GA/T 1615-2019 法庭科学 生物检材中氯氮平检验 气相色谱和气相色谱-质谱法

ICS13.310

A92GA

中华人民共和国公共安全行业标准

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法庭科学生物检材中氯氮平检验

气相色谱和气相色谱-质谱法

Forensicsciences—Examinationmethodsforclozapineinbiological

samples—GCandGC-MS

××××-××-××发布××××-××-××实施

中华人民共和国公安部发布

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前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC179/SC1）提出并归口。

本标准起草单位：公安部物证鉴定中心、山西医科大学。

本标准起草人：张蕾萍、王爱华、任昕昕、董林沛、宋歌、王芳琳、于忠山、何毅、贠克明、王玉

瑾、栾玉静。

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法庭科学生物检材中氯氮平检验气相色谱和气相色谱-质谱法

1范围

本标准规定了法庭科学生物检材（血、尿、肝、肾、胃及胃内容等）中氯氮平的气相色谱（GC）

定量检验方法和气相色谱-质谱（GC-MS）定性定量检验方法。

本标准适用于法庭科学生物检材中氯氮平的定性分析和定量分析。其他可疑样品中氯氮平的定性分

析和定量分析可参照使用。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GA/T122毒物分析名词术语

3术语和定义

GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。

4原理

以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对生物检材进行提取、净化及浓缩后，采用气

相色谱-质谱法定性定量，气相色谱法定量，以保留时间、质谱特征离子碎片峰和相对丰度比作为定性

判断依据；以峰面积为依据，采用外标法进行定量分析。

5试剂及材料

5.1试剂

实验用水应符合GB/T6682中规定的三级水。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯，试

剂包括：

a)乙醇；

b)甲醇；

c)二氯甲烷；

d)乙酸乙酯；

e)磷酸二氢钠；

f)磷酸氢二钠；

g)硼砂；

h)氢氧化钠；

i)1%氢氧化钠溶液：称取1.0g氢氧化钠用水溶解并稀释至100mL；

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j)磷酸盐缓冲液(pH值6)：称取磷酸氢二钠（NaHPO·12HO）8.812g，磷酸二氢钠

242

（NaHPO·2HO）27.37g，加水溶解并稀释至1000mL；

242

k)硼砂-氢氧化钠缓冲液（pH值10）：称取硼砂（NaBO·10HO）2.38g,氢氧化钠0.86g，加

2472

水溶解并稀释至500mL；

l)标准溶液：

1)1.0mg/mL标准物质溶液：根据氯氮平标准物质的纯度，称取适量，用甲醇配制1.0mg/mL

氯氮平标准物质溶液，置于冰箱中冷藏保存。有效期6个月。或采用市售标准溶液；

2)0.1mg/mL标准工作溶液：移取1.0mg/mL的氯氮平标准物质溶液1.0mL，用甲醇定容至

10mL，混匀，密封，置于冰箱中冷藏保存。有效期3个月。实验中所用其他浓度的标准

工作溶液均由1.0mg/mL标准物质溶液用甲醇稀释得到。

注：特殊情况下可使用对照溶液代替标准溶液。

5.2材料

材料包括：

a)具盖离心管；

b)具塞玻璃试管；

c)pH试纸：范围1～14；

d)固相萃取柱：Oasis®HLB固相萃取柱或其他等效固相萃取柱，使用前依次用甲醇、水活化。

注：Oasis®HLB柱是Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品

的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

6仪器和设备

仪器和设备包括：

a)气相色谱仪：配有氮磷检测器（NPD）；

b)气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源（EI）；

c)移液器；

d)电子天平；

e)超声清洗器；

f)振荡器；

g)离心机；

h)浓缩器。

7操作方法

7.1定性分析

7.1.1样品提取

7.1.1.1液液提取

移取血液等液体检材样品1.0mL～5.0mL，或称取铰碎的肝脏等固体检材样品1.0g～5.0g于具盖离心

管中，加入一定量的硼砂-氢氧化钠缓冲液或1%氢氧化钠溶液调pH值至9～10，再加入二氯甲烷或乙酸

乙酯5mL～10mL，振荡10min，8000r/min离心10min，分离有机相；重复提取一次，合并两次提取的有

机相，在浓缩器上50℃浓缩至干。残留物用甲醇100μL溶解，作为检材样品提取液供仪器分析。

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7.1.1.2固相萃取(适用于新鲜的血液样品)

移取血液检材样品1.0mL～5.0mL于具盖离心管中，加入磷酸缓冲液（pH值6）5mL～10mL，混匀，

超声15min，8000r/min离心20min，取上清液转移至已活化好的固相萃取柱中，控制流速为0.5mL/min～

1.0mL/min，依次用3mL甲醇/水溶液（体积比5:95）淋洗；用4mL二氯甲烷洗脱，收集洗脱液在浓缩器

上50℃下浓缩至干，残留物用甲醇100μL溶解，作为检材样品提取液供仪器分析。

7.1.1.3质控样品制备

取等量相似基质的空白样品（若无相似基质空白样品可用血液替代）两份于具盖离心管中，一份作

为空白样品，一份添加氯氮平标准物质，作为添加样品（添加样品的浓度为1.0µg/mL(g)），与检材样

品平行操作，得到空白样品提取液和添加样品提取液供仪器分析。

7.1.2仪器检测

7.1.2.1仪器条件（气相色谱-质谱）

以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：

a)色谱柱：DB-5MS毛细色谱柱(30m×0.25mm×0.25m)或等效色谱柱；

注：DB-5MS为Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的

认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

b)色谱柱温程：100℃保持2min，以15℃/min速率升温至280℃，保持17min；

c)进样口温度：280℃；

d)传输线温度：230℃；

e)离子源温度：200℃；

f)载气：高纯氦气；

g)柱流量：1mL/min～2mL/min；

h)分流比：5:1～50:1；

i)质量扫描范围：40amu～450amu；

j)扫描方式：全扫描（SCAN）。

7.1.2.2进样

分别吸取检材、空白和添加样品提取液及标准工作溶液，按7.1.2.1的分析条件进样分析。

7.2定量分析

7.2.1样品提取

移取血液等液体检材样品1.0mL～5.0mL，或称取铰碎的肝脏等固体检材样品1.0g～5.0g两份，按

7.1.1进行操作。

另取等量相似基质的空白样品三份，其中两份添加氯氮平标准物质作为添加样品（添加样品中目标

物含量应为检材样品中目标物含量的(100±50)%），另一份作为空白样品，与检材样品平行操作，得

到空白样品提取液和添加样品提取液供仪器分析。

7.2.2仪器检测

7.2.2.1仪器条件

7.2.2.1.1气相色谱条件

以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：

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a)色谱柱：DB-1毛细色谱柱（30m×0.32mm×0.25µm）或等效色谱柱；

注：DB-1为Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认可。

如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

b)色谱柱温程：200℃保持1min，以10℃/min速率升温至280℃，保持10min；

c)进样口温度：280℃；

d)检测器温度：300℃；

e)载气：氮气；

f)分流比：5:1～50:1；

g)柱流量：1.0mL/min～2.0mL/min。

7.2.2.1.2气相色谱-质谱条件

按7.1.2.1规定的条件分析。

7.2.2.2进样

分别吸取检材、空白和添加样品提取液及标准工作溶液，按7.2.2.1的分析条件每个样品进样分析

2～3次。若要报告测量不确定度，每个样品分析次数应不少于6次。

7.2.3计算

7.2.3.1计算含量

记录各样品提取液平行进样2～3次的目标物保留时间和峰面积值，按公式（1）计算含量：

AMV

W=样添样（1）

AMV

添样添

式中：

W－检材样品中目标物的含量，单位为微克每克（µg/g）或微克每毫升（µg/mL）；

A样－检材样品提取液中目标物峰面积平均值；

M添－添加样品中标准物添加量，单位为微克（µg）；

V样－检材样品的定容体积，单位为毫升（mL）；

A添－添加样品提取液中目标物峰面积平均值；

M样－检材样品的取样量，单位为克（g）或毫升（mL）；

V添－添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）。

7.2.3.2计算相对相差

记录两份平行操作的检材样品中目标物的含量，按公式（2）计算相对相差：

X−X

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