GB/T 14926.21-2008 实验动物 兔出血症病毒检测方法

ICS65．020．30

B44

园宜

中华人民共和国国家标准

14926．21—2008

GB／T

14926．212001

代替GB／T

实验动物兔出血症病毒检测方法

animal--MethodforexaminationofRabbit

Laboratory

disease

virus(RHDV)

hemorrhagic

2008—12—10发布2009—03-01实施

丰瞀嬲紫瓣訾糌瞥星发布中国国家标准化管理委员会仪19

14926．2卜一2008

GB／T

刖昂

GB／T14926<<实验动物》共54个部分，为不同微生物和病毒检测技术方法。

本部分自实施之日起代替GB／T14926．21—2001《实验动物兔出血症病毒检测方法》。

本部分与GB／T14926．2l一200l相比主要技术差异如下：

a)增加兔出血症病毒核酸(RHDV)核酸检测方法；

b)确定兔免疫接种RHDV疫苗后的血清抗体合格判定标准。

本部分由全国实验动物标准化委员会提出并归口。

本部分起草单位：全国实验动物标准化技术委员会。

本部分主要起草人：贺争鸣、付瑞、田克恭。

本部分所代替标准的历次版本发布情况为：

14926．21

——GB／T14926．211994，GB／T2001。

14926．21—2008

GB／T

实验动物兔出血症病毒检测方法

1范围

GB／T

14926的本部分规定了兔出血症病毒(RHDV)的检测方法。

本部分适用于兔RHDV抗原、抗体和病毒核酸的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过GB／T14926的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文

件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成

协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本

部分。

GB／T14926．53实验动物血凝试验

GB／T

14926．54实验动物血凝抑制试验

3原理

血凝试验(HA)：在一定条件下，RHDV能凝集人“O”型红细胞，产生可见的凝集反应。根据这一

特性检测兔肝组织中有无RHDV抗原。

血凝抑制试验(HAI)：在一定条件下，RHDV凝集人“o”型红细胞的能力可被特异性抗体所抑制。

根据这一特性检测兔血清中有无RHDV抗体。

核酸检测：根据RHDVVP60基因序列保守的特点，设计特异引物，扩增目的片段，检测兔组织中

的RHDV核酸。

4主要试剂与器材

4．1试剂

4．1．1血凝素

000

人工感染或自然发病的兔肝组织，经研磨制成10％悬液，3r／min离心10min而获得的上

清液。

4．1．2阳性血清

RHDV抗原免疫或RHDV自然感染恢复后的兔血清。

4．1．3阴性血清

无RHDV感染、未经免疫的兔血清。

4．1．4人“0”型红细胞。

4．1．5缓冲液与溶液

4．1．5．1PBS(pH7．4)

NaCl8

g

KCl0．2

g

2．83

Na2HP04·12H20g

KHzPOt0．2g