DB34/T 3650-2020 水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定 酶联免疫吸附法

ICS65.150

B52

DB34

安徽省地方标准

DB34/T3650—2020

水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定

酶联免疫吸附法

DeterminationofresiduesofnitrofuranmetabolitesinaquaticProductsELISA

method

文稿版次选择

2020-06-22发布2020-07-22实施

安徽省市场监督管理局发布

DB34/T3650—2020

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由安徽省水产技术推广总站提出。

本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：安徽国泰众信检测技术有限公司、宁国市金东坊农业开发有限公司、宣城市念念

虾稻轮作专业合作社、安徽省水产技术推广总站、合肥市畜牧水产技术推广中心、北京柏奥泰科技有限

公司、合肥金荣生态农业有限公司。

本标准主要起草人：孙德祥、陈洪周、周作友、吴敏、金家红、何广、李瑞、卞红正、许世富、张

武庆、姚杰、李先锋、桂淦、郭恒心、魏泽能、荣朝振、刘传涛、魏涛、钱之云、王婷、刘卫芳、王振、

何超、范希芹、李珺、陈恩全。

I

DB34/T3650—2020

水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定酶联免疫吸附法

1范围

本标准规定了水产品中四种硝基呋喃类代谢物残留量的测定酶联免疫吸附法的原理、试剂与材料、

仪器和设备、试样制备与保存、测定方法、检测限、准确度和精密度、结果确证。

本标准适用于水产品中呋喃唑酮代谢物、呋喃它酮代谢物、呋喃西林代谢物、呋喃妥因代谢物残留

量的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T20752猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝和水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定液相色谱-串联

质谱法

GB/T30891水产品抽样规范

农业部1192号公告-1-2009水产苗种违禁药物抽检技术规范

3原理

试样经衍生化、提取出残留的硝基呋喃代谢物，分别在四种不同的硝基呋喃代谢物检测试剂盒中测

定。试样中残留的硝基呋喃代谢物、HRP酶标记抗原共同竞争板上的抗体，加TMB底物后的颜色与试样

中残留的硝基呋喃代谢物的含量成反比，用酶标仪在450nm处测定吸光度值，建立标准曲线，得到对

应硝基呋喃代谢物浓度，乘以最终试液体积，除以最终试样质量，即得出含量。

4试剂与材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的二级水。

4.1乙酸乙酯：色谱纯

4.2正己烷：色谱纯

4.3盐酸溶液[1mol/L]：取8.3ml的36％盐酸溶液溶于水中并定容到100ml。

4.4磷酸氢二钾溶液[0.1mol/L]：称取17.4g的无水磷酸氢二钾溶于水中并定容到1000ml。

4.5氢氧化钠溶液[1mol/L]：称取4g的氢氧化钠，溶于水中并定容到100ml。

4.6硝基呋喃类代谢物测定试剂盒

——包括：呋喃唑酮代谢物（AOZ）测定试剂盒、呋喃它酮代谢物（AMOZ）测定试剂盒、呋喃西林

代谢物(SEM)测定试剂盒、呋喃妥因代谢物(AHD)测定试剂盒。

——组成参见附录A。

4.6.1呋喃唑酮代谢物（AOZ）标准系列工作液（ng/mL）：0，0.02，0.06，0.18，0.54，1.62；

1

DB34/T3650—2020

4.6.2呋喃它酮代谢物（AMOZ）标准系列工作液（ng/mL）：0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4；

4.6.3呋喃西林代谢物(SEM)标准系列工作液（ng/mL）：0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4；

4.6.4呋喃妥因代谢物(AHD)标准系列工作液（ng/mL）：0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4；

4.6.5样品提取液：将水与试剂盒中10×浓缩提取液，按1﹕9的比例混合配置。

4.6.6衍生化试剂：试剂盒自带50mmol/L的2-硝基苯甲醛。

4.6.7洗液：将水与试剂盒中20×浓缩洗液，按1：19的比例混合配制。

4.6.8TMB底物。

4.6.9终止液。

5仪器和设备

5.1酶标仪：配备450nm滤光片。

5.2分析天平：0.01g。

5.3组织捣碎机。

5.4漩涡仪。

5.5恒温振荡器。温控范围：室温～100℃，温控精度：±0.5℃

5.6离心机：离心力大于4500g。

5.7氮吹仪：温控范围：室温～100℃

5.8恒温培