DB15/T 2076-2021 动物垫料中绿脓杆菌检测

ICS07.100.99

CCSB41

15

内蒙古自治区地方标准

DB15/T2076—2021

动物垫料中绿脓杆菌检测

DetectionofPseudomonpsaeruginosainanimalbedding

2021-01-25发布2021-02-25实施

内蒙古自治区市场监督管理局发布

DB15/T2076—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由中华人民共和国呼和浩特海关提出并归口。

本文件起草单位：中华人民共和国呼和浩特海关、二连浩特市疾病预防控制中心。

本文件主要起草人：赵治国、敖威华、杨帆、延涵、王海艳、陈林军、崔强、韩祎陟、靳木子、郭

文丽、马彩霞。

I

DB15/T2076—2021

动物垫料中绿脓杆菌检测

1范围

本文件规定了动物垫料中绿脓杆菌的定性检测方法。

本文件适用于动物垫料中绿脓杆菌定性检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T33682基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴别微生物方法通则

SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则

SN/T1538.2培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

动物垫料animalbedding

用于吸收动物排泄物，使动物保持舒适生活环境的铺垫物。

注：包括动物笼内非直接与动物机体接触的铺垫物。

4设备和材料

4.1冰箱：2℃～5℃。

4.2全自动细菌鉴定系统。

4.3飞行时间质谱仪。

4.4二级生物安全柜。

4.5天平：感量0.1g。

4.6pH计。

4.7无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。

4.8高压灭菌器。

4.9无菌量筒：250mL。

4.10无菌试管：18mm×180mm。

4.11均质器及灭菌带滤膜的均质袋。

1

DB15/T2076—2021

4.12恒温培养箱：36℃±1℃。

4.13无菌接种针、接种环。

4.14光学显微镜。

4.15无菌培养皿：15mm×90mm。

4.16无菌试管：18mm×180mm。

4.17无菌棉签。

4.18无菌镊子。

4.19无菌剪刀。

4.20无菌勺。

4.21无菌载玻片。

5培养基和试剂

5.1实验用水：符合GB/T6682的要求。

5.2SCDLP增菌液：见附录A中A.2。

5.3假单胞菌CFC选择性培养基：见附录A中A.3。

5.4假单胞菌CN选择性培养基：见附录A中A.4。

5.5氧化酶试验：见附录A中A.5。

5.6革兰氏染液：见附录A中A.6。

5.7绿脓菌素培养液：详见详见附录A中A.7。

5.8硝酸盐蛋白胨水培养基：见附录A中A.8。

5.9明胶液化培养基：见附录A中A.9。

5.10营养琼脂：见附录A中A.10。

5.11生化鉴定试剂盒。

5.12革兰氏阴性菌生化鉴定卡。

5.13飞行时间质谱仪靶板。

5.14绿脓杆菌标准菌株ATCC27853，或等效菌株。

6检验程序

绿脓杆菌检验程序见图1。

2

DB15/T2076—2021

样品制备

检样25g或25cm2样液+225mLSCDLP增菌

36℃±1℃，24h±2h

和平板

CFCCN

挑取可疑菌落，接种营养琼脂平板

36℃±1℃，18h～24h

革兰氏染色

全自动细菌鉴定系统或飞行时间质谱仪鉴定

硝

氧绿明4

酸

化脓胶2

盐

酶菌