GA/T 1618-2019 法庭科学 生物检材中美沙酮检验 液相色谱-质谱法

ICS13.310

A92GA

中华人民共和国公共安全行业标准

GA/T××××－××××

法庭科学生物检材中美沙酮检验

液相色谱-质谱法

Forensicsciences—Examinationmethodsformethadoneinbiological

samples—LC-MS

××××-××-××发布××××-××-××实施

中华人民共和国公安部发布

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前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC179/SC1）提出并归口。

本标准由起草单位：公安部物证鉴定中心、济南市公安局刑事技术科学研究所。

本标准起草人：栾玉静、王瑞花、董颖、王爱华、任昕昕、王芳琳、常靖、宋歌、董林沛、武继锋、

宋蕊。

I

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法庭科学生物检材中美沙酮检验液相色谱-质谱法

1范围

本标准规定了法庭科学生物检材（血、尿、肝、肾、胃及胃内容等）中美沙酮的液相色谱-质谱（LC-MS）

检验方法。

本标准适用于法庭科学生物检材中美沙酮的定性分析和定量分析。其他可疑样品中美沙酮的定性分

析和定量分析可参照使用。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GA/T122毒物分析名词术语

3术语和定义

GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。

4原理

以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对生物检材进行提取、净化及浓缩，采用液相

色谱-质谱法检测，以保留时间、质谱特征离子碎片峰和相对丰度比作为定性判断依据；以峰面积为依

据，采用外标法进行定量分析。

5试剂和材料

5.1试剂

实验用水应符合GB/T6682中规定的一级水，除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯，试

剂包括：

a)甲醇（色谱纯）；

b)乙腈（色谱纯）；

c)0.1mol/LHCl溶液：移取浓盐酸8.3mL，加水稀释至1000mL；

d)5mmol/L甲酸铵溶液（pH值3.5）：称取甲酸铵0.315g，加水溶解并稀释至1000mL，用甲酸

调pH值为3.5；

e)氨水；

f)标准溶液：

1）1.0mg/mL标准物质溶液：根据美沙酮标准物质纯度和盐型换算后，称取适量，用甲醇配

制1.0mg/mL美沙酮标准物质溶液，置于冰箱中冷藏保存。有效期6个月。或采用市售

标准溶液；

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2）10.0µg/mL标准工作溶液：移取1.0mg/mL标准物质溶液0.1mL，用甲醇稀释至10mL，混

匀，密封，置于冰箱中冷藏保存。有效期3个月。实验中所用其他浓度的标准工作溶液均

由1.0mg/mL标准物质溶液用甲醇稀释得到。

注：特殊情况下可使用对照溶液代替标准溶液。

5.2材料

材料包括：

a)具盖离心管；

b)具塞玻璃试管；

c)有机系微孔滤膜：0.22µm；

d)混合型阳离子交换（Oasis®MCX）固相萃取柱或其他等效固相萃取柱，依次用1mL甲醇，1mL

水活化。

注：Oasis®MCX固相萃取柱是Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表

示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

6仪器和设备

仪器和设备包括：

a)液相色谱-质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）和三重四极杆或离子阱质量分析器；

b)电子天平；

c)离心机；

d)振荡器；

e)移液器。

7操作方法

7.1定性分析

7.1.1样品提取

7.1.1.1固相萃取

移取血液等液体检材样品1.0mL～2.0mL，或称取铰碎的肝脏等固体检材样品1.0g～2.0g于具盖离心

管中。加入0.1mol/LHCl溶液4.0mL，混匀，8000r/min离心20min，取上清液转移至已活化好的固相萃取

柱中，控制流速为1mL/min，依次用水1mL、甲醇1mL、乙腈1mL淋洗，挤干水分或离心或真空抽固相

萃取柱2min，用氨水/乙腈（体积比5:95）混合溶液1mL洗脱，收集洗脱液置于浓缩器上50℃下浓缩至干，

残留物用初始流动相1.0mL溶解，经有机系微孔滤膜过滤，供仪器分析。

7.1.1.2质控样品制备

取等量相似基质的空白样品（若无法取到相似基质样品可用血液替代）两份于具盖离心管中，一份

作为空白样品，一份添加美沙酮标准物质，作为添加样品（添加样品的浓度为20ng/mL），与检材平行

操作,得到空白样品提取液和添加样品提取液供仪器分析。

7.1.2仪器检测

7.1.2.1仪器条件

7.1.2.1.1液相色谱-质谱仪（离子阱质量分析器）条件

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以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：

a)色谱柱：C18色谱柱（2.1mm×150mm，3.5µm）或其他等效柱；

b)流动相：A：乙腈，B：5mmol/L甲酸铵溶液（pH值3.5）；

c)洗脱方式：梯度洗脱条件见表1；

表1梯度洗脱条件

时间

AB

min

10%90%

3.090%10%

8.090%10%

11.010%90%

19.010%90%

d)进样量：10µL；

e)柱温：30℃；

f)流速：0.3mL/min；

+

g)离子化模式：ESI；

+

h)扫描方式：正离子扫描，采用二级全扫，母离子[M+H]=310.2，定量子离子m/z=264.9；

i)鞘气（氮气）：30arb；

j)辅助气（氮气）：10arb；

k)喷雾电压：4.5kV；

l)毛细管电压：4.0V；

m)毛细管温度：290℃；

n)相对碰撞能：35%。

7.1.2.1.2液相色谱-质谱仪（三重四级杆质量分析器）条件

以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：

a)色谱柱：ACQUITYUPLCBEHC18色谱柱(2.1mm×50mm,1.7µm)或其他等效柱；

注：ACQUITYUPLCBEHC18色谱柱为Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，

并不是表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

b)流动相：A：乙腈，B：5mmol/L甲酸铵溶液（pH值3.5）；