YC/T 447-2012 烟草及烟草制品 麦芽糖、蔗糖、葡萄糖、果糖的测定 高效液相色谱-蒸发光检测器法

ICS65.160

X87

备案号:—

372372012

中华人民共和国烟草行业标准

/—

YCT4472012

、、

烟草及烟草制品麦芽糖蔗糖

、

葡萄糖果糖的测定高效液相色谱

-

ㅤㅤㅤㅤ

蒸发光检测器法

—,,,

TobaccoandtobaccoroductsDeterminationofmaltosesucroselucose

pg

—

fructoseHiherformanceliuidchromatorah-evaorativelihtscatterin

gpqgpypgg

detectionmethod

2012-08-22发布2012-09-15实施

国家烟草专卖局发布

/—

YCT4472012

、、

烟草及烟草制品麦芽糖蔗糖

、

葡萄糖果糖的测定高效液相色谱

-

蒸发光检测器法

1范围

、、、

本标准规定了烟草及烟草制品中麦芽糖蔗糖葡萄糖果糖的高效液相色谱蒸发光散射的测定

方法。

、、、。

本标准适用于烟草及烟草制品中麦芽糖蔗糖葡萄糖果糖的测定

、、、、、

本方法测定烟草及烟草制品中麦芽糖蔗糖葡萄糖果糖含量的检出限分别为0.018%0.012%

,、、。

和定量限分别为和

0.015%0.021%0.057%0.042%0.048%0.069%

2规范性引用文件

。,

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

,,()。

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

/分析实验室用水规格和试验方法

GBT6682

/ㅤㅤㅤㅤ

烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法

YCT31

3原理

/,

样品经0.02molL氢氧化钠溶液萃取后采用高效液相色谱蒸发光检测器法测定萃取液中的麦芽

、、,、、。

糖蔗糖葡萄糖和果糖的浓度并转换为样品中麦芽糖蔗糖葡萄糖和果糖的含量

4试剂与材料

,,/。

除特别要求以外试剂纯度均应使用分析纯及以上试剂水应符合GBT6682中一级水的规定

(),()。

4.1果糖色谱纯使用前需在96±2℃下干燥2h

(),()。

4.2葡萄糖色谱纯使用前需在96±2℃下干燥2h

(),()。

4.3蔗糖色谱纯使用前需在96±2℃下干燥2h

(),()。

4.4麦芽糖色谱纯使用前需在96±2℃下干燥2h

()。

4.5乙腈色谱纯

萃取溶液:/氢氧化钠溶液。

4.60.02molL

,,。

将0.8g片状氢氧化钠加入到800mL水中搅拌溶解放置冷却后用水稀释至1L

()。

4.7氮气纯度≥99.9%

4.8标准溶液

4.8.1混合标准储备液

分别称取果糖()、葡萄糖()、()、(),

4.10.4g4.20.4g蔗糖4.30.2g麦芽糖4.40.09g精确至

,,,、、

0.0001g加水溶解后转移至100mL容量瓶中用水定容至刻度配制成果糖葡萄糖蔗糖和麦芽糖

1

/—

YCT4472012

/、/、//。

浓度分别为和的混合标准储备液密封保存于

4000mL4000mL2000mL900mL

μgμgμgμg

,。

条件下有效期个月

0℃~4℃1

4.8.2混合标准工作溶液

(),,,,

用水稀释混合标准储备液4.8.1于容量瓶中定容摇匀制备至少个系列标准溶液其浓度范

5

。,。

围应覆盖检测样品浓度该混合标准工作液应在使用前配制参考的浓度见表1

表1混合标准工作溶液单位为微克每毫升

序号果糖葡萄糖蔗糖麦芽糖

11251256328

225025012557

3500500250113

410001000500225

5200020001000450

6400040002000900

5仪器及条件

5.1旋风式样品磨粉机。

,。

5.2分析天平感量为0.0001g

ㅤㅤㅤㅤ

5.3定性滤纸,12.5cm。

ϕ

5.40.22m水相滤膜。

μ

5.5振荡器。

,、、()。

5.6高效液相色谱仪配自动进样器柱温箱蒸发光检测器ELSD

,:

以下色谱分析条件可供参考采用其他条件应验证其适用性

———:,:,:,

色谱柱聚苯乙烯二乙烯苯共聚物基质的键合氨基柱内径柱长填料粒

-4.6mm250mm

度为5m;

μ

———:()();

流动相水乙腈体积比为

∶4.528∶72

———流速:/;

0.8mLmin

———柱温:;

20℃

———进样量:;

10L

μ

———检测时间:。

20min

ELSD参数:

———():/;

氮气4.7流量2.2Lmin

———漂移管温度:;

50℃

———增益:。

1

6分析步骤

6.1试样制备

按/制备试样并测定其水分含量。

YCT31

2

/—

YCT4472012

6.2萃取

称取约(),,,

1g试样白肋烟称样量为2g精确至0.0001g置于100mL具塞三角瓶中准确加入

(),/,(),,

30mL萃取溶液4.6以180rmin振荡40min定性滤纸5.3过滤取2mL滤液经0.22m水相

μ

滤膜()过滤后待分析。

5.4

6.3标准工作曲线的制作

(),,。

对混合标准工作溶液4.8.2进行色谱测定由保留时间定性外标法定量根据混合标准工作溶

2

,,

液各组分浓度的对数以及对应组分的响应峰面积的对数建立线性回归方程相关系数应不小于

R

0.999。

6.4样品测定

按照仪器测试条件()测定试样()。混合标准工作溶液和样品溶液色谱图参见附录A。

5.66.2

7结果的计算与表述

、、():

样品中麦芽糖蔗糖葡萄糖和果糖的含量按式计算

1

cV

×

X…………()

=×100%1

()

m1w10001000

×-××

式中:

———、、、,();

X样品中麦芽糖蔗糖葡萄糖果糖的含量用质量分数%表示

———、、、ㅤㅤㅤㅤ,(/);

c样品溶液中麦芽糖蔗糖葡萄糖果糖的测定浓度单位为微克每毫升μgmL

———,();

V萃取液的体积单位为毫升mL

———,();

m样品的质量单位为克g

w———样品水分的质量分数。

,。

结果以两次平行测定值的算术平均值表示精确至0.01%两次平行测定结果的相对平均偏差应

不大于5.0%。

8精密度和回收率

8.1精密度

、、、、,,。

对高中低含量的试样ABC分别进行日间和日内精密度实验本方法的精密度见表2

表2方法的精密度

含量日内精密度日间精密度

试样组分

%RSD%()()

n=6RSD%n=5

麦芽糖0.311.632.74

蔗糖2.871.041.93

A

葡萄糖5.860.940.82

果糖8.010.310.83

3

/—

YCT4472012

表()

2续

含量日内精密度日间精密度

试样组分

()()

%RSD%n=6RSD%n=5

麦芽糖0.340.121.82

蔗糖0.480.291.42

B

葡萄糖2.7l0.130.87

果糖5.020.120.79

麦芽糖———

蔗糖———

C

葡萄糖1.341.812.72

果糖2.411.982.45

注:“—”表示未检出。

8.2回收率

、、、、,、、,。

对高中低含量的试样ABC分别添加高中低三个浓度水平的标准物质本方法的回收率见表3

表方法的回收率

3

低浓度水平加标ㅤㅤㅤㅤ中浓度水平加标高浓度水平加标

原值/

试样组分/////////

加标量测定值回收率加标量测定值回收率加标量测定值回收率

mg

mgmg%mgmg%mgmg%

麦芽糖3.131.784.961032.775.83973.967.32106

蔗糖28.7218.9146.979735.6464.2610053.9682.89100

A

葡萄糖58.4430.0989.7110457.92116.3310086.96143.3498

果糖80.1140.39120.5510079.50158.2098118.60203.82104

麦芽糖3.372.185.711074.528.141066.6310.15102

蔗糖4.842.877.66984.629.511017.3312.39103

B

葡萄糖26.9813.5740.9210326.3554.0210340.5368.34102

果糖48.0819.0168.0510537.1384.999956.92103.4897

麦芽糖————2.842.91102———

蔗糖————4.855.02104———

C

葡萄糖13.284.1917.39988.4822.1710513.9427.48102

果糖24.178.9133.2310216.3440.279925.5149.2498

注:“—”表示未检出。

1

:“”、、。

注2原值为1.0g试样中所含的麦芽糖蔗糖葡萄糖和果糖的质量

4

/—

YCT4472012

9试验报告

试验报告应说明:

———识别被测试样需要的所有信息;

———参照本标准所使用的试验方法;

———,;

测定结果包括各单次测定结果及其平均值

———与本标准规定的分析步骤的差异;

———在试验中观察到的异常现象;

———试验日期;

———测定人员。

ㅤㅤㅤㅤ

5

/—

YCT4472012

附录

A

()

资料性附录

色谱图示例

A.1混合标准工作溶液典型色谱图示例见图A.1。

ㅤㅤㅤㅤ

———果糖;

1

2———葡萄糖;

3———蔗糖;

4———麦芽糖。

图A.1混合标准工作溶液典型色谱图

6

/—

YCT4472012

A.2样品溶液典型色谱图示例见图A.2。

———果糖;

1

2———葡萄糖;

3———蔗糖;

4———麦芽糖。

ㅤㅤㅤㅤ

图A.2样品溶液典型色谱图