DB34/T 2515-2015 猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法
DB34/T 2515-2015 Pig epidemic diarrhea virus RT-PCR detection method
基本信息
发布历史
-
2015年11月
文前页预览
研制信息
- 起草单位：
- 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所。
- 起草人：
- 潘孝成、张丹俊、赵瑞宏、沈学怀、周学利、胡晓苗、戴银、侯宏艳、李贺侠、张宁、何国荣、周德权、王庆。
- 出版信息：
- 页数：9页 | 字数：- | 开本： -
内容描述
ICS11.220
B41
DB34
安徽省地方标准
DB34/T2515—2015
猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法
RT-PCRassayforporcineepidemicdiarrheavirus
文稿版次选择
2015-11-10发布2015-12-10实施
安徽省质量技术监督局发布
DB34/T2515—2015
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则编写。
本标准由安徽省农业标准化委员会归口。
本标准由安徽省农业科学院畜牧兽医研究所提出。
本标准起草单位：安徽省农业科学院畜牧兽医研究所。
本标准起草人：潘孝成、张丹俊、赵瑞宏、沈学怀、周学利、胡晓苗、戴银、侯宏艳、李贺侠、张
宁、何国荣、周德权、王庆。
I
DB34/T2515—2015
猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法
1范围
本标准规定了猪流行性腹泻病毒（porcineepidemicdiarrheavirus，PEDV）RT-PCR检测方法及
其技术要求。
本标准适用于猪肠内容物、粪便以及细胞培养物中PEDV核酸的检测。
2缩略语
下列缩略语适用于本文件。
PEDV：猪流行性腹泻病毒（porcineepidemicdiarrheavirus）
PCR：聚合酶链式反应（polymerasechainreaction）
RT-PCR：反转录聚合酶链式反应（reversetranscription-polymerasechainreaction）
RNA：核糖核酸（ribonucleicacid）
DEPC：焦炭酸二乙酯（diethylpyrocarbonate）
Taq酶：TaqDNA聚合酶（TaqDNApolymerase）
dNTP：脱氧核糖核苷三磷酸（deoxy-ribonucleosidetriphosphate）
M-MLV：莫洛尼氏鼠白血病病毒（moloneymurineleukemiavirus）
PBS：磷酸缓冲液（phosphatebuffersolution）
TAE：Tris-乙酸电泳缓冲液（trisacetate-EDTAbuffer）
EB：溴化乙锭（ethidiumbromide）
3原理
PEDV是一种RNA病毒。
RNA反转录产生的cDNA可作为PCR模板进行扩增。
根据PEDV保守基因序列设计一对引物，在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以引物为延
伸起点，通过变性、退火和延伸，体外复制出与母链模板
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