SF/T 0115-2021 血液中45种有毒生物碱的液相色谱-串联质谱检验方法

ICS07.140

CCSC06

SF

中华人民共和国司法行政行业标准

SF/T0115—2021

代替SF/ZJD0107015—2015

血液中45种有毒生物碱的液相色谱-串联

质谱检验方法

Determinationof45toxicalkaloidsinbloodbyliquidchromatography-tandem

massspectrometry

2021-11-17发布2021-11-17实施

中华人民共和国司法部发布

SF/T0115—2021

目次

前言.................................................................................II

1范围...............................................................................1

2规范性引用文件.....................................................................1

3术语和定义.........................................................................1

4原理...............................................................................1

5试剂、仪器和材料...................................................................1

6定性分析...........................................................................2

7定量分析...........................................................................5

8分析结果评价.......................................................................7

附录A（资料性）血液中45种有毒生物碱的检出限和定量限................................8

I

SF/T0115—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件代替SF/ZJD0107015—2015《血液中45种有毒生物碱成分的液相色谱-串联质谱检验方法》，

与SF/ZJD0107015—2015相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：

a)更改了定性分析和定量分析的表述方式（见第6章和第7章，2015年版的6.2.2和6.2.3）；

b)增加了定性分析和定量分析中进样、记录和判断依据等内容（见6.2.2、6.3、6.4、7.3.2和

7.4.1）；

c)更改了部分离子对参数（见6.2.1中表1，2015年版的附录A中表A.1）。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由司法鉴定科学研究院提出。

本文件由司法部信息中心归口。

本文件起草单位：司法鉴定科学研究院。

本文件主要起草人：刘伟、沈敏、卓先义、沈保华、向平、严慧。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：

——2015年首次发布为SF/ZJD0107015—2015；

——本次为第一次修订。

II

SF/T0115—2021

血液中45种有毒生物碱的液相色谱-串联质谱检验方法

1范围

本文件描述了血液中45种有毒生物碱的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）的检验方法，包括原理、

试剂、仪器和材料、定性分析、定量分析以及分析结果评价。

本文件适用于血液中45种有毒生物碱的定性定量分析。其它检材中45种有毒生物碱的定性定量分

析参照使用。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GA/T122毒物分析名词术语

3术语和定义

GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。

4原理

血液中的45种有毒生物碱在碱性条件下用有机溶剂提取和净化后，用液相色谱-串联质谱法(LC-

MS/MS)进行检测，经与平行操作的空白样品和添加样品比较，以保留时间、特征离子对和离子对丰度比

进行定性分析；以定量离子对峰面积为依据，采用内标法或外标法进行定量分析。

5试剂、仪器和材料

试剂

试验用水应为符合GB/T6682中规定的一级水，所用试剂和要求如下：

a)乙腈：HPLC级；

b)50%甲酸溶液：HPLC级；

c)甲醇：HPLC级；

d)乙醚：分析纯；

e)乙酸铵：色谱纯；

f)pH9.2硼砂缓冲液：分析纯；

g)20mmol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）：分别称取乙酸铵1.54g和50%甲酸溶液2mL置于1000mL

容量瓶中，加水定容至刻度，pH值约为4；

h)混合溶液[乙腈:20mmol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）（7:3，v/v）]；

i)45种有毒生物碱对照品储备液：分别精密称取45种有毒生物碱对照品各适量，用甲醇配成质

量浓度为1.0mg/mL对照品储备液，置冰箱中冷冻保存，有效期为12个月；

j)45种有毒生物碱对照品工作液：试验中所用其它质量浓度的对照品工作液均由符合5.1i)的

对照品储备液用甲醇稀释而得。密封，置于冰箱中冷藏保存，有效期为3个月；

k)内标物SKF525A对照品储备液：精密称取SKF525A适量，用甲醇配制成1.0mg/mLSKF525A对照品储

备液，置冰箱中冷冻保存，有效期为12个月；

1

SF/T0115—2021

l)内标物SKF525A对照品工作液：将符合5.1k)的内标物SKF525A对照品储备液用甲醇稀释得

1µg/mLSKF525A内标工作液，置冰箱中冷藏保存，有效期为3个月。

仪器和材料

仪器和材料包括：

a)液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）；

b)电子天平：分度值≤0.1mg；

c)涡旋混合器；

d)离心机：转速4000r/min；

e)移液器；

f)恒温水浴锅；

g)微孔滤膜：0.22m。

6定性分析

样品前处理

6.1.1案件样品

取血液1mL，加1µg/mLSKF525A内标工作液10L，加pH9.2硼砂缓冲液1mL后，用乙醚3mL提取，

涡旋混合，3000r/min离心3min，将乙醚层转移至另一试管中，按照同样的方法提取两次，合并乙醚液，

置60C水浴中挥干，残留物用混合溶液[乙腈:20mmol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）（7:3，v/v）]100L

复溶，过0.22m微孔滤膜，供仪器分析。

6.1.2空白样品

取空白血液1mL，加1µg/mLSKF525A内标工作液10L，然后按照6.1.1的方法操作。

6.1.3添加样品

若案件样品中出现可疑生物碱（参见附录A），则取空白血液1mL，添加案件样品中出现的可疑生

物碱对照品工作液，然后按照6.1.1的方法操作。

仪器分析

6.2.1液相色谱-串联质谱参考条件

液相色谱-串联质谱参考条件如下，应用时可根据不同品牌仪器的实际情况进行调整。

a)色谱柱：CapcellPakC18MGⅡ液相色谱柱（250mm2.0mm5m）或其它等效柱，前接保护柱；

注：CapcellPakC18MGⅡ液相色谱柱为Shiseido公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本文件的使用者，

并不是表示对该产品的认可。如果其它等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品；

b)柱温：室温；

c)流动相：乙腈:20mmol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）（7:3，v/v）；

d)流速：200L/min；

e)进样量：5L；

f)离子源：电喷雾电离-正离子模式(ESI+)；

g)检测方式：多反应监测（MRM）；

h)离子源电压（IS）：5500V；

i)碰撞气(CAD)、气帘气(CUR)、雾化气(GS1)和辅助气2(GS2)均为高纯氮气，使用前调节各

气流流量以使质谱灵敏度达到检测要求；

j)去簇电压(DP)和碰撞能量(CE)等电压值应优化至最佳灵敏度；

k)45种有毒生物碱的MS/MS参数和保留时间参见表1。

2

SF/T0115—2021

表145种有毒生物碱的MS/MS参数和保留时间

去簇

保留时间定性离子对定量离子对碰撞能量

中文名英文名电压

minm/zm/zeV

V

354.3→209.2354.3→209.226

SKF525A（内标）SKF525A4.3644

354.3→167.435

290.3→124.1290.3→124.134

阿托品Atropine2.3885

290.3→93.144

352.1→336.1352.1→336.141

巴马汀Palmatine2.9060

352.1→308.241

644.4→584.2644.4→584.244

草乌甲素BulleyaconitineA3.3280

644.4→552.250

181.1→124.0181.1→124.026

茶碱Theophylline2.5450

181.1→96.033

616.4→556.2616.4→556.245

次乌头碱Hypaconitine3.21100

616.4→524.048

312.2→58.2312.2→58.238

蒂巴因Thebaine2.6360