GA/T 1601-2019 法庭科学 生物检材中芬太尼检验液相色谱-质谱法

ICS13.310

A92GA

中华人民共和国公共安全行业标准

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法庭科学生物检材中芬太尼检验

液相色谱-质谱法

Forensicsciences—Examinationmethodsforfentanylinbiological

samples—LC-MS

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中华人民共和国公安部发布

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前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC179/SC1）提出并归口。

本标准起草单位：公安部物证鉴定中心、杭州市公安司法鉴定中心。

本标准主要起草人：董颖、王瑞花、栾玉静、任昕昕、宋歌、董林沛、于忠山、何毅、王芳琳、张

蕾萍、常靖、王炯、张云峰、应剑波、卓晓聪、李晓飞、田国刚。

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法庭科学生物检材中芬太尼检验液相色谱质谱法

1范围

本标准规定了法庭科学生物检材（血、尿、肝、肾、胃及胃内容等）中芬太尼的液相色谱-质谱（LC-MS）

的定性定量检验方法。

本标准适用于法庭科学生物检材中芬太尼的定性分析和定量分析。其他可疑样品中芬太尼的定性分

析和定量分析可参照使用。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GA/T122毒物分析名词术语

3术语和定义

GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。

4原理

以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求对生物检材进行提取、净化及浓缩，采用液相色

谱-质谱法定性定量，以保留时间、质谱特征离子碎片峰和相对丰度比作为定性判断依据；以峰面积为

依据，采用外标法进行定量分析。

5试剂和材料

5.1试剂

实验用水应符合GB/T6682中规定的一级水。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯，试

剂包括：

a）甲醇（色谱纯）；

b）乙腈（色谱纯）；

c）氨水；

d）盐酸；

e）乙酸铵；

f）标准溶液：

1)1.0mg/mL标准物质溶液：根据芬太尼标准物质纯度和盐型换算后，用甲醇配制1.0mg/mL

芬太尼标准物质溶液，置于冰箱中冷藏保存。有效期6个月。或采用市售标准溶液；

2）0.1mg/mL标准工作溶液：移取1.0mg/mL标准物质溶液1.0mL，用甲醇稀释至10mL，混

匀，密封，置于冰箱中冷藏保存。有效期3个月。实验中所用其他浓度的混合标准工作溶

液均由0.1mg/mL标准物质溶液用甲醇稀释得到。

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注：特殊情况下可使用对照溶液代替标准溶液。

5.2材料

材料包括：

a)具盖离心管；

b)有机系微孔滤膜：0.22µm；

c)混合型阳离子交换（MCX）固相萃取柱：基质为苯磺酸化的聚苯乙烯-二乙烯苯高聚物，使用

前依次用1mL甲醇、1mL水活化。

6仪器和设备

仪器和设备包括：

a）液相色谱-质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）和三重四极杆或离子阱质量分析器；

b）电子天平；

c）离心机；

d）振荡器；

e）移液器。

7操作方法

7.1定性分析

7.1.1样品提取

7.1.1.1固相萃取

移取血液等液体检材样品1.0mL～2.0mL，或称取铰碎的肝脏等固体检材样品1.0g～2.0g于具盖离

心管中。加入0.1mol/L盐酸4mL，振荡15min，8000r/min离心15min，取上清液转移至已活化好的MCX

固相萃取柱中，依次用0.1mol/L盐酸1mL、甲醇1mL淋洗，弃去淋洗液，挤干水分或离心或真空抽固

相萃取柱2min，用1mL5%的氨水/甲醇溶液（体积比5:95）进行洗脱，收集洗脱液，置于浓缩器上45℃

浓缩至干，残留物用甲醇200L溶解，用0.22μm的有机系微孔滤膜过滤，供仪器分析。

7.1.1.2质控样品制备

取等量相似基质的空白样品（若无相似基质空白样品可用血液替代）两份于具盖离心管中，一份作

为空白样品，一份添加芬太尼标准物质，作为添加样品（添加样品的浓度为10ng/mL(g)），与检材样品

平行操作，得到空白样品提取液和添加样品提取液供仪器分析。

7.1.2仪器检测

7.1.2.1仪器条件

7.1.2.1.1液相色谱-质谱仪（离子阱质量分析器）条件

以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：

a)色谱柱：XTerraRP18液相色谱柱（2.1mm×150mm，3.5μm）或其他等效色谱柱；

注：XTerra®RP18是Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产

品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

b)流动相：65%乙腈:35%5mmoL/L乙酸铵（氨水调节pH至9.5）；

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c)柱温：30℃；

d)流速：0.2mL/min；

e)进样量：10µL；

f)离子源：电喷雾电离（ESI）；

g)检测方式：正离子；

h)毛细管电压：4.5kV；

i)毛细管温度：300℃；

j)雾化气流速：35arb；

k)锥孔气流速：5arb；

l)相对碰撞能：32%；

m)扫描模式：采用一级、二级质谱同时全扫描（SCAN）。

7.1.2.1.2液相色谱-质谱仪（三重四极杆质量分析器）条件

以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：

a)色谱柱：ACQUITYUPLCBEHC18柱(2.1mm×50mm,1.7µm)或其他等效色谱柱；

注：ACQUITYUPLCBEHC18是Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表

示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

b)流动相：A:乙腈，B:5mmoL/L乙酸铵(氨水调节pH至9)；

c)洗脱：梯度洗脱，梯度见表1；

表1梯度洗脱条件

时间

AB

min

10%90%

1.590%10%

2.290%10%

2.510%90%

4.010%90%

d)柱温：35℃；

e)流速：0.3mL/min