GB/T 41212-2021 纳米技术 荧光素二乙酸酯法检测纳米颗粒诱导巨噬细胞产生的活性氧

GB/T 41212-2021 Nanotechnologies—5-(and 6)-Chloromethyl-2',7' Dichloro-dihydrofluorescein diacetate (CM-H2DCF-DA) assay for evaluating nanoparticle-induced intracellular reactive oxygen species(ROS) production in RAW 264.7 macrophage cell line

国家标准 中文简体 现行 页数:22页 | 格式:PDF

基本信息

标准号
GB/T 41212-2021
标准类型
国家标准
标准状态
现行
中国标准分类号(CCS)
国际标准分类号(ICS)
发布日期
2021-12-31
实施日期
2022-07-01
发布单位/组织
国家市场监督管理总局、国家标准化管理委员会
归口单位
全国纳米技术标准化技术委员会(SAC/TC 279)
适用范围
本文件描述了如何用5-(6)氯甲基-2′,7′二氯二氢荧光素二乙酸酯(CMH2DCFDA)检测和评价RAW264.7巨噬细胞暴露于纳米物体、纳米颗粒及其聚集体和团聚体后产生活性氧(ROS)的方法。本文件适用于用24孔板的检测。如果用其他孔板,需要调整样品用量并检验操作步骤的有效性以保证检测结果可信。

研制信息

起草单位:
国家纳米科学中心、中国医学科学院基础医学研究所、中国食品药品检定研究院
起草人:
吴晓春、纪英露、樊慧真、李海芸、李一叶、聂广军、许海燕、温涛、文海若、淡墨
出版信息:
页数:22页 | 字数:44 千字 | 开本: 大16开

内容描述

ICS07.120

CCSC04

中华人民共和国国家标准

/—//:

GBT412122021ISOTS190062016

纳米技术荧光素二乙酸酯法检测

纳米颗粒诱导巨噬细胞产生的活性氧

—(),

Nanotechnoloies5-and6-Chloromethl-2'7'Dichloro-dihdrofluorescein

gyy

()

diacetateCM-HDCF-DAassaforevaluatinnanoarticle-inducedintracellular

2ygp

()

reactiveoxenseciesROSroductioninRAW264.7macrohaecellline

ygpppg

(/:,)

ISOTS190062016IDT

2021-12-31发布2022-07-01实施

国家市场监督管理总局

发布

国家标准化管理委员会

/—//:

GBT412122021ISOTS190062016

目次

前言…………………………Ⅰ

引言…………………………Ⅱ

1范围………………………1

2规范性引用文件…………………………1

3术语和定义………………1

4符号和缩略语……………3

5材料………………………3

6技术设备…………………4

7纳米颗粒样品制备………………………4

8准备工作…………………5

8.1概述…………………5

8.2流式细胞仪校准……………………6

8.3实验培养基…………………………6

8.4试剂制备……………6

8.5细胞培养物的准备…………………6

8.6准备实验用的培养物………………6

8.7检测细胞生长状态…………………6

8.8评估纳米颗粒的干扰………………7

8.9对照组的准备………………………8

8.9.1概述……………8

8.9.2对照组说明……………………8

储备溶液制备()…………………

8.9.3Sin-11mM8

9评价纳米材料对细胞内ROS产生的影响……………8

准备孔板中的细胞………………

9.1248

9.2用对照物和不同浓度纳米颗粒处理细胞…………8

9.3CM-HDCF-DA细胞暴露…………9

2

用孵育细胞………………………

9.4CM-HDCF-DA9

2

9.5流式细胞仪分析……………………9

10数据分析和结果………………………10

()……………

附录资料性替代细胞系

A11

()………………

附录资料性可替代的荧光表征技术

B12

()…………………

附录资料性悬浮液的制备和表征

C13

()…………………

附录资料性来自的实验数据示例

DRAW264.714

参考文献……………………16

/—//:

GBT412122021ISOTS190062016

前言

/—《:》

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GBT1.120201

起草。

本文件使用翻译法等同采用/:《纳米技术荧光素二乙酸酯法检测纳米颗粒诱

ISOTS190062016

导巨噬细胞产生的活性氧》。

与本文件中规范性引用的国际文件有一致性对应关系的我国文件如下:

———/—:(:

推荐标准