GB/T 35029-2018 基于微阵列芯片的遗传性耳聋基因检测方法

ICS11.040.55

C30OB

中华人民共和国国家标准

GB/T35029—2018

基于微阵列芯片的遗传性

耳聋基因检测方法

Methodbasedthemicroarrayformutationdetetionofhereditaryhearingloss

2018-05-14发布2018-12-01实施

发布

GB/T35029—2018

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由全国生物芯片标准化技术委员会(SAC/TC421)提出并归口。

本标准起草单位:博奥生物集团有限公司。

本标准主要起草人:蒋迪、项光新。

I

GB/T35029—2018

基于微阵列芯片的遗传性

耳聋基因检测方法

1范围

本标准规定了基于微阵列芯片的常见遗传性耳聋基因检测的操作方法。

本标准适用于临床辅助诊断、新生儿筛查、流行病学调查、健康人筛查等领域常见的遗传性耳聋相

关基因位点的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T27990—2011生物芯片基本术语

YY/T1153体外诊断用DNA微阵列芯片

YY/T1154激光共聚焦扫描仪

3术语和定义

GB/T27990-2011界定的术语和定义适用于本文件。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

DNA：脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid)

dATP:脱氧腺昔三磷酸(dcoxyadenosinetriphosphate)

dCTP:脱氧胞背三磷酸(deoxycytidinetriphosphate)

dGTP：脱氧鸟昔三磷酸(deoxyguanosinetriphosphate)

dTTP:脱氧胸昔三磷酸(dcoxythymidinetriphosphate)

GJE2：缝隙连接蛋白B亚基2(gapjunctiobeta2)

GJB3：缝隙连接蛋白0业基3(gapjunctiobeta3)

PCR：聚合酶链式扩增(polymerasechaireaction)

SDS:十二烷基硫酸钠(sodiumdodecylsulfate)

SLC26A4:溶质转运蛋白26成员4(solutecarrierfamily26,member4)

SSC：柠檬酸盐缓冲液(citratebuffersolution)

5原理

根据现已发现并基于我国人群聋病流行病学调查确证的遗传性耳聋基因突变位点信息，采用多重

扩增及芯片杂交技术对中国人群中常见的遗传性耳聋基因突变位点进行检测。

1

GB/T35029—2018

以人基因组DNA为模板，采用合适引物对相关基因位点所在基因片段进行扩增和荧光标记，然后

依据碱基互补配对原则，与能够识别该序列的基因芯片进行杂交，最后进行芯片扫描和数据分析。由于

针对所检测的多个位点的野生型和突变型分别设计了引物和探针，因此可以同时检测出多个位点的野

生型和突变型结果。

6材料

6.1仪器设备

符合YY/T1154要求并获得医疗器械注册证书的微阵列芯片扫描仪、核酸微量离心机、离心管、恒

温摇床、芯片洗干仪（备选）、微量加样器及加样器吸头、微量离心机、离心管、恒温摇床、芯片洗涤容

器等。

6.2试剂

本方法中需要的试剂可以是单独的试剂，也可以是已获得医疗器械注册证书的等效试剂盒中的

试剂。

6.2.1水

本方法中所用水为GB/T6682规定的三级水。

6.2.2引物、探针

针