GB/T 33419-2016 环氧乙烷灭菌生物指示物检验方法

ICS11.080

C50OB

中华人民共和国国彖标准

GB/T33419—2016

环氧乙烷灭菌生物指示物检验方法

Testmethodofbiologicalindicatorforethyleneoxidesterilizationprocesses

2016-12-30发布2017-07-01实施

GB/T33419—2016

目次

BI

1范围1

2规范性引用文件1

3术语和定义1

4技术要求2

5检验方法3

附录A（规范性附录）抗力测定仪要求及抗力试验4

附录B（规范性附录）活菌培养计数方法5

附录C（规范性附录）存活曲线方法测定D值6

附录D（规范性附录）部分阴性分析法测定D值7

附录E（规范性附录）验证法测定D值10

GB/T33419—2016

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吕

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由中华人民共和国卫生和计划生育委员会提出并归口。

本标准起草单位:江苏省疾病预防控制中心、中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所、

国家卫生计生委卫生和计划生育监督中心、徐州市疾病预防控制中心。

标准起草人：徐燕、孙俊、吴晓松、陈越英、张流波、段亚波、史绍毅、王洪敏、黄靖雄、谈智、张剑、

王玲、孙巍、张伟、褚宏亮、常桂秋。

T

GB/T33419—2016

环氧乙烷灭菌生物指示物检验方法

1范围

本标准规定了环氧乙烷灭菌生物指示物的术语和定义、技术要求和检验方法。

本标准适用于对环氧乙烷灭菌生物指示物的检验。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB18281.1医疗保健产品灭菌生物指示物第1部分:通则

GB18281.2医疗保健产品灭菌生物指示物第2部分:环氧乙烷灭菌用生物指示物

GB/T24628医疗保健产品灭菌生物与化学指示物测试设备

消毒技术规范（2002年版）卫生部

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

生物指示物biologicalindicator；BI

对指定条件下的特定灭菌程序具有一定抗力，并装在内层包装中可供使用的染菌载体。包含菌片

和自含式生物指示物。

3.2

载体carrier

试验微生物的支持物。

3.3

指示微生物testorganism

用于制备染菌载体的微生物。

3.4

活菌计数viabletestorganismcount

在规定的培养条件下，测定细菌悬液、染菌载体等样本中含有的活菌数量。通过计算长成的单个菌

落数，而得到单位体积菌悬液中或染菌载体上的存活试验菌菌数。

3.5

D值Dvalue

在设定的条件下，杀灭微生物数量达90%所需的时间。

注：单位为分（min）。

3.6

存活曲线survivorcurve

在设定的条件下,微生物的存活情况与对灭菌介质暴露变化的关系曲线。

1

GB/T33419—2016

3.7

菌落形成单位colony-formingunit；CFU

在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，以

其表达活菌的数量。

3.8

存活-杀灭区间survival-killwindow

在规定的条件下灭菌处理时，生物指示物从全部长菌（存活暴露）过渡到全部不长菌（杀灭暴露）的

暴露程序。

3.9

自含式生物指示物self-containedbiologicalindicator

内层包装中含有细菌复苏生长所需培养基的生物指示物。

3.10

存活时间survivaltime；ST

用于生物指示物抗力鉴定时，受试指示物样本经杀菌因子作用后全部样本有菌生长的最长作用

时间。

3.11

杀灭时间killingtime；KT

用于生物指示物抗力鉴定时，受试指示物样本经杀菌因子作用后全部样本无菌生长的最短作用

时间。

4技术要求

4.1指示微生物

4.1.1菌种

环氧乙烷灭菌指示微生物应采用枯草杆菌黑色变种CBacillusatrofihaeusATCC9372,

NCTC10073,NCIMB8058,DSM2277,NRRB-4418,CIP77.18）芽胞。

4.1.2菌量

回收菌量大于等于1.0X10”CFU/片，回收菌量同时应在制造商标明菌量的一50%〜+300%范

围内。

4.1.3抗力

当暴露于环氧乙烷浓度600mg/L+30mg/L,温度54°C±1°C，相对湿度60%±10%时，D值大

于等于2.5min,测试的D值应在制造商规定的D值±20%范围内。

4.2载体

符合GB18281.1和GB18281.2的要求；同时,暴露于温度大于等于55°C，环氧乙烷浓度大于等于

800mg/L,相对湿度大于等于70%、暴露时间大于等于6h等条件下灭菌过程中不会变形、熔化、腐蚀

和其他损坏。

4.3培养基

4.3.1培养基和培养条件应能稳定地生产出符合4.1和GB18281.1和GB18281.2性能要求的试验菌

2

GB/T33419—2016

悬液。培养基应不影响试验菌的稳定性，同时要与染菌载体和生物指示物制造工艺和材料相兼容。

4.3.2恢复培养基：

a）使10CFU〜100CFU的微生物恢复生长；

b）使损伤的微生物生长；

c）经过环氧乙烷灭菌处理后应确保可以抵消任何可能影响指示微生物活性的化合物，并在有效

期内性能和颜色不发生改变。

4.3.3生物指示物的设计，应有利于初始微生物数量在储存、运输和装卸过程中的基本稳定并防止外

界微生物对菌片的污染。

4.4稳定性

生物指示