NY/T 560-2002 小鹅瘟诊断技术

11.220

BIC4S1

中华人民共和国农业行业标准

NY/T560--2002

小鹅瘟诊断技术

Diagnostictechniquesforgoslingplague

2002一08一27发布2002门2一01实施

中华人民共和国农业部发布

NY/'r560-2002

01J吕

小鹅瘟又称鹅细小病毒(gooseparvovlrus)病，或又称德兹西氏病(Dcrzsy's病)，是雏鹅的一种急

性败血性传染病。我国和世界上所有养鹅的国家均有此病的流行发生.本病主要侵害三周龄以内雏鹅，

多呈最急性和急性病病程而迅速致死。三周龄以上的雏鹅仅部分发病，并呈亚急性病程。本病一旦发生

流行常引起大批雏鹅死亡，造成重大经济损失

本病的病原称为小鹅瘟病毒，根据其病毒分类地位，又称鹅细小病毒。应用中和试验、琼脂扩散试验

等力法证明个国各地分离的毒株具有相同的抗原关系，即仅有一个抗原型。与匈牙利的Derzsy's病毒

株和番鸭细小病毒有密切抗原关系，而与哺乳动物和其他禽类的细小病毒没有抗原关系。据国内外有关

报道，本病病毒分离常用鹅胚和番鸭胚。鹅胚和番鸭胚原代细胞感染病毒后，用伊红一苏木素染色，可见

有CowdreyA刑核类包涵体和合胞体的形成用电镜或特异的鹅细小病毒抗血清中和试验能确定感染

细胞内病毒的存在

本标准的附录A、附录B均为规范性附录。

本标准由农业部畜牧兽医局提出。

本标准山全国动物检疫标准化技术委员会归口。

本标准起草单位:扬州大学畜牧兽医学院。

本标准主要起草人:王永坤、严维巍、朱国强、周继宏、庄国宏。

NY/'r560--2002

小鹅瘟诊断技术

范围

本标准规定了小鹅瘟诊断技术要求。

本标准所规定的病毒分离方法适用于小鹅瘟病毒分离;琼脂扩散试验、中和试验和酶联免疫吸附

(EIASA)试验等血清学诊断方法适用于病毒分离株的鉴定、鹅群检疫、流行病学调查和免疫鹅群抗体水

平的检测

2病毒分离鉴定

2.1材料准备

2门门以无菌手术取患病雏鹅或死亡雏鹅的肝、胰、脾、肾、脑等内脏器官病料放置灭菌的玻瓶冻结保

存，作为病毒分离材料。

2.1.2先将病料组织剪碎、磨细，用灭菌生理盐水，或灭菌pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)作(I，5)一

(1:10)稀释，经3000r/min离心30min，取上清液加人抗生素，使每毫升组织液含有2000IU青霉素

和2000pg链霉素，于37C温箱作用30min，作为病毒分离材料

2.1.3将F述离心的上清液按4:1加人分析纯三氯甲烷充分混匀后放置37'C'温箱作用60min，或

4C'冰箱过液，经3000r/min离心30min，取上清液加人抗生素，使之每毫升含有2000IU青霉素和

2000pg链霉素，于37'C温箱作用30min，作为病毒分离材料。

2.2病毒分离

2.2.1鹅胚接种

将L述病毒分离材料接种5枚12日龄无小鹅瘟抗体的鹅胚，每胚尿囊腔接种。.2ml，置37C一

38'C孵化箱内继续孵化，每夭照胚2-4次，观察9d，一般经5d^-7d大部分胚胎死亡。72h以前死亡

的胚胎废弃，72h以后死亡的鹅胚取出放置4C-8C冰箱内过夜冷却收缩血管。用无菌手续吸取尿囊