GB/T 36831-2018 松纺锤瘤锈病菌检疫鉴定方法

ICS65.020.01

B16

国

中华人民共和国国家标准

GB/T36831-2018

松纺锤瘤锈病菌检疫鉴定方法

DetectionandidentificationofCronartiumfusiformeHedgcock&

HuntexCummins

2018-09-17发布2019-04-01实施

国家市场监督管理总局峪非

中国国家标准化管理委员会0(..'I(J

GB/T36831-2018

目u昌

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由全同植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）提出井归口。

本标准起草单位：中华人民共和同深圳归入境检验检疫局、深圳市检盼检疫科学研究院、中华人民

共和｜司山东归入境检验检疫局、中华人民共和同浙江州入境检验检疫局。

本标准主要起草人：王颖、程颖慧、日十奕优、余道坚、高瑞芳、章桂明、李芳荣、史亚千、李秋枫、刘新娇、

封立平、陈吴健。

I

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附录D

（资料性附录）

DNA提取方法

DNA提取方法如下：

a)将荒玻片切割成1mmXlmm的小块，75%乙醇浸泡1h，去离子水冲洗3遍，温热灭菌备用；

b)在解剖镜下挑取5个～100个锈菌抱子，置于七述玻片上，此上力｜］盖另一玻片，用慑子轻压，直

至看见抱子压裂；

c)取Genomiphi裂解缓冲液3µL于PCR管中，将上述两片玻片同时移入加了裂解缓冲液的

PCR管中，65·ci且浴10min;

d)加入1µL中和缓冲液终止反应；

e)加入1µL陋、4,u.L无菌’水、11µL反应缓冲液、1µL扩增混合液，30。c~目育2h;

o65·c温浴10min;

g)加20µLTE恪解DNA。

该核酸制备也可采用各实验室建立的方法。

9

GB/T36831-2018

参考文献

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10

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松纺锤瘤锈病菌检疫鉴定方法

1范围

本标准规定了松纺锤瘤锈病菌（Crunar/iumJi,sifunn俨Hedgcock&HuntexCummins）的检疫鉴

定方法。

本标准适用于松纺锤瘤锈病菌寄主、转主寄主及其产品中携带松纺锤瘤锈病菌的检疫鉴定。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

性抱子器pycnia

A,姐抱子萌发形成的单核菌丝体在侵染寄主时形成的锈菌性器官。

2.2

性抱子pycniospore

性袍子器中产生的单核抱子。

2.3

锈抱子器aecia

A,性抱子与受精丝结合或与单核菌丝结合产生的双核次生菌丝组织。

2.4

锈抱子aeciospore

锈抱子器中产生的串生、单胞、双核、黄色、球形或卵形的于包子。

2.5

夏抱子堆uredinium

A,双核菌丝产生的成堆的黄色或橙黄色的双核抱子。

2.6

夏抱子urediniospore

夏抱子1作内产生的单胞、双核表面有细刺或疵刺的无性于包子。

2.7

冬抱子teliospore

A,双核菌丝产生的厚壁有性抱子在生长后期形成的单胞或多胞的休眠抱子。

2.8

冬抱子堆telia

冬抱子聚集在一起形成的组织。

2.9

担子basidia

寄主体上的冬抱子萌发形成的组织。

2.10

担抱子basicliospore

担子横裂四胞，每胞生一小柄，其上着生单胞、元色或稍带黄色的子包子。

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3基本信息

中文名：松纺锤瘤锈病菌

英文名：Southernfusiformrust

学名：Crυnartiw月fi1川旷mf'Hedgcock&HuntexCummms

元性态：I'f'ridnmium_fi1门furmf'J.C.Arthur&K巳rn.

分类地位：真菌界Fungi，担子菌门Ba1州iomycota，柄锈菌亚门Puccniomycotina，柄锈菌纲Puccin­

iomycete日，柄锈菌目Puccinial凹，柱锈菌科Cronartiaceae，柱锈属Cronartiumo

传播途径：松纺锤瘤锈病菌主要通过气流及感病寄主传播。

近似乖J1:i由松殖锈病菌Cr阳rtiumC『ii俨『J咛ροriφf

C.COJ月ρ／uni川，苏格兰松殖锈病菌C.flαιζidum。

松纺锤瘤锈病菌的其他信息参见附录A～附录C。

4方法原理

松殖锈病菌的形态学特征及ITS1/ITS4核酸序列比对结果作为检疫鉴定该病菌的主要依据，同时

参考病原菌的发生同家和地区、寄主范围及为害症状。

5仪器用具和主要试剂

5.1仪器用具

高压灭菌锅、显微镜、体视显微镜、冰箱、PCR扩增仪、电泳仪、凝胶成像仪、高速冷冻离心机、恒泪

水浴锅