GB/T 26349-2010 蝇类抗药性检测方法 家蝇不敏感乙酰胆碱酯酶法

ICs11。020

CO5

中华人民共和国国家标准

GB/T26349-2o1o

蝇类抗药性检测方法

家蝇不敏感乙酰胆碱酯酶法

Test1nethodsoF1田ˉ

yresistancetoinsecticidesˉ

⒛i1-0卜10发布2011-05-01实施

中华人民共和国卫生部

发布

国国标化管理

中家准委员会

GB/T2s349-ˉ

201o

前言

本标准按照GB/T1.1一zOOg给

出的起草规则起草。

本标准由中人民

华共和卫

国生部提出并归口。

本标准起草单位:中国农业、

大学北京市疾病预防控钔心、

中中国人民解放军军事医学科学院馓生

物流行病研究所。

本标准主要起草人:高希武、、

曾晓亢梁、

沛马、、

彦刘婷佟颖、。

赵肜言

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GB/T26349-2o1o

蝇类抗药性检测方法

家蝇不敏感乙酰胆碱酯酶法

1范围

本标准规了sc四

定家蝇0饧J缸c色)不敏感乙酰胆)的检测方法

本标准适用于家蝇对有、

氨基甲夔巾关荮衬抗药挂的生呖检测。

2术语和定义

下列术语和定

2.1

乙酰胆碱酯

能够抑制单位为mol/L或

mmol/L。

2.2

F1代Fl

从现场捕

3试虫

现场采集储存不超过1d,

-20℃条件下

4试剂

4.1磷酸氢二钠(N州

4.2磷酸二氢钾(KH2

4.3曲拉通℃100(TⅡ

4.4乙酰硫代胆碱(ATCω,

4.55,5’-二硫双硝基苯甲酸(

4.6磷酸缓冲液(0.1mol/L,pH7.512H20和2.16gKH2Po4,蒸

馏

水定容至1000mL。

4.7DTN⒊乙显:称12。4mgDTNB,溶

醇色剂取于125mL95%乙,加50mL磷

醇中人酸缓冲液,最

后用蒸馏水定容至250mL,4℃

避光保存。

4.8ATCh溶:称28.9mgATCh溶10mL蒸

液取于馏水中,一zO℃

避光保存。

5分光光度法

5.1仪器设备

5.1.1

分光光度计。

GB/T26349-2010

5.1.2恒温水浴箱。

5.1.3玻璃组织匀浆器。

5.1.4台式冷冻离心机(离心力10000g以上)。

5.1.5加液器。

5.2杀虫药剂的配制

用丙酮或其他的有机溶剂将杀虫药剂配制成母液,试验前用磷酸盐缓冲液(含0.1%Tritonr

区浓度见表A。1)的2倍,溶剂

100)稀释到区分浓度(常见杀虫药剂对敏感家蝇品系乙酰胆碱酯酶的分

在反应体系中的最终浓度应小于1%。

5.3操作步骤

5.3.1取家蝇1只,用眼科剪刀或手术刀片将头部剪(切)下,放人4℃预冷的玻璃组织