YC/T 251-2008 烟草及烟草制品 葡萄糖、果糖、蔗糖的测定 离子色谱法

犐犆犛６５．１６０

犡８５

备案号：—

２３５９０２００８

中华人民共和国烟草行业标准

／—

犢犆犜２５１２００８

烟草及烟草制品葡萄糖、果糖、

蔗糖的测定离子色谱法

ㅤㅤㅤㅤ

—，

犜狅犫犪犮犮狅犪狀犱狋狅犫犪犮犮狅狉狅犱狌犮狋狊犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犾狌犮狅狊犲

狆犵

—

犳狉狌犮狋狅狊犲犪狀犱狊狌犮狉狅狊犲犐狅狀犮犺狉狅犿犪狋狅狉犪犺犻犮犿犲狋犺狅犱

犵狆

２００８０４１４发布２００８０４１４实施

国家烟草专卖局发布

／—

犢犆犜２５１２００８

烟草及烟草制品葡萄糖、果糖、蔗糖的测定

离子色谱法

１范围

本标准规定了烟草及烟草制品中葡萄糖、果糖、蔗糖的离子色谱测定方法。

本标准适用于烟草及烟草制品中葡萄糖、果糖、蔗糖的测定。

２规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

／卷烟第部分：抽样

ＧＢＴ５６０６．１１

／分析实验室用水规格和试验方法（／—，：）

ＧＢＴ６６８２ＧＢＴ６６８２１９９２ｎｅＩＳＯ３６９６１９８７

ｑ

／烟草成批原料取样的一般原则（／—，：，）

ＧＢＴ１９６１６ＧＢＴ１９６１６２００４ＩＳＯ４８７４２０００ＭＯＤ

／烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法

ＹＣＴ３１

３原理

ㅤㅤㅤㅤ

用水提取样品中的葡萄糖、果糖、蔗糖，通过阴离子交换分离后，进行电化学检测分析。

４试剂

除特别要求以外，均应使用分析纯试剂，水应符合／中一级水的规定。

４．１ＧＢＴ６６８２

氢氧化钠溶液，（质量分数）。

４．２５０％

苯甲酸溶液，（质量分数）。

４．３０．１％

４．４流动相：

———流动相：水；

Ａ

———流动相：氢氧化钠溶液，／。移取氢氧化钠溶液（）至容

Ｂ５０ｍｍｏｌＬ２．６ｍＬ５０％４．２１０００ｍＬ

量瓶中，用水稀释定容至刻度；

———流动相：氢氧化钠溶液，／。移取氢氧化钠溶液（）至

Ｃ２５０ｍｍｏｌＬ１３．０ｍＬ５０％４．２１０００ｍＬ

容量瓶中，用水稀释定容至刻度；

———流动相：乙酸钠溶液，／。称取乙酸钠，用水溶解，然后转入容量瓶

Ｄ１ｍｏｌＬ４１．０２ｇ５００ｍＬ

中，用水稀释定容至刻度。

４．５单一标准储备液：分别称取０．１葡萄糖、果糖、蔗糖，精确至０．０００１，用０．１％苯甲酸溶液

ｇｇ

（）溶解，然后分别转入容量瓶中，用苯甲酸溶液（）定容至刻度，配制成浓度约为

４．３１００ｍＬ０．１％４．３

１０００／的单一标准储备液。贮存于条件下，应在个月内使用。

μｇｍＬ４℃１

混合标准储备液：分别移取葡萄糖、果糖、蔗糖单一标准储备液（）于个容

４．６１０．０ｍＬ４．５１１００ｍＬ

量瓶中，用苯甲酸溶液（）稀释定容至刻度，配制成浓度约为／的葡萄糖、果糖、蔗糖

０．１％４．３１００μｇｍＬ

混合标准储备液。

混合系列工作标准液：分别移取一定体积的混合标准储备液（）于容量瓶中，用苯

４．７４．６５０ｍＬ０．１％

１

／—

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甲酸溶液（）稀释定容至刻度，配制浓度分别约为／、／、／、／、

４．３０．１ｍＬ０．５ｍＬ１．０ｍＬ２．０ｍＬ

μｇμｇμｇμｇ

／、／、／的葡萄糖、果糖、蔗糖混合系列工作标准液。

５．０ｍＬ１０ｍＬ２０ｍＬ

μｇμｇμｇ

５仪器设备

５．１分析天平，精确至０．１ｍ。

ｇ

５．２振荡器。

５．３离子色谱仪，配置四元梯度泵和电化学检测器。

５．４色谱柱：糖离子交换柱（ＣａｒｂｏＰａｃＰＡ２０或其他等效柱）；分析柱：３ｍｍ×１５０ｍｍ；保护柱：

３ｍｍ×３０ｍｍ。

６抽样及样品制备

按照／和／抽取实验室样品。

６．１ＧＢＴ５６０６．１ＧＢＴ１９６１６

按照／制备样品，并测定样品水分含量。

６．２ＹＣＴ３１

７分析步骤

７．１样品萃取

准确称取０．５ｇ样品，精确至０．０００１ｇ，于２５０ｍＬ磨口三角瓶中，加入５０．０ｍＬ水，盖上塞子，置

于振荡器（）上，振荡萃取。

５．２６０ｍｉｎ

７．２样品过滤

用定性滤纸过滤萃取液（），弃去前几毫升滤液，收集后续滤液做分析之用。

７．１

７．３样品稀释ㅤㅤㅤㅤ

移取滤液（）于容量瓶中，用苯甲酸溶液（）稀释定容至刻度，溶液经

１．０ｍＬ７．２１００ｍＬ０．１％４．３

０．４５ｍ滤膜过滤后进行离子色谱分析。如样品溶液中葡萄糖、果糖、蔗糖浓度超出标准工作曲线的浓

μ

度范围，则应稀释后重新测定。

７．４仪器工作条件

———柱温：；

３０℃

———流速：／；

０．３０ｍＬｍｉｎ

———进样量：；

１０Ｌ

μ

———检测器：电化学检测器，脉冲安培检测模式；

———淋洗液梯度洗脱程序见表；

１

———检测器检测电位波形见表。

２

表１淋洗液梯度洗脱程序

时间／流动相／流动相／流动相／流动相／备注

ｍｉｎＡ％Ｂ％Ｃ％Ｄ％

－４５．０００３６０２４４０

－３９．００１３６０２４４０

－３９．０００２００８００

－１９．００１２００８００

－１９．０００９０１０００

０．０００９０１０００开始进样采集数据

３５．０００９０１０００停止数据采集

２

／—

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表２检测器检测电位波形

时间／电位（／）／积分状态

ｓＡＡＣｌＶ

ｇｇ

０．０００．１０

０．２００．１０开始

０．４００．１０停止

０．４１－２．００

０．４２－２．００

０．４３０．６０

０．４４－０．１０

０．５０－０．１０

７．５标准工作曲线的制作

用葡萄糖、果糖、蔗糖混合系列工作标准液（）制备标准工作曲线。由保留时间进行定性，根据混

４．７

合系列工作标准液的浓度及各糖类组分响应峰面积，外标法定量。混合系列工作标准液分析色谱图参

见附录中图。

ＡＡ．１

７．６样品测定

ㅤㅤㅤㅤ

按照仪器测试条件测定样品溶液（），每个样品平行测定两次。样品溶液分析色谱图参见附录

７．３Ａ

中图Ａ．２。

８结果的计算与表述

８．１结果的计算

样品中葡萄糖、果糖、蔗糖的含量以质量分数计，数值以表示，按式（）计算：

狑％１

犮犞犽

××

…………（）

狑＝×１００１

犿（狑）

１

×－１

式中：

———样品溶液中葡萄糖、果糖、蔗糖的测定浓度，单位为毫克每升（／）；

犮ｍＬ

ｇ

犞———萃取液的体积，单位为升（）；

Ｌ

犿———样品的质量，单位为毫克（）；

ｍｇ

犽———稀释倍数；

狑———样品水分的质量分数，。

１％

８．２结果的表述

两次平行测定结果的相对平均偏差不应大于５．０％。以两次平行测定值的算术平均值作为测定结

果，结果精确至０．０１％。

９精密度和准确度

９．１重复性和再现性

方法的重复性和再现性测试结果如表所示。

３

３

／—

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表３方法的重复性和再现性测试结果

重复性再现性

组分

平均值／％变异系数／％平均值／％变异系数／％

葡萄糖７．８５３．１７．７４３．８

果糖２．７４２．０２．６７２．２

蔗糖１．８３４．２１．９０４．５

９．２回收率

方法回收率试验结果如表所示。

４

表４回收率试验结果

组分原含量／％加入标样量／ｍｇ回收率／％变异系数／％

葡萄糖７．８５２０９８．６３．６

果糖２．７４１０１０３．２２．５

蔗糖１．８３５．０９５．７４．６

１０检出限

方法检出限如表所示。

５

表５方法检出限

／

组分检出限／（）

μｇｇ

葡萄糖２２．０

ㅤㅤㅤㅤ

果糖５１．０

蔗糖３５．０

１１检验报告

检验报告应包括以下内容：

———样品的唯一性资料；

———参照本标准所使用的试验方法；

———检测结果，包括各单次测定结果及其平均值；

———与本标准规定的分析步骤的差异；

———在检测中观察到的异常现象；

———检测日期；

———检测人员。

４

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附录犃

（资料性附录）

色谱图示例及色谱柱的维护

犃．１混合系列工作标准液分析色谱图示例见图Ａ．１。

ㅤㅤㅤㅤ

图犃．１混合系列工作标准液分析典型色谱图

犃．２样品溶液分析色谱图示例见图Ａ．２。

图犃．２样品溶液分析典型色谱图

５

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犃．３色谱柱的维护：实验表明，烟草萃取液的复杂基质会影响相应的离子色谱系统，为确保良好的分

离能力，需要对色谱柱进行清洗，建议每分析十次样品后进行清洗。色谱柱清洗及平衡程序见表Ａ．１。

表犃．１色谱柱清洗及平衡程序

时间／流动相／流动相／流动相／流动相／％

ｍｉｎＡ％Ｂ％Ｃ％Ｄ

０．０００３６０２４４０

３０．０００３６０２４４０

３０．００１２００８００

６０．０００２００８００

６０．００１９０１０００

９０．０００９０１０００

ㅤㅤㅤㅤ

６