GB/T 30957-2014 饲料中赭曲霉毒素A的测定 免疫亲和柱净化-高效液相色谱法

ICS65.120

B46

中华人民共和国国彖标准

GB/T30957—2014

饲料中赭曲霉毒素A的测定

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法

DeterminationofochratoxinAinfeeds—

Highperformanceliquidchromatographywithimmunoaffinitycolumnclean-up

2014-07-08发布2015-01-10实施

GB/T30957—2014

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本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）归口。

本标准由农业部饲料质量监督检验测试中心（南昌）、中国农业科学院农业质量标准与检测技术研

究所［国家饲料质量监督检验中心（北京）］、上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所负责

起草。

本标准主要起草人:饶辉、文虹、周华娇、符金华、徐田放、饶正华、尹腾桂、杨琳芬、邢磊、赵薇娜、

赵志辉°

T

GB/T30957—2014

饲料中赭曲霉毒素A的测定

免疫亲和柱净化■高效液相色谱法

1范围

本标准规定了饲料中赭曲霉毒素A的免疫亲和柱净化-高效液相色谱测定方法。

本标准适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料中赭曲霉毒素A的测定。

本标准定量限为5.0卩g/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料采样

GB/T20195动物饲料试样的制备

3原理

试样经过甲醇-水提取，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有赭曲霉毒素A特异抗体的免疫亲和

层析柱层析净化，用PBS缓冲液和纯水清洗，甲醇洗脱，洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪测

定赭曲霉毒素A的含量。

4试剂

除特殊说明外，所用试剂均为分析纯试剂，用水符合GB/T6682中二级用水的规定。

4.1甲醇:色谱级。

4.2乙月青：色谱级。

4.3氯化钠。

4.4磷酸氢二钠。

4.5磷酸二氢钾。

4.6氯化钾。

4.7盐酸。

4.8碳酸氢钠。

4.9吐温-20(Tween-20)0

4.10乙酸。

4.11清洗缓冲液:将25g氯化钠(4.3),5g碳酸氢钠(4.8)溶于水中，加入0.1m吐温-20(4.9),加水

稀释至1o

4.12PBS缓冲液:称取8.0g氯化钠(4.3)、1.2g磷酸氢二钠(4.4).0.2g磷酸二氢钾(4.5).0.2g氯化

钾(4.6)溶于