SB/T 10462-2008 肉与肉制品中肠出血性大肠杆菌O157:H7检验方法

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犅４１

备案号：—

２４７２９２００８

中华人民共和国国内贸易行业标准

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犛犅犜１０４６２２００８

肉与肉制品中肠出血性

大肠杆菌：检验方法

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狆

２００８０７０３发布２００８１２０１实施

中华人民共和国商务部发布

肉与肉制品中肠出血性

大肠杆菌检验方法

范围

本标准规定了肉与肉制品中肠出血性大肠杆菌的检验方法

本标准适用于肉与肉制品中肠出血性大肠杆菌的检验

规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款凡是注日期的引用文件其随后所有

的修改单不包括勘误的内容或修订版均不适用于本标准然而鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本适用于本标准

食品卫生微生物学检验肉与肉制品检验

食品卫生微生物学检验染色法培养基和试剂

进出口肉与肉制品中肠出血性大肠杆菌检验方法

设备和材料

刀子剪刀镊子棒均质杯等

培养皿直径ㅤㅤㅤㅤ

吸管具有分度值具有分度值

移液器及吸头

注以上实验器材在试验前应灭菌处理

显微镜

均质器

冰箱

恒温水浴锅

生化培养箱

天平感量

电热干燥箱

高压灭菌器

培养基和试剂

改良新生霉素增菌肉汤配方见第章

山梨醇麦康凯平板配方见附录第章

月桂基磷酸盐胰蛋白胨肉汤配方见附录第章

普通琼脂按中规定

半固体培养基按中规定

三糖铁培养基按中规定

胰蛋白胨肉汤按中规定

用培养基试剂按中规定

西蒙氏柠檬酸盐培养基按中规定

氨基酸脱羧酶试验培养基赖氨酸鸟氨酸按中规定

糖发酵管棉籽糖纤维二糖和山梨醇按中规定

抽样

抽样数量及操作步骤按进行

检验程序

检验程序见图

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图肠出血性大肠杆菌检验程序

操作步骤

以无菌方法称取样品放入装有灭菌的增菌肉汤的均质杯中

均质加盖后置生化培养箱中培养

将增菌肉汤倍递增稀释成稀释液

用移液器分别吸取稀释液各滴于平板上以灭菌棒涂布均

匀于培养箱中培养

在每个平板上挑取可疑菌落个分别接种到肉汤中放入培养箱培

养可疑菌落中心淡褐色扁平透明边缘光滑直径约

挑选肉汤中产气无荧光者接种普通琼脂平板放入培养箱培养

生化试验取培养后纯菌落分别接种各类生化培养基置除靛基质试验培

养后加试剂观察外其他均在观察具体内容见表

表肠出血性大肠杆菌生化学性状

生化试剂生化特性反应

三糖铁培养基底及斜面呈黄色阴性

山梨醇发酵阴性或迟缓紫色不变

纤维二糖发酵阴性紫色不变

胰蛋白胨肉汤靛基质阳性出现红色环

阳性变红色阴性不变色

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西蒙氏柠檬酸盐阴性浅绿色不变

赖氨酸脱羧酶阳性紫红色不变

鸟氨酸脱羧酶阳性紫红色不变

动力试验培养基有动力或无动力沿穿刺线扩散

棉籽糖发酵阳性变黄色

结果报告凡检测样品按上述方法分离出单个菌落纯菌落符合生化特性反应标准

血清凝集试验或乳胶凝集试剂测试呈阳性结果者即可报告该检测样品中检出肠出

血性大肠杆菌

附录

规范性附录

培养基和试剂

改良新生霉素增菌肉汤

胰蛋白胨

号胆盐

乳糖

无水磷酸氢二钾

无水磷酸二氢钾

氯化钠

水

将上述成分溶于水后校正至分装后置高压灭菌取出后冷却至室温以

过滤灭菌的新生霉素溶液使最终浓度为

山梨醇麦康凯平板

蛋白胨

脉胨

猪胆盐或牛羊胆盐ㅤㅤㅤㅤ

氯化钠

琼脂

水

山梨醇

结晶紫水溶液

中性红水溶液

亚碲酸钾溶液最终量为

制法

将蛋白胨脉胨胆盐和氯化钠溶解于蒸馏水中校正至将琼脂加入于

蒸馏水中加热溶解将二液合并分装于锥形瓶内高压灭菌备

用

临用时加热融化琼脂趁热加入山梨醇冷却至时加入结晶紫和中性红水溶液并

加入过滤除菌的亚碲酸钾溶液使最终浓度为并加入头孢克肟使最终

浓度为

月桂基磷酸盐胰蛋白胨肉汤

胰蛋白胨或胰酪胨

氯化钠

乳糖

磷酸氢二钾

磷酸二氢钾

月桂基磷酸钠

四甲基伞形酮葡萄糖醛苷酸

水

将以上成分溶解于蒸馏水中分装到有倒立发酵管的试管中每管于高压灭菌

最终

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