DB37/T 667-2007 饲料中喹乙醇的测定 液相色谱质谱联用法

ICS65.120

B20

DB37

山东省地方标准

DB37/T667—2007

饲料中喹乙醇的测定

液相色谱质谱联用法

DeterminationofolaquindoxinfeedsbyLC-MS

2007-03-09发布2007-05-01实施

山东省质量技术监督局发布

DB37/T667—2007

前言

本标准的附录A、附录B均为资料性附录。

本标准由山东省畜牧办公室提出。

本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：山东省饲料监察所、农业部饲料效价与安全监督检验测试中心（北京）。

本标准主要起草人：梁萌、杨文军、汤文利、任爱丽、孙延军。

I

DB37/T667—2007

饲料中喹乙醇的测定液相色谱质谱联用法

1范围

本标准规定了用高效液相色谱-质谱联用（LC-MS）测定饲料中喹乙醇的方法。

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中喹乙醇的测定。

本标准高效液相色谱的最低定量限为1mg/kg，质谱确证限为1mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的

修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T20195动物饲料试样的制备

3原理

饲料样品中的喹乙醇用甲醇溶液提取，过滤后用反相液相色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法定

量。并采用质谱检测器以喹乙醇的质量色谱峰保留时间和特征离子进行确证。

4试剂

除非另有说明，在分析中仅使用分析纯试剂。水符合GB/T6682一级水的规定。

4.1甲醇，色谱纯。

4.2乙酸溶液，体积分数是0.1%。

4.3碳酸钾。

4.4提取液：甲醇+水=5+95。

4.5高效液相色谱流动相：甲醇（4.1）+水，采用二元梯度洗脱。

4.6液质联用流动相：甲醇（4.1）+乙酸溶液（4.2），采用二元梯度洗脱。

4.7淋洗液1：盐酸[c(HCl)=0.1mol/L],移取8.33mL盐酸至1000mL容量瓶中，定容。

4.8淋洗液2：盐酸[c(HCl)=0.02mol/L]，移取200mL淋洗液1（4.7）至1000mL容量瓶中，定容。

4.9淋洗液3：甲醇（4.1）+水=5+95。

4.10洗脱液：甲醇（4.1）+水=40+60。

4.11喹乙醇标准液

4.11.1喹乙醇标准贮备液

称取喹乙醇标准品0.050g，精确到0.1mg（含量≥99.6%），于50ml棕色容量瓶中，加入适量洗脱

液（4.10），超声15min溶解，冷却至室温后定容，摇匀，贮存于-18℃冰箱中避光保存，有效期为一

个月。

4.11.2喹乙醇标准工作液

准确移取适量标准储备液（4.11.1）于容量瓶中，用洗脱液（4.10）定容，依次配制成0.1μg/mL、

1.0μg/mL、10.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL的标准工作溶液。现用现配。

5仪器

1

DB37/T667—2007

5.1高效液相色谱仪：具紫外检测器。

5.2离子阱质谱仪。

5.3离心机：3500r/min。

5.4具塞塑料离心管：100mL。

5.5固相萃取小柱：HLB3CC60mg。

5.6超声波振荡器。

5.7固相萃取仪。

5.8恒温振荡器。

6试样的制备

按GB/T20195规定执行。

7分析步骤

7.1提取

称取约5g试样，精确到0.1mg，于具塞锥形瓶中，加入0.5g碳酸钾（4.3），加入50.00mL提取

液（4.4），具塞置入恒温振荡器中，避光振荡45min（振荡速度110r/min）。提取液在3500r/min下

离心10min，上清液经滤纸过滤后保留滤液A，用于固相萃取净化。

7.2HLB小柱的活化

依次用2mL甲醇（4.1）和2mL水对HLB小柱(5.5)进行活化。

7.3净化

将混匀的滤液A（7.1）2