DB34/T 3127-2018 瓜蒌根结线虫病的病原检测和防治技术规程

ICS

65.020

B16

DB34

安徽省地方标准

DB34/T3127—2018

瓜蒌根结线虫病的病原检测和防治

技术规程

TechnicalregulationforpathogendetectionanddiseasecontrolofRoot-knot

nematodediseaseonTrichosantheskirilowii

文稿版次选择

2018-04-16发布2018-05-16实施

安徽省质量技术监督局发布

DB34/T3127—2018

前

言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由潜山县植物检疫保护站提出。

本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：潜山县植物检疫保护站、安徽农业大学植物保护学院。

本标准主要起草人：吴彩玲、吴慧平、徐劲峰、鞠玉亮、黄为民、吴彩萍、李武伦、朱松涛、吴智。

I

DB34/T3127—2018

瓜蒌根结线虫病的病原检测和防治技术规程

1范围

本标准规定了瓜蒌根结线虫病的症状识别、病原物鉴定、防治原则和防治措施等方面的内容。

本标准适用于安徽省瓜蒌根结线虫病的病原检测和防治技术。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则

NY/T496肥料合理使用准则通则

NY/T1276农药安全使用规范总则

DB34/T882食用栝楼栽培技术规程

3症状识别

3.1在瓜蒌田间查找生长缓慢、矮化、黄化的瓜蒌植株，拔起植株观察根系，如根系上出现根结、须

根团，可初步判断为根结线虫病危害，区别于缺水缺肥症状。撕开根结处表皮，如发现针尖大小白色小

点，即为根结线虫雌虫，区别于根肿病、根癌病。

3.2根部症状可参照附录A进行判断。

4病原物鉴定

4.1形态学鉴定

根结线虫的形态学鉴定基于二龄幼虫和雌虫的形态及其测计值，具体流程如下：

——用挑针剥离瓜蒌根结上的卵块，25℃处理24h孵化二龄幼虫，此外，用挑针剥离根结处雌虫。

——在显微镜下观察二龄幼虫和雌虫形态，并对其主要形态进行测计，测计值需遵循DeMan公式。

根结线虫二龄幼虫和雌虫的形态描述参照附录B，测计值参照附录C，根据形态及其测计值即可判断

是否为根结线虫。

4.2分子生物学鉴定

根结线虫分子生物学鉴定基于单条二龄幼虫或雌虫，具体流程如下：

——用挑针剥离瓜蒌根结上的卵块，25℃处理24h孵化二龄幼虫，或用挑针剥离根结处雌虫。

2+

——将单条二龄幼虫置于含8μLddH2O和1μL10×ExTaqBuffer（Mgfree）的200μLPCR

管中；液氮中处理1min，95℃处理2min，重复三次；向PCR管中加入1μL1mg/mL蛋

白酶K，65℃温育1h后，95℃处理10min。

所得单条线虫DNA用于下游的PCR检测试验。

1

DB34/T3127—2018

以单条根结线虫DNA为模板，用南方根结线虫特异性SCAR标记检测引物（Mi-F：

GTGAGGATTCAGCTCCCCAG，Mi-R：ACGAGGAACATACTTCTCCGTCC）进行PCR检

测。

PCR扩增程序：94℃4min；94℃30s，58℃30s；72℃1min，35个循环；72℃10min。

PCR产物经1.5％琼脂糖凝胶电泳检测，