DB35/T 1657-2017 养殖水体中丁香酚的测定 气相 色谱-质谱法

ICS67.050

Z50

DB35

福建省地方标准

DB35/T1657—2017

养殖水体中丁香酚的测定气相

色谱-质谱法

DeterminationofEugenolinaquaculturewaterbyGasChromatography

MassSpectrometry

2017-05-05发布2017-08-05实施

福建省质量技术监督局发布

DB35/T1657—2017

前言

本标准按照GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则编写。

本标准由福建省海洋与渔业厅提出并归口。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准起草单位：福建省水产研究所、福建省渔业环境监测站、农业部渔业产品质量监督检验测试

中心（厦门）。

本标准主要起草人：刘海新、罗冬莲、余颖、姜琳琳、位绍红、王丽娟、叶玫、罗方方。

I

DB35/T1657—2017

养殖水体中丁香酚的测定气相色谱-质谱法

1范围

本标准规定了养殖水体中丁香酚含量测定的气相色谱-质谱法。

本标准适用于养殖水体中丁香酚含量的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法

3原理

用正己烷萃取水样中丁香酚，萃取液经无水硫酸钠脱水、减压浓缩后，硅胶固相萃取柱净化，气相

色谱-质谱检测，内标法定量。

4试剂和材料

以下所用的试剂，除特殊注明外均为分析纯试剂；水为符合GB/T6682-2008规定的一级水。

4.1丁香酚标准品：纯度≥99%。

4.2甲基丁香酚标准品：纯度≥99%。

4.3正己烷：色谱纯。

4.4乙酸乙酯：色谱纯。

4.5无水硫酸钠：经650℃灼烧4h，冷却后干燥器中贮存备用。

4.6氯化钠：经650℃灼烧4h，冷却后干燥器中贮存备用。

4.7硅胶固相萃取柱：2g/6mL，或性能相当者。

4.8标准储备液：称取丁香酚（4.1）10.0mg（精确至0.1mg）于100mL棕色容量瓶中，乙酸乙酯

（4.4）溶解并稀释至刻度，配制成100μg/mL的溶液备用，8℃以下冷藏避光保存，有效期3个月。

4.9内标储备液：称取甲基丁香酚（4.2）10.0mg（精确至0.1mg）于100mL棕色容量瓶中，乙酸

乙酯（4.4）溶解并稀释至刻度，配制成100μg/mL的溶液备用，8℃以下冷藏避光保存，有效期3

个月。

4.10标准中间液：移取100μg/mL标准储备液（4.8）1.00mL于10mL棕色容量瓶中，用乙酸乙酯

（4.4）稀释至刻度，配制成10.0μg/mL的溶液备用，8℃以下冷藏避光保存，有效期15天。

4.11内标中间液：移取100μg/mL内标准储备液（4.9）1.00mL于10mL棕色容量瓶中，用乙酸乙

酯（4.4）稀释至刻度，配制成10.0μg/mL的溶液备用，8℃以下冷藏避光保存，有效期15天。

4.12内标使用液：移取10.0μg/mL内标中间液（4.11）0.40mL于10mL棕色容量瓶中，用乙酸乙

酯（4.4）稀释至刻度，配制成0.40μg/mL的溶液，使用时现配现用。

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DB35/T1657—2017

4.13标准工作液：准确移取适量10.0μg/mL丁香酚标准中间液（4.10）和10.0μg/mL内标中间液

（4.11），用乙酸乙酯（4.4）稀释成5.00、10.0、50.0、100、150、500、1000μg/L的标准工作液，

内标物浓度均为100μg/L，使用时现配现用。

5仪器与设备

5.1气相色谱-四极杆质谱联用仪（GC-MS）：配备电子轰击电离源（EI）。

5.2分析天平：感量0.1mg和0.01g。

5.3旋涡混合器。

5.4旋转蒸发仪。

5.5氮吹仪。

5.6水相尼龙滤膜：0.45μm。

5.7有机相针式过滤器：0.22μm。

5.8固相萃取装置。

5.9三角瓶：100mL。

5.10鸡心瓶：100mL。

5.11分液漏斗：100mL。

5.12玻璃刻度试管。

6样品的采集与保存

现场采集的200mL水样装入小口棕色玻璃瓶中，盖紧、标明标记，冷藏避光运输，8℃以下冷藏避

光保存，7天内检测。

7样品测定

7.1样品萃取

水样经滤膜（5.6）抽滤。移取过滤后的水样20.0mL于三角瓶（5.9）中，加入氯化钠（4.6）1.5g～

2g，振荡溶解。将水样转入100mL的分液漏斗中，加入20mL的正己烷（4.3），剧烈振荡2min后静置

5min，收集上层有机相于另一个三角瓶（5.9）中。用15mL的正己烷（4.3）重复提取一次，合并两次

萃取有机相。加入4g～5g的无水硫酸钠（4.5），旋涡振荡10s后，转入100mL的鸡心瓶（5.10）中。

用5mL的正己烷（4.3）洗涤无水硫酸钠，合并正己烷于鸡心瓶(5.10)中。于37℃减压浓缩至8mL～10

mL，用于固相萃取。

7.2固相萃取净化

硅胶固相萃取柱（4.7）预先用3mL正己烷（4.3）活化，上样，控制流速约为每秒1滴，弃去流出

液。4mL正己烷（4.3）淋洗，乙酸乙酯（4.4）8mL洗脱，收集洗脱液于玻璃刻度试管（5.12）中，40

℃氮吹至1.5mL，加入0.40μg/mL内标使用液（4.12）0.50mL，乙酸乙酯（4.4）定容到2mL，混匀，

有机相针式过滤器（5.7）过滤，供气相色谱-质谱仪测定。

7.3仪器参考条件

7.3.1色谱条件

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7.3.1.1石英毛细管柱：14%氰丙基苯基（其中7%氰丙基7%苯基）86%二甲基聚硅氧烷，30m×0.25

mm×0.25μm。

7.3.1.2进样口温度：250℃。

7.3.1.3进样方式：不分流进样。

7.3.1.4进样量：1μL。

7.3.1.5色谱柱升温程序：初始温度为80℃，保持2min；10℃/min升温至185℃；20℃/min升

温至250℃保持4min。

7.3.1.6载气：氦气（纯度>99.999%），流速：1.0mL/min。

7.3.2质谱参数

7.3.2.1电离模式：电子轰击电离源（EI），能量为70eV。

7.3.2.2离子源温度：250℃，传输线温度：250℃，溶剂延迟10min。

7.3.2.3离子检测方式：选择离子检测（SIM），丁香酚检测离子为：103、131、149、164，定量离子

164；甲基丁香酚检测离子：103、147、163、178，定量离子178。

7.4样品的定性测定和定量测定

7.4.1定性测定

7.4.1.1为保证分析的选择性和灵敏度要求，丁香酚和甲基丁香酚的色谱峰应基线分离，同时采用不

同时间窗口检测丁香酚和甲基丁香酚特征离子。

7.4.1.2在相同测试条件下，样液中丁香酚色谱保留时间和内标物保留时间的比值，即相对保留时间，

应与标准工作液中丁香酚的相对保留时间偏差在±0.5%以内，且目标物中检测到定性离子的相