DB45/T 1314-2016 动物尿液中西马特罗、克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇残留量的测定 高效液相色谱 质谱/质谱法

ICS71.040.40

G0404G

DB45

广西壮族自治区地方标准

DBDB1314—201645/T

动物尿液中西马特罗、克仑特罗、莱克多巴

胺、沙丁胺醇残留量的测定

高效液相色谱-质谱/质谱法高效液相色谱-质谱/质谱法

2016-05-01发布2016-06-01实施

广西壮族自治区质量技术监督局发布

DB45/T1314DB45/T—2016

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准按照GB/T

本标准由广西壮族自治区科学技术厅提出。

本标准起草单位：广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心、上海出入境检验检疫局动植物与食品

检验检疫技术中心、南宁市蓝光生物技术有限公司、广西壮族自治区分析测试研究中心。

本标准主要起草人：刘晓松、凌经昌、吕春秋、黄大新、陈浩、甘国栋、叶开富、张兰、谢体三、

潘丽金、萧浩、方晓明。

*请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。*请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

III

DB45/T1314DB45/T—2016

动物尿液中西马特罗、克仑特罗、莱克多巴

胺、沙丁胺醇残留量的测定高效液相色谱-质谱/质谱法高效液相色谱-质谱/质谱法胺、沙丁胺醇残留量的测定

1范围

本标准规定了动物尿液中西马特罗、克仑特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇残留量的测定方法。

本标准适用于动物尿液中西马特罗、克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇残留量的检测。

本标准方法检出限为0.2μg/kg，定量限为0.5µg/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法6682GB/T

3原理

动物尿样经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶水解后，离心取上清液，调节至pH7.0～8.0，过免疫亲

和柱净化，液相色谱-串联质谱法测定，内标法定量。

4试剂与材料

4.14.1总则

除另有规定外，所有试剂均为分析纯，试验用水应符合6682GB/T一级水的标准。

4.24.2试剂及试剂配制

4.2.14.2.1甲醇（CH3OH）：色谱纯。

4.2.24.2.2甲酸（HCOOH）。

4.2.34.2.3乙酸（CH3CHOOH）。

4.2.44.2.4浓盐酸（HCl）：质量分数37%，密度1.18g/cm3。

4.2.54.2.5乙酸铵（CHCOONH4）。

4.2.64.2.6氯化钠（NaCl）。

4.2.74.2.7氯化钾（KCl）。

4.2.84.2.8磷酸二氢钾（KH2PO4）。

4.2.94.2.9四水磷酸氢二钠（Na2HPO4⋅4H2O）。

4.2.104.2.10三羟基甲氨甲烷（T）。ris

4.2.114.2.11聚氧乙烯山梨醇酐月桂酸酯（Tween20）。

4.2.124.2.12牛血清白蛋白（BSA）：纯度：98%。

1

DB45/T1314DB45/T—2016

4.2.134.2.13β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶：β-葡萄糖醛苷酶，30U/mL(pH3.8，38oC)；芳基硫酸酯酶，

60U/mL(pH6.2，38oC)。

4.2.144.2.140.1%甲酸溶液：取1mL甲酸加入到1L水中。

4.2.154.2.150.1%甲酸-甲醇溶液：取1mL甲酸加入到1L甲醇中。

4.2.164.2.163%乙酸溶液：取3mL乙酸加入到97mL水中。

4.2.174.2.171mol/LTris溶液（pH8.0）：称取121.1g三羟基甲基氨基甲烷（Tris），加800mL水，溶解后，

用浓盐酸调节至pH8.0，用水定容到1L。

4.2.184.2.18磷酸盐缓冲液（PBS缓冲液）：称取8.00g氯化钠（NaCl），0.20g氯化钾（KCl），0.20g

磷酸二氢钾（KH2PO4），1.56g四水磷酸氢二钠（Na2HPO4⋅4H2O），加入800mL蒸馏水溶解定容到1L。

4.2.194.2.19PBSt溶液：取0.05mLTween20加入到100mLPBS缓冲液（4.2.18）中。

4.2.204.2.20乙酸铵缓冲液：称取15.4g乙酸铵，溶解于100mL水中，用乙酸调节pH至5.2。

4.2.214.2.21洗脱液I：称取1g牛血清白蛋白（BSA），量取30mL乙酸，加入0.5mLTween80020、mL

蒸馏水，溶解后定容到1L。

4.2.224.2.22洗脱液II：取800mL甲醇和30mL乙酸，用水定容至1L。

4.2.234.2.23盐酸克仑特罗（C12H18Cl2N2O⋅HCl）、盐酸莱克多巴胺（C18H23NO3⋅HCl）、西马特罗（C12H17N3O）、

沙丁胺醇（C13H21NO3）标准品：纯度大于98.0%。

4.2.244.2.24盐酸克仑特罗-D9、盐酸莱克多巴胺-D5、西马特罗-D7、沙丁胺醇-D3标准品：纯度大于98.0%。

4.2.254.2.25标准储备液（100μg/mL）：分别准确称取适量的盐酸克仑特罗、盐酸莱克多巴胺、西马特罗、

沙丁胺醇标准品，用甲醇配成含盐酸克仑特罗、盐酸莱克多巴胺、西马特罗、沙丁胺醇浓度各为100μg/mL

的标准储备液。-20℃冰箱中保存，有效期为3个月。

4.2.264.2.261.0μg/mL混合中间标准溶液I：分别准确量取1.0mL标准储备液（4.2.25）至100mL容量瓶

中，用甲醇定容。-20℃冰箱中保存，有效期为1个月。

4.2.274.2.27100