NY 411-2000 固氮菌肥料

NY411-2000

前言

本标准在原有标准NY/T227-1994微《生物肥料》的基础上，对其中的固氮菌肥料部分进行修改。

主要修改内容如下:

一在技术要求中删除成品无害化指标;

—在检验方法中增加允许差，并增加抽样和判定规则。

本标准自实施之日起，同时代替NY/T227-1994中的固氮菌肥料部分。

本标准的附录A,附录B、附录C都是标准的附录。

本标准由中华人民共和国农业部提出。

本标准起草单位:农业部微生物肥料质量监督检验测试中心、中国农业科学院土壤肥料研究所。

本标准主要起草人:李元芳、吴观以、李慧荃、葛诚、沈德龙。

中华人民共和国农业行业标准

固氮菌肥料NY411-2000

Azotobacterfertilizer

，范围

本标准规定了固氮菌肥料产品的分类、技术要求、检验方法、检验规则、包装、标识、运输、贮存等

本标准适用于含有益的固氮菌、能在土壤和多种作物根际中固定空气中的氮气，供作物氮素营养，

又能分泌激素刺激作物生长的活体制品。本标准也适用于以固氮菌为主的含有能促进固氮、生长的植物

促生根际细菌(PGPR)的复合固氮菌肥料

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均

为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

GB/T625-1989化学试剂硫酸

GB/T629-1997化学试剂氢氧化钠

GB/T1250-1989极限数值的表示方法和判定方法

GB/T6543-1986瓦楞纸箱

GB/T6682-1992分析实验富用水规格和试验方法

3定义

本标准采用下列定义。

3。1自生固氮菌

在土壤里能固定空气中的氮，供作物氮素营养，又能分泌激素刺激作物生长的微生物。

I2根际联合固氮菌

既依赖根际环境生长，又在根际中固定空气中的氮气，对作物的生长发育产生积极作用的微生物。

33固氮效能

固氮菌每消耗1又碳水化合物(糖)从空气中摄取氮素的毫克数，固氮效能用m。氮/9墉表示

4产品分类

本1按剂型不同分为:液体固氮菌肥料、固体固氮菌肥料和冻干固氮菌肥料。

本2按菌种及特性分为:自生固氮菌肥料、根际联合固氮菌肥料、复合固氮菌肥料。

5技术要求

5.1菌种

在含一种有机碳源的无氮培养基中能固定分子氮，并具有一定的固氮效能。菌体一般为短杆状(固

氮螺菌属菌体呈螺旋状)，革兰氏染色阴性。

一-.一一目一一一一一一一-一~-一~一一

中华人民共和国农业部2000一12-22批准2001一04一。，实施

NY411-2000

5.1.1自生固氮菌

用固氮菌属(Azotobacter)、氮单胞菌属(Azomonas)的菌种，也可用茎瘤根瘤菌(Azorhizobium

caulinodans)和固氮芽胞杆菌(Paenibacillusazotofi.zans)菌株。

5.1.2根际联合固氮菌

可用下列菌种:固氮螺旋菌(Azospirillum);阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)经鉴定为非致病菌的

菌株;粪产碱菌(Alcaligenesfaecalis)经鉴定为非致病菌的菌株;肺炎克氏杆菌(Klebsiellapneumoniae)

经鉴定为非致病菌的菌株。

使用本准则规定之外的菌种生产固氮菌肥料时，菌种必须经过鉴定，并符合5.1要求

生产固氮微生物肥料所使用的菌种，必要时还要进行菌种染色鉴别(见附录B)和菌种固氮效能测

定(见附录C).

5.2成品技术指标(见表1)

表1成品技术指标

.乐石一趟乏\)P液体固体冻干

乳白或淡褐色液体，混黑揭色或褐色粉状，湿

外观、气味乳白色结晶，无味

浊，稍有沉淀，无异臭味润、松散，无异臭味

水分，%25.0-35.03.0

pH值5.5-7.06.0-7.56.0-7.5

细度，过孔径0.18mm标准筛

520.0

的筛余物，%蕊

有效活菌数，个/.L

5.0义10,1.0X10'5.0X10,

(个/9、个/瓶))

杂菌率，，，%(5.015.02.0

有效期2，，月)3612

1)其中包括10-0马丁培养基平板上无霉菌.

2)此项仅在监督部门或仲裁检验双方认为有必要时才检测.

6抽样

按每一发酵罐菌液制成的产品为一批，逐批抽样检验。抽样过程要严格避免杂菌污染。

6.1抽样工具及用品

抽样前预先准备好无菌塑料袋(或塑料瓶)、金属勺、剪刀、封口机、牛皮纸封样袋、标签、抽样封条和

胶水。

6.2抽样数量及抽样方法

在成品库抽样，可按“.::”形分层设点抽取，抽样以件为单位，小包装产品以一包装箱为一件。大包装

(30^-50kg)产品以一袋(或一桶)为一件。抽样件数由样品基数的大小确定。1^-10件，全部抽样;11-

20。件，抽样10件;201-400件，抽取20件;样品基数大于400件者，按超过部分的2%增加抽样件数，

但总件数不要超过40件。

每件包装产品抽取一小袋，在无菌条件下每袋取样200g。然后将所有样品混匀，按四分法缩到

2000g，分装4袋，然后封口。每2袋为一份装人牛皮纸封样袋。

液体产品每件吸取10mL，一同放人无菌的三角瓶中，混匀后分成两份，每份250mL。冻干产品，每

件取一支放人无菌的三角瓶中，加无菌液体培养液，溶解混匀后分成两份，每份50ml。贴上标签和封条

(一份被抽样单位留存，一份交检测中心检测)。

NY411-2000

了检验方法

7门仪器设备及试剂

了1、1仪器设备

生物显微镜(lox工。。);

菌落计数器;

恒温培养箱;

恒温干燥箱;

恒温摇床;

灭菌锅;

无菌室或超净工作台;

酸度计;

试管:015mmX150mm,乡18mmX180mm;

培养皿:直径9cm;

三角瓶:500nal..;

无菌吸管:。5、1、5、扮mLp

玻璃刮刀;

滤纸;

酒精灯;

标准筛:孔径。·18mm和0.15mm;

1号羊毛画笔;

无菌水;

无离子水。

了门.2试剂

选择培养基(见附录A);

刚果红染液((0.5写),

72成品检验

了21气味检验

取固氮菌肥料样品打开包装，进行感观检验。

7.2.2外观检验

将固体固氮菌肥料包装打开，装在白色搪瓷盘中，将液体固氮菌肥料摇匀，在明亮光线下进行感观

检验

7.2.3pH值测定

液体固氮菌肥料的pH值测定:取供检菌液直接测定pH值，取三次测定结果的平均数。

固体固氮菌肥料的pH值测定:取50mL烧杯一个，加人菌肥25g，无离子水25mL。通过磁力搅拌

器使溶液均匀后用酸度计测定pH值。取三次测定结果的平均数。

724含水量测定

称取固体固氮菌肥三份，每份20.00g,精确到0.01g，放人已称恒重的铝盒中。置105℃干燥箱内

烘烤4h,移至干燥器内，冷却后称重。根据烘干前后质量差按式(1)计算含水量。取三个样品测定数的

平均值。平行样品绝对偏差应低于1%.

含水量%‘，理瓮竺X100.，··-’·，.，.，，····一·，‘，

式中:m。一一烘干前样品质量+g;

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ml—烘干后样品质量，9。

7.2.5吸附剂颖粒细度测定

称样10.00g(精确至。.01g),置于标准筛中(直径分别为。.18mm或0.15mm)，用水冲洗，用毛

笔轻刷，至粉末不再通过为止。将筛余物置105^-110c温度下烘干，称重。筛余物百分含量按式((2)计

算:

筛余物(%)二筛余物量一(1一样品含水量百分数)X100········。……(2)

样品质量

7.2.6有效活菌数和杂菌含量测定

采用平板计数法测定有效活菌数及杂菌率。

7.2-6.1测定步骤

采样应不少于500g，从中称取10.00g，加人带玻璃珠的100mL的无菌水中(液体菌剂取10mL,

加人90mL的无菌水中)，静置20min后在旋转式摇床上200r/min充分振荡30min，即成母液的菌悬

液。

用无菌吸管吸取5mL上述母液的菌悬液