WS/T 204-2001 用稳定性染色体畸变估算职业受照者剂量的方法
WS/T 204-2001 Method of dose estimated using stable chromosome aberration for occupational irradiated subjects
基本信息
发布历史
-
2001年07月
研制信息
- 起草单位:
- 中国医学科学院放射医学研究所
- 起草人:
- 王知权
- 出版信息:
- 页数:7页 | 字数:13 千字 | 开本: 大16开
内容描述
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中华人民共和国卫生行业标准
WS/T204-2001
用稳定性染色体畸变估算
职业受照者剂量的方法
Methodofdoseestimatedusingstablechromosome
aberrationforoccupationalirradiatedsubjects
2001-07-20发布2002-0个01实施
中华人民共和国卫生部发布
WS/T204-2001
前
本标准是应全国卫生标准技术委员会放射性疾病诊断标准分委会委托,借鉴国内外有关实验资料,
特别是近年来发展起来的荧光原位杂交技术实践,结合我国实际情况编写的,为解决职业受照人员剂量
估算的方法。
本标准自2002年1月1日起实施。
本标准由卫生部卫生法制与监督司提出。
本标准附录A、附录B和附录C是提示的附录。
本标准起草单位:中国医学科学院放射医学研究所。
本标准起草人:王知权。
本标准由卫生部委托中国医学科学院就射医学研究所负责解释。
中华人民共和国卫生行业标准
用稳定性染色体畸变估算
WS/T204-2001
职业受照者剂量的方法
Methodofdoseestimatedusingstablechromosome
aberrationforoccupationalirradiatedsubjects
1范围
本标准规定了稳定性染色体畸变分析估算职业受照者剂量的方法。
本标准限于用G-显带法或用染色体核型。
本标准适用于慢性职业受照人群的剂量估算,也适用于早先事故受照者的剂量估算,但不适用于近
期事故性受照者生物剂量估算。
2定义
本标准采用下列定义
2.1职业照射occupationalexposure
除了国家法规,标准所排除的照射以及按规定己予以豁免的实践或摞产生的照射以外,工作人员在
其工作过程中所受的照射。
2.2G-显带G-bandsbytrypsinusingGiemsa,GTG-显带
用蛋白水解酶(膜蛋白酶)将染色体消化后,得到深浅颜色不同和宽窄度不等的特有带型。
2.3生物剂量计biologicaldosimeter
用以估算受照剂量的生物体系,这一生物体系受到照射后的反应与受照剂量之间存在着某种定量
关系,从而可用来推定受照的剂量。
2.4剂量-效应关系曲线dose-responsecurve
当机体受照后引起的反应与受照剂量存在某种定量关系,用适当的数学模式表达,以作出相应的刻
度曲线。
3剂量-效应曲线的建立
3.1对供血者要求
3.1.1男女均可,可各选一人或只选一人5
3.1.2年龄18~50岁;
3.1.3元肿瘤病史;
3.1.4元慢性病史;
3.1.5元接触有毒有害物质史p
3.1.6未接受过大剂量的放射诠断、治疗史;
3.1.7无烟酒嗜好。
1)将带有标本的载片放60℃烤箱4h;用膜酶或膜酶-EDTA消化;Giemsa染色。
中华人民共和国卫生部2001-07-20批准
2002-0个01实施
WS/T204-2001
3.2照射条件
3.2.1物理剂量准确;
3.2.2样品受照均匀;
3.2.3温度控制在37℃土o.5℃;
3.2.4剂量范围o.1~5.0Gy;
3.2.5剂量点7个左右,低于o.5Gy剂量点应选2~3个s
3.2.6照后即置于37℃恒温箱内,静置90~120min后接种培养。
3.3培养方法
微量全血培养法:用0.5mL全血,在无菌条件下接种入pH为6.8~7.2的含有适量植物血细胞凝
集素(PHA)、抗生素、牛血清的5mLRPMI-1640培养体系,置37℃恒温箱培养52h,终止培养前2~6h
或培养开始时加入适量秋水仙素。各剂量点培养瓶数,视剂量大小而定,一般是低剂量点培养数适当增
加。
3.4标本制备
培养终止后收获细胞
3.4.1低渗:小心去上清液(切勿使沉淀的细胞松动)转移到10mL锥形刻度离心管中,加0.075moll
L氯化锦液10mL,放37℃水描锅中低渗30min;
3.4.2预固定:加0.5mL固定液(甲醇:冰乙酸=3:1)混合,1400rpm(转数/分)离心7min;
3.4.3固定z去上清液,常温下固定20min,离心。反复二次:
3.4.4去上清液,离心,加固定攘,提匀,放置4℃冰箱16h以上;
3.4.5次日再离心,去上清液,加适量新配置固定液,提匀;
3.4.6制片z将适量细胞渥悬液立即滴人预温37℃的载玻片上,Giemsa染色。
3.5镜检要求
3.5.1盲片分析;
3.5.2分析者应经严格训练,能较熟练识别各种类型畸变;
3.5.3阅片必须按一定的规范,先在20×镜下寻找标准细胞,然后在油镜下计数和分析;
3.5.4作剂量-效应曲线的各剂量点分析细胞的计算\),一般是先分析100个细胞后按式(1)计算:
N=960-P)/P……(1)
式中:N一一一需要分析的细胞;
P一一畸变细胞率。
3.5.5分析细胞标准
3.5.5.1细胞完整,染色体数目为45土h
3.5.5.2分散良好,各染色体可清楚辨认z
3.5.5.3长短适中;
3.5.6发现有畸变或怀凝有异常时,记下X-Y轴坐标,同时一定征得第二、第三人确认,进行拍照,作
进一步分析。
3.6回归方程拟合
3.6.1在算术坐标纸上,将各荆量点所观察到的政着丝粒数作散点圈。若呈直线趋势,拟用直线模式:
Y=c+αD;若呈抛物线趋势,拟用二次多项式模式见式(2)。
y=c一卜αD+/3D2••(2)
式中:Y一一←双着丝率;
c一一自发现着丝率;
1)以分析双着或多着丝粒畸变。
2
WS/T204-2001
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