GB/T 18782-2002 调味品中3-氯-1,2-丙二醇的测定

ICS67-220-10

x66茵冒

中华人民共和国国家标准

GB/T18782一2002

调味品中3-氯-1,2一丙二醇的测定

Determinationof3-chloro-1，2-propandiolincondiments

2002一07一21发布2003一02一01实施

中华人民共和国

国家质量监督检验检疫总局发布

Gs/T18782-2002

前言

本标准的气相色谱/质谱检测法(GC/MS)为仲裁法

本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出并归口。

本标准的起草单位:

气相色谱/质谱检测法(GC/MS)由上海出人境检验检疫局起草，广州出人境检验检疫局、佛山市海

天调味食品有限公司、联合利华食品(中国)有限公司、李锦记食品有限公司参加P--V气相色谱一电子俘

获检测法(GC-ECD)由广州出人境检验检疫局起草，佛山市海天调味食品有限公。d.国家副食品质量监

督检验中心、石家庄珍极酿造集团、上海出人境检验检疫局参加起草;气相色谱一火焰离子化检测法

(GC-FID)由国家食品质量监督检验中心起草，佛山市海天调味食品有限公司、联合利华食品(中国〕有

限公司、上海出人境检验检疫局参加起草。

本标准主要起草人:朱坚、盛永刚仁气相色谱/质谱检测法(GC/MS)];王志元、陈捷、张思群仁气相色

谱一电子俘获检测法(GC-ECD)];尹建军、蔡心尧气「相色谱一火焰离子化检测法(GC-FID)].

GB/'r18782-2(12

调味品中3-氯-1,2一丙二醇的测定

，范围

本标准规定了用气相色谱/质谱检测法、气相色谱一电子俘获检测法和气相色谱一火焰离子化检测法

测定调味品中3-抓-1,2一丙二醇的条件和详细分析步骤。

本标准适用于酱油、酱油粉、酸水解植物蛋白调味液(粉)和其他调味液(粉)中3-氯-1,2一丙二醇含

量的测定。

样品中3-氯-1,2一丙二醇的检出限:气相色谱/质谱检测法和气相色谱一电子俘获检测法为

。.01mg/kg;气相色谱一火焰离子化检测法为。.2mg/kg.

气相色谱/质谱检测法

2.1方法提要

样品中的3-氯-1,2一丙二醇经层析柱分离、净化，与七氟丁酞咪哇衍生成1,2一二(七氟丁酞氧基)-3-

氯丙烷。衍生物用气相色谱一质谱联用仪定性，外标法定量。

2.2反应式

CH-,-ClCH,-C1O

{{1{

CH一()H+2一CHI-C-C,F,

I

}

CH,--0-C--C,F

CH,-OHO凳-C,F,lH

O

2.3试荆和溶液

除非另有规定，仅使用分析纯试剂、蒸馏水或去离子水。

2.3.1正己烷:重蒸馏。

2.3.2无水乙醚:重蒸馏。

2.3.3乙酸乙醋:重蒸馏。

2.3.4淋洗溶液:9体积正己烷加1体积无水乙醚。

2.3.5七氟丁酞咪哩(N-(Heptafluoro-n-butyryl)imidazole;缩写HFBID:分子式C,H,F,N20,

236提取填充料:ExtrelutgNT(含游离晶体硅酸);或与Extrelut.NT相当的提取填充料。

2.3.7无水硫酸钠:650℃灼烧4h，冷却后贮于密闭容器中。

2.3.83-A-1,2一丙二醇标准品:纯度不低于99。

2.3.9标准贮备溶液:称取约0.1g(精确至。.1mg)3-$(-1,2一丙二醇(2.3.8)，用乙酸乙醋溶解并定容

至100mL。此标准贮备溶液的浓度约1mg/ml。

2.3-10标准系列溶液:用正己烷(2.3.1)将标准贮备溶液(2.3.9)稀释至约。.00fag/mI,,

0.01pg/mL,0.05pg/mL,0.1pg/mL,0.5pg/mL,1.0pg/mL和2.0pg/mL,

2.4仪器和设备

实验室常规仪器、设备及下列各项。

2.4.1离心机:转速不低于4000r/min,

2.4.2旋转蒸发器或吹氮浓缩器。

2.4.3玻璃层析柱:长200mm，内径25mm;带活塞。

2.4.4涡旋混合器。

cB/T18782-2002

2.4.5气相色谱/质谱联用仪。

2.4.6色谱柱:石英毛细管柱，HP-5柱长60m，内径。32mm,涂膜厚度。.25Km;固定液:5%一二苯

基和95%一二甲基硅氧烷共聚物);或与HP-5相当的色谱柱

2.4.7刻度离心试管:lom工，具塞。

2.5分析步骤

2.5.1装柱

液体试样(酱油，酸水解植物蛋白调味液，其他调味液)

称取5g试液(精确至0.001g)于100ml烧杯中。加5g提取填充料((2.3.6),搅拌均匀。装人已

依次充填lcm(高)的无水硫酸钠((2.3.7)和5g提取填充料((2.3.6)的玻璃层析柱((2.4.3)中。压实后再

充填lcm(高)的无水硫酸钠((2.3.7),

2.5门2固体、半固体试样(酱油粉，酸水解植物蛋白调味粉，其他调味粉，调味酱)

称取5g试样(精确至0.001g)于100mL烧杯中加人5.0mL水，搅拌成浆状。以下按

中的步骤操作(加59提取填充料……)。

2.5.2提取

用80mL淋洗溶液(2.3.4)淋洗玻璃层析柱中的物料(或),淋洗速度约

3ml./min。弃去淋洗液，再用150ml一无水乙醚洗脱，洗脱速度约3mL/min。收集洗脱液于250mL圆

底烧瓶中，在40℃下用旋转蒸发器或吹氮浓缩器浓缩至近干(不得干透)。用正己烷((2.3.1)将浓缩物移

人10ml.刻度离心试管，用正己烷((2.3.1)定容至5ML.

2.5.3衍生

试样的衍生

在上述盛有正己烷溶液((2.5.2)的刻度离心试管中加人50川七氟丁酞咪哩(2.3.5)，塞紧试管塞，

用涡旋混合器充分涡旋混合1min。在70℃恒温30min，冷却至室温。加水3mL，塞紧试管塞，涡旋混

合1min，离心3min。用尖嘴吸管将水层吸出后，重复“加水3mL,涡旋混合、离心、吸去水层”的操作。

将溶液在40℃下充人小股氮气流，浓缩至1.0mL，移人2mL样品瓶中，加入约300mg无水硫酸钠

(2.3-7)，加塞，充分振摇1min，静置后供气相色谱/质谱分析。

2.5.32标准系列溶液的衍生

分别取5mL标准系列溶液(2.3.10)于7只10ml刻度离心试管((2.4.7)中。以下按2.5-3.1中的

步骤操作(加人50kL七氟丁酞咪哩),

2.5.4测定

2.5.4门气相色谱/质谱条件

色谱柱温度:60'C,1min5}兰-120C,3min里ci二250C0,2min;

进样口温度250C;

接口温度:280'C;

载气:氦气，纯度不低于99.999%，流速1.0mL/min;

进样方式:无分流进样;

进样体积:1FL;

电离模式:电子电离(ED;

电离电压:70eV;

选择离子:质荷比(m/z)253,289,453;

电子倍增器电压:自动调谐值加200V;

溶剂延迟时间:11min,

4.2定量

GB/'r18782-2002

用进样器分别吸取1叮衍生后的标准系列溶液，注人气相色谱仪，在上述质谱条件(()下测

定标准系列溶液的响应峰面积。以响应峰面积为纵坐标，标准系列溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线

或计算回归方程。

吸取1yL衍生后的试样注人气相色谱仪，在上述质谱条件(()下测定试样的响应峰面积(应

在仪器检测的线性范围内)。依据测定的响应峰面积，在标准曲线上查出(或用回归方程计算出)样品中

3-氯-1,2一丙二醇的含量。

在上述色谱条件(()下，3-氯-1,2一丙二醇的保留时间约13min,

标准系列溶液衍生物的质谱图见图1和图2

响应值

0002

oo01

时间/min

图13-撅-1,2丙二醉标准品的总离子流图

响应值

1000

S00

质/荷比

图23-抓-1,2丙二醉标准品的质谱图

25.5空白试验

用5mL水代替试样，按2.5.1-2.5.4的步骤做空白试验。

2.6结果计算

样品中3-A-1,2一丙二醇的含量(X)以mg/kg表示，按式1()计算:

(C,一C,)XV……(1)

X,

刀2

式中:

C—试样中3-氯-1,2一丙二醇的含量，单位为微克每毫升伽g/mL);

C—空白试验3-氯-1,2一丙二醇的含量，单位为微克每毫升年g/mL);

V—试样最终定容的体积数，单位为毫升(mL);

，—最终试样的质量的数值，单位为克(9)。

计算结果应表示到小数点后2位。

GB/T18782-2002

2.了允许差

同一样品，两次平行测定结果之差，不得超过平均值的lo%,

3气相色谱一电子俘获检测法

3.1方法提要

样品中的3-氯一1,2一丙二醇经层析柱分离、净化，与七氟丁酞咪哇衍生成1,2一二(七氟丁酞氧基)-3-

氯丙烷。衍生物用气相色谱仪的电子俘获检测器测定，外标法定量。

3.2反应式

同本标准2.2,

3.3试剂和溶液

同本标准2.3.

3.4仪器和设备

实验室常规仪器、设备及以下各项。

3.4.1气相色谱仪:带电子俘获检测器。

3.4.2吹氮浓缩器或旋转蒸发器。

3-4.3混匀器。

3.4.4离心机:转速不低于4000r/min,

3.4.5玻璃层析柱:内径25mm，长200mm，带活塞。

3.4.6色谱柱:石英毛细管柱，HP-PAS-5柱长30m，内径。.32mm，涂膜厚度。.25A[m;固定液:5Y,-

二苯基和95%一二甲基硅氧烷共聚物);或与HP-PAS-5相当的色谱柱。

3.5分析步骤

35.1装柱

同本标准2.5.1,

35.2提取

同本标准2.5.2。

3衍生

同本标准2.5.3.

4测定

;.:

4.1色谱条件

色谱柱温度:50-C,3min二c}100`C,1min兰生竺-280-C，3min;

进样口温度:260C;

检测器温度:300'C;

进样方式:不分流进样;

进样体积:1KL;

载气:氮气，纯度不低于99-99%，流速3.0ml-/mm;

尾吹气流速:50ml-/min,

3.5-4.2定量

用进样器分别量取1yL衍生后的标准系列溶液，注人气相色谱仪，在上述色谱条件(()下测

定标准系列溶液的响应峰面积。以响应峰面积为纵坐标，标准系列溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线

或计算回归方程。

用进样器量取1IL衍生后的试样，注人气相色谱仪，在上述色谱条件(()下测定试样的响应

峰面积(应在仪器检测的线性范围内)。依据测定的响应峰面积，在标准曲线上查出(或用回归方程计算

GB/T18782-2002

出)样品中3-氯-1,2一丙二醇的含量。

在上述色谱条件(()下，3-氯-1,2一丙二醇的保留时间约为11.9min

标准系列溶液衍生物的气相色谱图见图30

响应值

删

溯

撇

硼

800

600

400

002

二「，.一

468101214

时间/mni

图33-K-1,2一丙二醇标准品与七氟丁酞咪哇衍生后的气相色谱图

I55空白试验

同本标准2.5.5.

36结果计算

同本标准2.6e

17允许差

同本标准2.7

4气相色谱一火焰离子化检测法

4门方法提要

样品中的3-氯-1,2一丙二醇经层析柱分离、净化，与苯基硼酸衍生成3-氯-1,2一丙二醇苯基硼酸醋

(4-氯甲基-2-苯基-2-硼杂一l,3一二氧杂环戊烷)。衍生物用气相色谱仪的火焰离子化检测器测定，内标法

定量。酸水解植物蛋白调味液(粉)不经层析柱处理，可直接衍生。

4.2反应式

CH-4一HOCH，-叫)、、_

(卜/一\

H----OH十\/一\、}B一\/

CHz-OHHO/B气广一CH-)/一+2H20

CH,--C,

4.3试剂和溶液

除非另有规定，仅使用分析纯试剂、蒸馏水或去离子水。

4.3门正己烷:重蒸馏。

4.3.2尤水乙醚:重蒸馏。

4.3.3丙酮

4.3.4提取填允料:同本标准2.3.6

4，3.5无水硫酸钠:同本标准2.3.7.

Gs/T18782--2002

4.3.6苯基硼酸:纯度不低于9700

4.3.7苯基硼酸溶液(250mg/ml):称取6.25g苯基硼酸(4.3.6)，加人1.25mL水，用丙酮(4.3.3)

溶解并定容至25mLe

4.3-8氯化钠溶液(120g/I):称取12.0g氯化钠，用水溶解，定容至100ml-

4.3.9氯化钠溶液(30g/I):称取3.0g氯化钠，用水溶解，定容至100ml。

4.3.103-X-1,2一丙二醇标准品:纯度不低于99yoo

4.3.11标准储备溶液((1g/L):准确称取。1g(精确至。.0001g)3-氯-1,2一丙二醇(4.3.10)于

100mL容量瓶中，用氯化钠溶液((4.3.8)溶解，并定容。

4.3.121,2一丙二醇:纯度不低于980oa

4.3.13内标溶液(100):准确吸取。.50mL1,2一丙二醇(4.3.12)于50mL容量瓶中，用水溶解，并

定容

4.4仪器和设备

实验室常规仪器、设备及下列各项

4.4.1层析柱内径15mm，长400mm，带砂芯板和活塞

4.4.2K.D浓缩器。

4.4.3色谱柱:石英交联毛细管柱，HP-1(固定液:100%一二甲基聚硅氧烷)，柱长25m，内径0.2mm,

涂膜厚度。.33[m;或与HP-1相当的色谱柱。

4.4.4气相色谱仪:配有火焰离子化检测器。

4.4.5超声波浴。

4.5分析步骤

4.5.1衍生和提取

礴.5门门酸水解植物蛋白调味液

称取log试液(精确至0.001g)于25mL具塞比色管中。加人0.10mL内标溶液(4.3.13)和1ml-

苯基硼酸溶液((4.3.7),塞紧比色管塞，摇匀，90℃保温20min，冷却至室温。加人2mL正己烷(4.3.1),

振摇1min。静止分层后，将上层清液移人1m工、具塞样品瓶中，供测定。

4.5.12酸水解植物蛋白调味粉

称取3g试样(精确至0.001g)于25mL具塞比色管中，加10mL水，用超声波浴溶解15min。以

下按的步骤操作(加人。.10MI一内标溶液……)。

酱油

称取]log试液(精确至。.001g)于10mL烧杯中。移人底部盛有1g无水硫酸钠，上层装有7g提

取填充料((4.3.4)的层析柱中打开层析柱下部活塞，使试液浸人层析柱中，放置40min，关闭层析柱下

部活塞。用150ml无水乙醚淋洗，淋洗速度约3mL/mino淋洗液收集在250m工具塞三角瓶中。用K.

)1浓缩器将淋洗液浓缩至近干，用氯化钠溶液((4-3-8)冲洗装有浓缩液的梨形瓶3次，每次1MI。洗出

液转移至10m工具塞比色管中。以下步骤按操作(加人。.10m工一内标溶液……)，但正己烷仅

用1mLo

4.5门.Q酱油粉

称取3g试样精〔确至。.001g)于10mL烧杯中。加10mL水，用超声波浴溶解15min。以下步骤

按操作(移人底部盛有1g无水硫酸钠……)。

4.5.2测定

4.5.2门色谱条件

色谱柱温度120C,1mi。一迎骂180C望竺兰二280'C,15m土n

进样口温度:250C;

cs/T18782-2002

检测器温度:300C;

氢气流速30ml-/min;

空气流速:400ml./min;

尾吹气流速30mL/min;

进样方式:分流进样，分流比20;1;

载气:氮气，纯度不低于99.99%,流速。.46mL/min;柱头压力100kPao

注:空气、氢气、尾吹气的流速可依据仪器说明书适当调整。

相对质量校正因子的测定

分别按^称取试液或试样、溶解(不进行衍生和提取)、添加适量的标准储备溶液

(4.3.11)，按衍生、提取，按测定。扣除按4.5测定的样品本底，按式((2)计

算3-氯一1,2-丙二醇的相对质量的校正因子几

A,

t=二.二入赢··……(2)

A,一八

式中:

A内.—添加标准贮备溶液后，内标物质衍生物的峰面积;

A—添加标准贮备溶液后，3-氯-1,2一丙二醇衍生物的峰面积;

A—样品本底中内标物质衍生物的峰面积折算成等同于A内1时，相应的3-氯-1,2一丙二醇衍生

物的峰面积;

C—添加标准储备溶液的质量的数值，单位为微克(Pg);

内标物质的质量的数值，单位为微克(pg)e

51.20.336定量

吸取2讨经,,或4.乐1.4提取的衍生物试液，注人气相色谱仪，在上述

色谱条件()下测定试样根据标样保留时间，确定3-氯-1,2一丙二醇和1,2一丙二醇(内标物质)衍

生物响应峰的位置;并记录3-氯一1,2一丙二醇衍生物和1,2一丙二醇衍生物响应峰的面积，计算样品中3-

氯-1,2-丙二醇的含量。

在L述色谱条件(()下，酸水解植物蛋白调味液和酱油样品的色谱图见图4和图So

A-ANsofft-

48

46

44

42

40

时间/min

图4酸水解植物蛋白调味液样品的色谱图

GB/T18782-2002

响应值

25

05

48

46

44

42

40

朋

63

肘

23

03

时间/mm

图5酱油样品的色谱图

图4、图5中组分峰1:1,2一丙二醇衍生物;组分峰2:3-氯-1,2一丙二醇衍生物。

4.6结果计算

样品中3-氯1,2-丙二醇的含量(X,)以mg/kg表示，按式((3)计算:

XA,Xfx_1m03,6·...·····.·。·…(3)

A,

式中:

了-3-氯-1,2一丙二醇的相对质量校正因子;

AO,—样品中1,2一丙二醇(内标物质)衍生物响应峰的面积;

月-一样品中3-氯-1,2一丙二醇衍生物响应峰的面积;

1036一内标物的质量的数值，单位为微克钵g);

m,--一样品的质量的数值，单位为克(g).

计算结果应表示到小数点后2位。

4.了允许差

同本标准2.70

5测定结果的保证与控制

每一测定批次，应使用已知量的样品做测定结果的控制试验

GB/T18782-2002

参考文献

气相色谱/质谱检测法

[1]ColinG.Hamlet.1998.Analyticalmethodsforthedeterminationof3-chloro-l,2-propanedioland2-chlom-

1,3-propanediolinhydrolysedvegetableprotein,seasoningsandfoodproductsusinggaschromatography/ion

traptandemmassspectrometry.FoodAdditivesandContaminants,15(4):451-465.

[2]LarryE.RodmanandR.DudleyRoss.1986.Gas-liquidchromatographyof3-chl