GB/T 27533-2024 犬细小病毒病诊断技术

ICS11220

CCSB.41

中华人民共和国国家标准

GB/T27533—2024

代替GB/T27533—2011

犬细小病毒病诊断技术

Diagnostictechniquesforcanineparvovirusdisease

2024-12-31发布2025-07-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T27533—2024

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

缩略语

4……………………1

生物安全措施

5……………1

临床诊断

6…………………2

样品采集处理与保存

7、……………………3

胶体金免疫层析法

8………………………4

病毒分离鉴定

9……………4

血凝与血凝抑制试验

10(HA/HI)………………………5

11PCR……………………6

荧光

12PCR………………8

综合判定

13…………………9

附录规范性试剂溶液的配制

A()………………………10

附录资料性荧光引物和探针序列

B()PCR、PCR……………………11

附录资料性犬细小病毒反应产物电泳图

C()PCR…………………12

附录资料性犬细小病毒荧光扩增曲线图

D()PCR…………………13

Ⅰ

GB/T27533—2024

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替犬细小病毒病诊断技术与相比除结构调

GB/T27533—2011《》,GB/T27533—2011,

整和编辑性改动外主要技术变化如下

,:

增加了缩略语见第章

———(4);

增加了生物安全措施见第章

———(5);

增加了流行病学见

———(6.1);

增加了血常规检查见

———(6.3);

增加了胶体金免疫层析法见第章

———(8);

增加了荧光见第章

———PCR(12);

增加了综合判定见第章

———(13)。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出

。

本文件由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本文件起草单位青岛农业大学逢时青岛海洋科技有限公司中国动物卫生与流行病学中心

:、()、、

青岛海华生物集团股份有限公司河北北方学院山东省农业科学院青岛市城阳区农业农村服务中心

、、、、

长春西诺生物科技有限公司山东省动物疫病预防与控制中心上海海关动植物与食品检验检疫技术中

、、

心青岛巴特菲科技发展有限公司重庆市动物疫病预防控制中心淄博市张店区畜牧渔业服务中心

、、、。

本文件主要起草人张洪亮单虎马清霞苏红李一飞刘刚张瑞华肖颖朱伟民宋晓明

:、、、、、、、、、、

杨瑞梅孙圣福周芳夏振强徐超林佳旭黄兵于永乐黄娟秦志华栾伟丽李明义李桂梅

、、、、、、、、、、、、、

刘丽蓉李健马凤龙张传美李然栋温建新秦晓冰马晶

、、、、、、、。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为

:

年首次发布为

———2011GB/T27533—2011;

本次为第一次修订

———。

Ⅲ

GB/T27533—2024

引言

犬细小病毒病是由犬细小病毒感染引起

(canineparvovirusdisease,CP)(canineparvovirus,CPV)

的犬科和鼬科动物的一种传染病该病以剧烈呕吐出血性肠炎白细胞显著减少以及心肌炎为主要特

。、、

征分为肠炎型和心肌炎型两种类型以上的临床病例为肠炎和心肌炎混合型我国将其列为三类

,,50%。

动物疫病

。

犬细小病毒属于细小病毒科Parvoviridae细小病毒属Parvovirus是一种无包膜单链

(),(),DNA

病毒与猫泛白细胞减少症病毒水貂肠炎病毒等细小病毒的核苷酸同源性超过

。CPV(FPLV)、(MEV)

对不同分离株的基因序列分析发现易通过抗原漂移产生新的突变株有个亚型

98%。,CPV,4:

和能凝集恒河猴仓鼠猪马和猫的红细胞不能凝集人牛

CPV-2、CPV-2a、CPV-2bCPV-2c。CPV、、、,、、

羊兔鼠和鸡红细胞所以血凝特异性也是鉴定该病毒的参考指标之一该病容易与犬瘟热犬冠状病

、、,。、

毒感染等疾病相混淆需要结合临床诊断和实验室检测进行确诊

,。

Ⅳ

GB/T27533—2024

犬细小病毒病诊断技术

1范围

本文件描述了犬细小病毒病的临床诊断样品采集处理与保存以及胶体金免疫层析法病毒分离

、、、

鉴定血凝与血凝抑制试验荧光等方法

、、PCR、PCR。

本文件适用于犬细小病毒病的诊断和监测

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

实验室生物安全通用要求

GB19489

兽医诊断样品采集保存与运输技术规范

NY/T541、

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

黑洞淬灭剂

BHQ:(blackholequencher)

犬细小病毒病

CP:(canineparvovirusdisease)

细胞病变效应

CPE:(cytopathiceffect)

犬细小病毒

CPV:(canineparvovirus)

循环阈值

Ct:(cyclethreshold)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(diethylpyrocarbonate)

改良培养基

DMEM:dulbecco’seagle(dulbecco’smodifiedeaglemedium)

脱氧核糖核苷三磷酸

dNTP:(deoxyribonucleosidetriphosphate)

乙二胺四乙酸

EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)

羧基荧光素

FAM:6-(6-carboxyfluorescein)

血凝单位

HAU:(hemagglutinationunit)

磷酸盐缓冲盐水

PBS:(phosphatebufferedsaline)

聚合酶链式反应

PCR:(polymerasechainreaction)

5生物安全措施

进行样品采集处理及保存等操作时按照的规定执行本文件中涉及的实验室生物安

、NY/T541。

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