GB/T 43650-2024 野生动物及其制品DNA物种鉴定技术规程

ICS65.020.01

CCSB60

中华人民共和国国家标准

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GBT436502024

野生动物及其制品DNA物种鉴定

技术规程

TechnicalroceduresforDNAseciesidentificationofwildanimalsand

pp

theirroducts

p

2024-03-15发布2024-07-01实施

国家市场监督管理总局

发布

国家标准化管理委员会

/—

GBT436502024

目次

前言…………………………Ⅲ

1范围………………………1

2规范性引用文件…………………………1

、………………………

3术语定义和缩略语1

3.1术语和定义…………………………1

3.2缩略语………………2

4样品采集与储存…………………………2

4.1样品采集……………2

4.2抽样…………………2

4.3取样与储存…………………………2

4.4运输…………………3

5DNA鉴定程序的构成……………………4

6DNA鉴定程序……………4

6.1样品前处理…………………………4

6.2DNA提取……………5

6.3DNA纯化……………5

6.4DNA质量评估………………………5

6.5检测方法……………6

7结果表述…………………10

8追溯方法…………………10

9污染预防与处理…………………………10

10实验室区域设置………………………10

11仪器和试剂要求………………………10

12实验室清洁……………10

13安全防护………………10

14废弃物处理……………10

()…………

附录资料性电泳检测程序

A11

A.1常规电泳检测法…………………11

A.2芯片电泳检测法…………………12

A.3其他电泳检测法…………………12

()……………………

附录资料性通用引物序列信息

B13

B.1Ctb基因通用引物………………13

y

B.2COI基因通用引物………………13

Ⅰ

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GBT436502024

B.312SrRNA基因通用引物…………13

B.416SrRNA基因通用引物…………13

()………………

附录资料性通用引物反应体系与反应程序

CPCR15

C.1反应体系……………15

C.2反应程序……………15

()、…………

附录资料性特异性的引物反应程序与反应体系

DPCR16

高鼻羚羊()特异引物……………

C.1Saiatatarica16

g

雪豹()特异引物…………………

C.2Pantherauncia16

豹()特异引物…………………

C.3Pantheraardus17

p

虎()特异引物……………………

C.4Pantheratiris17

g

黑熊()特异引物………………

C.5Ursusthibetanus17

()…………

附录资料性反应体系与反应程序

EPCR18

q

E.1反应体系……………18

E.2反应程序……………18

()…………

附录资料性反应体系与反应程序

FdPCR19

F.1反应体系……………19

F.2反应程序……………19

参考文献……………………20

Ⅱ

/—

GBT436502024

前言

/—《:》

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GBT1.120201

起草。

。。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

本文件由国家林业和草原局提出。

(/)。

本文件由全国野生动物保护管理与经营利用标准化技术委员会SACTC369归口

:、、、

本文件起草单位东北林业大学东北林业大学司法鉴定所深圳华大生命科学研究院中国海关科

、、、、

学技术研究中心黑龙江省公安厅哈尔滨检验检测认证集团有限公司深圳华大法医科技有限公司广

、、、

东华大法医物证司法鉴定所黑龙江省野生动物研究所华南动物物种环境损害司法鉴定中心南宁海

、、、、。

关技术中心南京警察学院合肥海关技术中心广西壮族自治区公安厅东营市公安局

:、、、、、、、、、、、、

本文件主要起草人白素英马跃王震李波张伟孙磊徐艳春张利峰王剑刘微杨天天兰天明

、、、、、、、、、、、、、、

李晓平危金普郭小森李宁金煜张宇孙红瑜马云龙金香香刘闯刘昌景胡诗佳李云飞张新成

唐闳凯。

Ⅲ

/—

GBT436502024

野生动物及其制品DNA物种鉴定

技术规程

1范围

本文件规定了对野生动物及其制品的来源进行物种鉴定时样品采集与储存、鉴定程序

DNADNA

、、、、、。

的构成DNA鉴定程序结果表述追溯方法污染预防与处理实验室区域设置等主要技术要求

本文件适用于野生动物及其制品来源物种的DNA检验鉴定。

2规范性引用文件

。,

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

,;,()

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

本文件。

实验室生物安全通用要求

GB19489

/转基因产品检测实验室技术要求

GBT19495.2

/分立个体类产品随机抽样实施指南

GBZ31233

/水溶液中核酸的浓度和纯度检测紫外分光光度法

GBT34796

/法庭科学实验室检验规范

GAT383DNA

/野生动物及其产品的物种鉴定规范

LYT2501

/—、

NYT5412016兽医诊断样品采集保存与运输技术规范

、

3术语定义和缩略语

3.1术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1.1

DNA条形码DNAbarcode

、。

选定的标准区域的用于物种鉴定的一段相对较短的保守DNA片段

3.1.2

DNA物种鉴定DNAseciesidentification

p

(、、)。

利用DNA检验技术对野生动物及其制品进行分类地位科属种的判定

3.1.3

序列比对alinment

g

,。

利用计算机算法和程序确定两个或多个核苷酸序列的相似性以至于同源性

3.1.4

引物rimers

p

,;

人工合成的两段互补寡核苷酸片段一段与靶区域端模板链互补另一段与靶区域端

5'DNA3'

DNA模板链互补。

1