YC/T 184-2004 烟草及烟草制品 烟草特有N-亚硝胺的测定

ICS65.160

X87

备案号:14402-2004Y口

中华人民共和国烟草行业标准

YC/T184-2004

烟草及烟草制品

烟草特有N一亚硝胺的测定

Tobaccoandtobaccoproducts-

DeterminationoftobaccospecificN-nitrosoamines

2004-10-19发布2005-03-01实施

国家烟草专卖局发布

YC/T184-2004

月9青

本标准的附录A为资料性附录。

本标准由国家烟草专卖局提出。

本标准由全国烟草标准化技术委员会(TC144)归口。

本标准起草单位:中国烟草总公司郑州烟草研究院。

本标准主要起草人:赵明月、谢复炜、胡清源、王异、刘克建。

YC/T184-2004

烟草及烟草制品

烟草特有N一亚硝胺的测定

范围

本标准规定了烟草和烟草制品中四种烟草特有N亚硝胺仁N一亚硝基降烟碱(NNN),N一亚硝基新

烟碱(NAT),N一亚硝基假木贼碱(NAB),4-(甲基亚硝胺基)-1-(3-毗吮基)-1一丁酮(NNK)」的测定方法。

本标准适用于烟草和烟草制品。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T5606.1卷烟第1部分:抽样

GB/T19616烟草成批原料取样的一般原则(GB/T19616-2004,ISO4874:2000,MOD)

YC/T31烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准

烟草特有N一亚硝胺tobaccospecificN-nitrosoamines(TSNAs)

仅在烟草和烟草制品中存在的N一亚硝胺

4原理

用二氯甲烷的碱性溶液萃取烟草和烟草制品中的TSNAs，萃取液经碱性氧化铝层析柱纯化，通过

气相色谱一热能分析联用仪(GC-TEA)定量分析检测其中四种TSNAs的含量。

5试荆

除特别要求以外，均应使用分析纯级试剂，水应为蒸馏水或同等纯度的水。

5.1二氯甲烷，色谱纯。

5.2甲醇，色谱纯

5，3无水硫酸钠，分析纯。

5.410%氢氧化钠溶液，分析纯。

5.5碱性氧化铝，层析用(200目~300目)。

5.6内标溶液:配制浓度为4000ng/mL的N一戊基一((3一甲基毗咤基)亚硝胺溶液作为内标溶液，以二

氯甲烷(5.1)为溶剂

5.7TSNAs标准系列溶液:按下列浓度范围配制TSNAs标准系列溶液，以二氯甲烷(S.1)为溶剂，其

中内标浓度为400ng/mL。标准溶液应当存放在一20℃冰箱中，有效期6个月

NNN:100ng/mL,200ng/mL,500ng/mL,l000ng/mL,2000ng/mL,5000ng/mL,

NAT:100ng/mL,200ng/ml500ng/mL,l000ng/mL,2000ng/mL,5000ng/mL,

YC/T184-2004

NAB:30ng/mL,60ng/mL,150ng/mL,300ng/mL,600ng/mL,l500ng/mL。

NNK:100ng/mL,200ng/mL,500ng/mL,l000ng/mL,2000ng/mL,5000ng/mL,

6仪翻

常用实验仪器及下述各项:

6.1分析天平:感量0.1mg.

6.2气相色谱仪(配有热能分析仪检测器)。

6.3色谱柱:弹性毛细管柱30mX0.32mmX1Km，固定液5%一二苯基一95%一二甲基聚硅烷。

6.4柱前保护柱:弹性毛细管柱1mX0.32mmXIKm，固定液5%一二苯基一95%一二甲基聚硅烷。

6.5超声波发生器。

6.6浓缩仪。

6.7玻璃层析柱:具塞，内径为20mm，长度为500mm,

7分析步.

7.1抽样

按GB/T19616和GB/T5606.1抽取样品。

7.2烟草样品制备

按YC/T31制备试样，并测定水分含量。

7.3侧定次数

每个样品应平行测定两次。

7.4样品分析

7.4.1样品萃取

称取1.00g烟样，将其放人100mL锥形瓶中，加人1mL100o氢氧化钠溶液((5.4)和20mL二抓甲

烷溶液((5.1)，置于超声波发生器((6.5)超声(频率:40kHz)提取20min,

7.4.2柱层析

7.4.2.1层析柱准备

碱性氧化铝((5.5)在110℃条件下活化2h待用。层析柱((6.7)保持洁净干燥，先加人30mL二抓

甲烷((5.1)，将15g碱性氧化铝(5.5)经湿法处理后加人到层析柱((6.7)中，用玻棒搅拌氧化铝赶走气

泡。再加人2g已烘干的无水硫酸钠，用50mL二抓甲烷洗脱层析柱((6.7)。当液面下降至硫酸钠层时

关闭层析柱活塞。

7.4.2.2层析

将锥形瓶中所有样品加人层析柱((6.7)，并用5mLX3二抓甲烷(5.1)洗涤锥形瓶内壁。洗涤液加

人层析柱((6.7)。等液面接近柱头后，再用30mL二抓甲烷((5.1)洗脱层析柱((6.7)，该部分洗脱液不收

集。最后用100mL甲醇:二氯甲烷为8:92(体积比)溶液洗脱层析柱((6.7)，收集该部分洗脱液。

7.4.3洗脱液浓缩

在洗脱液中准确加人100pL内标溶液((5.6)，在高纯氮气保护吹扫下将其浓缩至1mL左右，转移

到2mL色谱小瓶中进行GC-TEA分析，白肋烟和烤烟样品的色谱图示例在附录A中已给出。

7.5GC-TEA分析

7.5.1气相色谱仪((6.2)条件

7.5.1.1色谱柱(6.3).

7.5.1.2柱前保护柱((6.4)，在进行100次样品分析后需更换。

7.5.1.3程序升温:初始温度500C，保持2min;100C/min升至180`C;保持10min;10'C/min升至

2300C;30`C/min升至2600C;保持20min.

2

YC/T184-2004

7.5.1.4进样口温度:225-C.

7.5.1.5载气:氦气，2.5mL/min,

7.5.1.6进样量2pL，不分流，不分流时间1min，吹扫流量50mL/min,

7.5.2热能分析仪(6.2)条件

7.5.2.1热裂解温度:5500C,

7.5.2.2接口温度:250`C.

8结果计算

以干基计的四种丁SNAs的含量，按式((1)进行计算:

fXAXm,X100...……。·。。……。..……(1)

A.XnX(100一w)

式中:

In—每克试样的TSNAs含量，单位为纳克每克((ng/g);

子-一相对校正因子(由校正曲线求出);

m,—样品溶液中内标量，单位为纳克(ng);

A-TSNAs峰面积;

A，—内标峰面积;

n—试样的质量，单位为克(9);

一试样的水分含量，%。

以两次测定的平均值作为测定结果，结果精确至。.1ng/g,

t妞性、回收率和检出限

烟草中四种TSNAs侧定的重复性、回收率和检测限结果见表1.

表1烟草中四种TSNAs侧定的，复性、回收率和检测限结果

TSNAs重复性(n=5)/(%)回收率八%)检侧限/(ng/mL)

NNN4.092.914.01

NAT4.890.74.80

NAB4.096.915.87

NNK4.798.68.46

YC/T184-2004

附录A

(资料性附录)

色谱图示例

产NNN

NAB尸NK

图A.1白肋烟中TSNAs分析典型色谱图

图A.2烤烟中TSNAs分析典型色谱图