038000或3.810

4

32890271602.22710027000或2.710

3

4150308215001500或1.510

5

5多不可计1650513513000510000或5.110

2

627115270270或2.710

4

7多不可计305123050031000或3.110

8000<ll0<ll0

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36.1

36.1.1范围

本规范规定了生活饮用水中及其水源水中总大肠菌群的多管发酵测定方法

本规范适用于生活饮用水及其水源水中总大肠菌群的测定

36.1.2原理

总大肠菌群系指一群在37培养24h能发酵乳糖产酸产气需氧和兼性厌氧的

革兰氏阴性无芽胞杆菌该菌群主要来源于人畜粪便具有指示菌的一般特征故以

此作为粪便污染指标评价饮水的卫生质量

水中总大肠菌群数系以100mL水样中污染的总大肠菌群最可能数(MPN)表示

36.1.3培养基与试剂

36.1.3.1乳糖蛋白胨培养液

36.1.3.1.1成份

A蛋白胨10g

B牛肉膏3g

C乳糖5g

D氯化钠5g

E溴甲酚紫乙醇溶液(16g/L)1mL

F蒸馏水1000mL

36.1.3.1.2制法

将蛋白胨牛肉膏乳糖及氯化钠溶于蒸馏水中调整pH为7.27.4再加入1mL

溴甲酚紫乙醇溶液(16gL)充分混匀分装于装有倒管的试管中115高压灭菌

20min储存于冷暗处备用

36.1.3.2二倍浓缩乳糖蛋白胨培养液

按上述乳糖蛋白胨培养液(36.1.3.1)除蒸馏水外其它成份量加倍

36.1.3.3伊红美蓝培养基

36.1.3.3.1成份

A蛋白胨10g

B乳糖10g

C磷酸氢二钾